罗险峰
- 作品数：61 被引量：296H指数：9
- 供职机构：贵州省动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：贵州省农业攻关项目贵州省农业科技攻关项目贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪博卡病毒的研究进展被引量：1
- 2012年
- 猪博卡病毒属于细小病毒科细小病毒亚科博卡病毒属,单链线性DNA病毒。该病毒于2009年在瑞典患有仔猪断奶后多系统衰竭综合征的猪群中被发现。在我国,多省市发病猪场也相继检测出猪博卡病毒。猪博卡病毒作为一种新型病毒,人们对其的研究仍处于初步探索阶段。文章结合现有的文献资料及研究成果,分别从猪博卡病毒的发现、分子特征、流行病学、临床症状、诊断方法以及防治方法等方面进行了阐述,以期为有效防控规模化猪场猪博卡病毒的发生提供一定的理论依据。
- 郝飞汤德元罗险峰李春燕曾智勇甘振磊王凤刘建
- 猪细小病毒GZ株NS1基因主要抗原区的克隆与序列分析被引量：3
- 2013年
- 为了解猪细小病毒（PPV）的分子流行病学和遗传变异等，对送检的疑似猪细小病毒感染病料进行了病毒分离鉴定，将分离毒株同步接种于ST细胞，并对分离病毒分别进行了血凝试验、中和试验、病毒理化特性和病毒核酸类型检测等鉴定；同时设计1对扩增PPVNS1基因主要抗原区的特异性引物，扩增、克隆和分析了分离毒株的NS1基因主要抗原区序列。结果表明：从送检的疑似猪细小病毒感染病料中成功分离出1株PPV贵州毒株，并将其命名为Gz株；扩增的NS1基因主要抗原区序列长度为1131bp；遗传进化分析表明，PPVGZ株与国内分离的GX株、N株、SR-1株、PPV2010株、s-1株和YL株的核苷酸序列同源性达到98．3％以上，推导的氨基酸序列的同源性为97．9％～100％，表明NS1基因序列比较保守，PPV的NS1基因主要抗原区基因克隆测序可以作为诊断猪细小病毒感染的依据。
- 刘建汤德元李春燕曾智勇罗险峰甘振磊王凤郝飞姜德荣王洪光
- 关键词：NS1基因克隆
- 贵州省某猪场猪瘟病毒感染的诊断
- 2012年
- 为弄清贵州某猪场猪发病死亡的原因,采用流行病学调查、临床症状观察、病理解剖诊断、猪瘟抗体快速金标检测卡检测和RT-PCR检测核酸确诊等方法,对该猪场发病猪进行了诊断。实验结果表明:流行病学调查、剖检病理和猪瘟抗体快速金标检测卡检测初步诊断该猪场发病猪疑似猪瘟病毒感染,RT-PCR检测核酸确诊为猪瘟病毒野毒感染。
- 罗险峰刘建汤德元李春燕
- 关键词：猪瘟RT-PCR
- 猪细小病毒非结构蛋白NS1基因的克隆、序列分析及蛋白质结构预测被引量：8
- 2013年
- 根据GenBank登录的猪细小病毒NADL-2株和China株序列,利用Oligo 6.0软件设计1对扩增NS1全基因的特异性引物,对从贵州省安顺地区检测到的PPV的NS1基因进行扩增、克隆、测序、序列分析和蛋白质结构预测分析。测序结果表明,扩增的目的基因长度为1986bp,共编码659个氨基酸,其中NS1基因的1287、1288和1298位碱基发生了缺失,导致429、430和433位氨基酸发生缺失。系统发生树结果表明,本试验测序的NS1基因与NADL-2弱毒株处在同一进化分支;氨基酸同源性与NADL-2弱毒株和Kresse毒株最高,均为98.6%。蛋白质结构预测分析结果表明,非结构蛋白NS1的分子质量为75269.76u,理论等电点pI为7.25,不稳定系数为41.57,推测其为不稳定蛋白质;脂肪指数为73.58,总体平均亲水性为-0.565,推测该蛋白质是一种亲水性蛋白质;该蛋白质含有丰富的α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲,柔性区域较多,呈连续分布;非结构蛋白NS1无跨膜区和信号肽;预测非结构蛋白NS1含有3个N-糖基化位点、3个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、5个蛋白激酶C磷酸化位点、22个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、1个酪氨酸激酶磷酸化位点、8个N-肉豆蔻酰化位点、1个酰胺化位点及1个ATP/GTP结合位点基序A(P-环);该蛋白质抗原表位较多,存在10个主要的抗原表位。
- 刘建汤德元罗险峰曾智勇李春燕甘振磊王凤郝飞王洪光
- 关键词：猪细小病毒NS1基因克隆蛋白质结构预测
- 规模化猪场猪瘟净化措施的研究被引量：13
- 2013年
- 猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性和致死性病毒性传染病,该病流行广泛,发病率和死亡率较高,是危害我国乃至世界养猪业的主要疫病之一。近年来我国猪瘟的流行和发展呈现新的变化,呈散发流行且有上升趋势,临床表现趋于非典型化,常发生迟发型、温和型猪瘟及带毒母猪综合征,这使得规模化猪场猪瘟的防制变得更为复杂艰难。如何对规模化猪场的猪瘟进行监测和净化,是当前和今后一段时期规模化养猪急需解决的问题。本研究分别在贵州省贵阳市和思南县选取一个规模化猪场作为示范场,通过制定科学的猪瘟净化方案,结合一系列措施实施开展猪瘟净化工作。结果表明,该净化方案可以有效提高猪群的整体健康水平,创造相应的经济效益,并可达到净化示范猪场猪瘟的目的,值得推广应用。
