窦万臣
- 作品数：105 被引量：389H指数：10
- 供职机构：北京协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划科技部基础研究重大项目前期研究专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 二型谷氨酸羧肽酶口服基因疫苗的制备及其降低大鼠麻醉药用量的初步研究被引量：1
- 2004年
- 目的 研制携带二型谷氨酸羧肽酶 (GCPⅡ )的口服疫苗 ,探讨该疫苗对大鼠麻醉药用量的影响。方法 采用聚合酶链反应、酶切连接和蓝白筛选的方法 ,构建GCPⅡ的表达载体 ;用磷酸钙共沉淀的方法转染HEK2 93细胞 ,G4 18筛选阳性细胞克隆 ;逆转录聚合酶链反应和免疫荧光细胞染色的方法鉴定阳性细胞株 ;氯化钙法制备携带GCPⅡ表达载体的减毒鼠伤寒沙门氏菌口服疫苗(SL GCPⅡ ) ;采用原代培养的巨噬细胞吞噬SL GCPⅡ的方法 ,观察疫苗的体外表达情况 ;将 5 0只雄性SD大鼠随机分为A、B 2组 ,每组 2 5只 ,2组鼠的体重分别为 ( 174 g±13g)和 ( 172 g± 11g) ,差异无显著意义 (P =0 0 72 )。A组胃内灌注 6 0 0 μL、OD2 60 0 6SL GCPⅡ ,两周内 4次给药 ;B组为对照组 ,给予SL32 6 1,剂量和方法与A组相同。采用免疫荧光的方法检测大鼠循环中GCPⅡ抗体滴度 ,观察麻醉药戊巴比妥钠的用量。结果 扩增GCPⅡ基因并构建了含有GCPⅡ基因的表达载体———pCDNA3 1 GCPⅡ ;建立了细胞株HEK 2 93 GCPⅡ ;体外实验证明培养的巨噬细胞吞噬SL GCPⅡ后 ,能够有效表达GCPⅡ基因。体内实验发现口服疫苗能够激活 2 2 / 2 5只SD大鼠产生GCPⅡ抗体 ,实验组麻醉药戊巴比妥钠的用量 ( 36 9mg/kg± 1 6mg/kg)显著低于对照组 ( 4 0
- 田士强王任直李桂林王欣张波姚勇窦万臣孔燕国张振兴栗世方
- 关键词：麻醉药戊巴比妥
- 成年大鼠脑梗死后自体神经干细胞的原位增殖被引量：10
- 2003年
- 制作大鼠脑梗死模型 ,采用免疫组化染色方法 ,观察脑梗死后 1、3、7、14和 2 8d时 ,梗死侧神经干细胞增殖及其表达标记物BrdU和nestin的动态变化。与对照组相比 ,伤侧皮层、海马及室下区的BrdU和nestin阳性细胞数于伤后 1d开始增多 ,7d达高峰 ,2 8d后接近正常水平。结果表明 :脑梗死可激发成年大鼠自体神经干细胞原位增殖 ;自体神经干细胞对脑梗死损伤有一定的反应能力 。
- 张波王任直李桂林姚勇窦万臣孔燕国田士强
- 关键词：成年大鼠脑梗死自体神经干细胞动物模型
- 前颞叶离断术是颞叶癫痫的良好替代手术方式
- 窦万臣王任直郭毅卢强周祥琴苏长保吴立文