- 郝飞汤德元罗险峰曾智勇李春燕甘振磊王凤刘建王洪光
- 关键词：规模化猪场猪瘟
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪副嗜血杆菌混合感染的诊断被引量：4
- 2012年
- 为弄清贵州某场猪发病猪的死亡原因,采用流行病学调查、临床症状观察、病理解剖诊断和RT-PCR检测核酸确诊等方法,对该场猪发病猪死亡原因进行了诊断。结果表明:流行病学调查和剖检病理初步诊断该猪场发病猪疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒和细菌混合感染,RT-PCR检测核酸确诊发病猪为猪繁殖与呼吸综合征病毒感染,细菌培养、分离和生化特性鉴定确诊为猪副嗜血杆菌。造成该猪场猪发病死亡的原因为猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪副嗜血杆菌混合感染所致。
- 刘建汤德元曾智勇罗险峰李春燕甘振磊王凤郝飞
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征
- 猪水疱性口炎病毒基因及其疫苗的研究进展被引量：3
- 2012年
- 猪水疱性口炎是由水疱性口炎病毒引起的高度接触传染性的病毒性疾病。其临床特征为猪的唇部,鼻及口腔等处发生水疱,并从口中不断向外流涎,有时常常还发生在蹄冠和趾间皮肤上,其症状主要以水疱为主。该病在全球许多地区造成广泛流行。近年来,由于产品贸易量的增加,猪水疱性口炎病毒也陆续的传入我国。由于该病与猪水疱病、猪口蹄疫和猪水疱性疹等病毒性疾病容易混淆,因此对该病做出准确地诊断与防制显得尤为重要。在VSV疫苗的研究方面,主要是灭活疫苗和弱毒疫苗的研究,而在新型疫苗的研究方面很少。本文主要综述了猪水疱性口炎病毒的基因及其疫苗的研究进展,为进一步了解和预防该病提供参考依据。
- 甘振磊汤德元罗险峰曾智勇李春燕王凤
- 关键词：基因组结构疫苗研究
- 某猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒和副猪嗜血杆菌混合感染的诊治被引量：4
- 2013年
- 笔者于2011年2月对发生在贵州省某猪场发生的猪繁殖与呼吸综合征病毒和副猪嗜血杆菌混合感染的疫情进行了诊治，结果报告如下。
- 刘建汤德元曾智勇罗险峰李春燕甘振磊王凤郝飞
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒副猪嗜血杆菌诊治猪场疫情
- 乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达及其免疫原性的研究被引量：9
- 2012年
- 收集某猪场1例发病种公猪的睾丸病料,处理后采用细胞培养与乳鼠脑内接毒相结合的方法盲传并结合RT-PCR方法分离鉴定,命名为乙型脑炎病毒(JEV)贵州分离株(GZ株),然后根据GenBank登录的日本乙型脑炎病毒SA14和SA14-14-2株全基因序列设计并合成1对扩增E基因的特异性引物,用RT-PCR方法扩增出JEV贵州分离株E基因,并将E基因克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-T-E,经双酶切鉴定、测序及序列分析鉴定后,再将E基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建乙脑病毒E基因原核表达质粒pET-32a-E,将构建好的原核表达质粒pET-32a-E转化至宿主菌BL21(DH3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳和Western blot分析,得到了约59ku条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化和浓缩目的蛋白,并将其加入弗氏佐剂后免疫小鼠,免疫后采血检测抗体。结果显示:乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达目的蛋白能诱导小鼠产生一定抗体水平,该研究为乙型脑炎亚单位疫苗的研究奠定了基础。
- 汤德元王凤马萍罗险峰李春燕曾智勇徐健刘建
- 关键词：乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达免疫原性
- 猪博卡病毒流行病学研究被引量：20
- 2012年
- 猪博卡病毒属于细小病毒科细小病毒亚科博卡病毒属单链线性DNA病毒,该病毒于2009年在瑞典发现。作为一种新型病毒,人们对其的研究仍处于初步探索阶段。本文从博卡病毒的由来、猪博卡病毒的发现、分类、基因组结构及流行病学等方面进行阐述,并根据GenBank收录的25条猪博卡病毒的部分基因和全基因序列,利用DNAStar分析软件,通过Jotun-Hein算法,分别从猪博卡病毒的NS、NP、VP以及全基因序列进行相似性临近排组分析,并建立了PBoV系统发育树。结果发现可将猪博卡病毒分为2个大支和若干遗传簇,但这些不同的遗传簇所包含的毒株在核苷酸序列上仍然存在着一定的差异。
- 郝飞汤德元李春燕罗险峰张华马萍曾智勇洪尼宁刘霞
- 关键词：分子流行病学遗传进化分析