- 男性垂体泌乳素腺瘤手术治疗疗效分析被引量：2
- 2008年
- 目的总结男性垂体泌乳素(PRL)腺瘤的手术疗效。方法回顾性分析102例行手术治疗的男性垂体PRL腺瘤病人的临床资料。平均年龄36.55岁。血清泌乳素63.5～150000ng/ml,肿瘤最大径4～70mm。本组头痛50例,视力障碍47例,视野缺损41例,性功能障碍59例。根据Knosp分级方法,其中侵袭性腺瘤60例。结果肿瘤全切除56例,次全切除46例。经手术及综合治疗后,PRL水平降至正常15例(14.71%),明显下降21例(20.59%);性功能障碍恢复正常17例,头痛消失或明显改善38例,视力障碍恢复正常或改善39例,视野缺损恢复正常或改善37例。结论男性PRL腺瘤病人具有年龄高、肿瘤大且多呈侵袭性生长及PRL水平高等特点,单纯手术治疗疗效差,难以取得满意效果。应结合病人具体情况,采用手术、药物及放射治疗等综合治疗方法。
- 王曲柳夫义任祖渊苏长保杨义马文斌李永宁幸兵连伟杨众许志勤窦万臣李桂林姚勇刘窗溪王任直
- 关键词：催乳素神经外科手术
- 一例家族性颅内海绵状血管瘤基因新突变位点报道及文献复习被引量：3
- 2020年
- 目的:对一例家族性颅内海绵状血管瘤(FCCM)家系进行临床诊断、治疗及遗传学分析,并复习相关文献。方法:对先证者及其亲属收集临床资料及应用全外显子组测序(WES)技术进行基因分析。结果:先证者及其大儿子临床诊断为FCCM,且先证者合并皮肤血管畸形,其CCM1/KRIT1基因均发现c.1307_1308insT的杂合核苷酸变异,该变异导致从第436号氨基酸亮氨酸(Leu)开始的氨基酸合成发生改变,并在改变后的第6个氨基酸终止(p.Leu436PhefsTer6),为移码变异。其他无症状的家族成员,均未见该基因突变。该位点突变在之前未见报道。先证者为双侧颞叶海绵状血管瘤,治疗相对困难,经两次手术后疗效欠佳,仍需密切随访。结论:FCCM患者CCM1/KRIT1基因有新的突变位点;先证者临床表现除顽固性癫痫发作外,合并CCM1基因突变导致的皮肤血管畸形;先证者表现为多发海绵状血管瘤(CCMs),双侧颞叶为可疑致痫灶,经两次手术治疗后效果欠佳。
- 杨琼刘海英郭金竹刘琦窦万臣
- 神经干细胞应用的理论基础和策略
- 2003年
- 干细胞是指能自我更新和多向分化潜能的细胞，对各种变性病变和器官损害有潜在的治疗价值，目前已成为研究热点[1]。
- 王任直张波窦万臣郑彤
- 关键词：神经干细胞中枢神经系统疾病脑损伤神经干细胞移植
- 神经导航下经蝶垂体腺瘤手术治疗经验体会
- 目的总结神经导航下经蝶手术治疗垂体腺瘤的经验,并讨论其适应证和注意事项。方法对我科自2006年至2010年收治的138例神经导航下经蝶垂体腺瘤手术病例进行回顾性分析,上述病例占我科同期经蝶垂体腺瘤手术病例的6.6%。手术...
- 许志勤苏长保王任直任祖渊杨义马文斌李永宁幸兵连伟姚勇李桂林窦万臣
- 关键词：垂体腺瘤神经导航经蝶手术
- 文献传递
- 脑梗死后自体神经干细胞原位增殖与分化的实验研究被引量：10
- 2003年
- 目的 研究成年大鼠脑梗死后自体神经干细胞的原位增殖和分化。方法 雄性Wistar大鼠共 112只 ,分对照组 (12只 )、脑梗死后 1d组 (2 0只 )、脑梗死后 3d组 (2 0只 )、脑梗死后 7d组 (2 0只 )、脑梗死后 14d组 (2 0只 )、脑梗死后 2 8d组 (2 0只 )。大鼠于不同的时间处死 ,并取出大脑 ,处死前均注射 5 溴胱氧腺苷嘧啶 (BrdU)。用免疫组织化学方法动态检测BrdU、Musashil、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、神经元核性蛋白 (NeuN)的表达。BrdU、Musashil确定神经干细胞的增殖 ,GFAP、NeuN确定神经干细胞的分化。结果 与对照组相比 ,大鼠海马BrdU+ 细胞和BrdU+ /Musashil+ 细胞数在脑梗死后 1d组开始增加 ,7d组达到高峰 ,2 8d组接近正常水平 ;BrdU+ /GFAP+细胞数无明显变化 ;BrdU+ /NeuN+ 细胞数在脑梗死后 14d组开始增加 ,2 8d组最多。结论 大鼠脑梗死激活自体神经干细胞原位增殖 ,并且大多数增殖的神经干细胞分化成神经元。
- 张波王任直姚勇王欣李桂林窦万臣田士强郑彤田宇
- 关键词：脑梗死细胞分化
- 脑梗死后神经干细胞的原位增殖及其可塑性被引量：3
- 2004年
- 目的研究成年大鼠脑梗死后自体神经干细胞的原位增殖,并探讨其可塑性。方法雄性Wistar大鼠共68只,分对照组(n=8),脑梗死后1、3、7、14、28d组,每组12只。免疫组织化学方法动态检测大鼠脑内5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU)、Brdu/多唾液酸神经细胞黏附分子(PSA-NCAM)的表达。结果与对照组相比,室下区和海马BrdU阳性细胞在脑梗死后1d开始增加(P<0.05),7d达到高峰,14d后开始下降,但仍高于对照组(P<0.05),28d后接近正常水平;室下区和海马BrdU/PSA-NCAM阳性细胞在脑梗死后7d开始增加(P<0.05),14d达到高峰,28d后开始下降,但仍高于对照组(P<0.05),大约占同期BrdU阳性细胞数60%。结论脑梗死可激活自体神经干细胞原位增殖,并且大多数增殖的神经干细胞具有可塑性。
- 张波王任直李桂林姚勇窦万臣栗世方田士强尹剑
- 关键词：脑梗死增殖
- 重组1、2、5型腺相关病毒载体在大鼠脑的转导效率研究被引量：9
- 2005年
- 目的探讨重组1、2、5型腺相关病毒(rAAV1、rAAV2和rAAV5)载体经不同途径向大鼠脑转入增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的表达情况和转导效率的差异,选择更加适于中枢神经系统(CNS)转基因治疗的rAAV血清型和可行的基因转入途径。方法雄性健康成年SD大鼠54只,随机分为9组:rAAV1/2/5海马注射组、rAAV1/2/5脑室注射组、rAAV1/2/5皮层注射组,每组6只。每组立体定向注射剂量和滴度相匹配的rAAV1EGFP、rAAV2EGFP和rAAV5EGFP,于注射后8周处死大鼠取脑,行序列冰冻切片(n=4)并以荧光显微镜观察EGFP在脑内的表达情况,或取大脑(n=2)行实时荧光定量PCR研究。结果荧光显微镜下观察:在海马注射组,rAAV1EGFP在海马CA1～CA3区锥体细胞层的胞体及其突起呈强表达,而rAAV2EGFP的阳性表达主要局限于齿状回门部的多形细胞层,rAAV5EGFP的阳性表达仅在CA1和CA2区的少数锥体细胞呈散在分布。而在脑室和皮层注射组,仅rAAV1EGFP可观察到EGFP表达,而rAAV2EGFP和rAAV5EGFP均未见表达。实时荧光定量PCR结果:在侧脑室、海马和皮层注射组中,rAAV1EGFP、rAAV2EGFP、rAAV5EGFP载体的表达量差异均有统计学意义(均P<0.01),其中,rAAV1EGFP的表达最强,rAAV2EGFP最弱,rAAV5EGFP介于两者之间。结论rAAV1在大鼠脑各注射部位均可有效转导,其介导的基因表达范围和mRNA表达量均明显高于rAAV2和rAAV5,rAAV1是一种比rAAV2和rAAV5更为高效的转基因载体。
- 栗世方王任直徐珑张振兴李桂林窦万臣尹剑姚勇
- 关键词：血清分型基因转移技术重组腺相关病毒中枢神经系统疾病
