祁鹏志
- 作品数：9 被引量：28H指数：3
- 供职机构：浙江海洋学院更多>>
- 发文基金：国家海洋公益性行业科研专项浙江省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 大黄鱼(Larimichthys crocea)补体C3和C4基因的分子特征及表达分析被引量：6
- 2015年
- 本文测定了大黄鱼C3(L.c-C3)和C4(L.c-C4)基因的c DNA全序列。结果表明,L.c-C3和L.cC4序列全长分别为4962bp和5088bp,分别编码1653和1695个氨基酸,N端信号肽序列分别为23和19个氨基酸。推导的氨基酸序列结构分析表明大黄鱼C3和C4与已报道的补体C3、C4同样都具有在功能上比较重要的残基以及保守的硫酯区。分子进化分析表明,L.c-C3和L.c-C4分别与鮸鱼C3、C4的氨基酸同源性最高。实时荧光定量PCR结果显示,L.c-C3和L.c-C4在健康大黄鱼的肝脏、脾脏、肠、鳃、心脏、脑、肌肉和胃这8种组织中都有表达,其中肝脏的表达量最高。在大黄鱼胚胎不同发育时期(从2细胞期到初生仔鱼)中,L.c-C3在各个阶段没有明显的变化,而L.c-C4的表达量有明显升高。溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)侵染的大黄鱼肝脏和脾脏中,L.c-C3和L.c-C4的m RNA表达量均明显上调。该结果表明,大黄鱼肝组织C3和C4基因表达变化与溶藻弧菌的侵染密切相关,揭示了C3和C4在大黄鱼抗细菌免疫反应中具有重要的作用。
- 王海玲祁鹏志郭宝英吴常文
- 关键词：大黄鱼分子特征
- 黑斑原(鱼兆)微卫星DNA富集文库构建与鉴定被引量：7
- 2011年
- 采用磁珠富集法,利用生物素标记的(CA)12寡核苷酸探针从黑斑原(鱼兆)基因组DNA MboI酶切的400—1000 bp片段中筛选CA/GT微卫星位点,洗脱的杂交片段克隆到pMD18-T载体上构建富集微卫星基因组文库后,通过PCR筛选检测出720个阳性克隆,占所有克隆的89.2%,从阳性克隆中随机选取139个进行测序,序列分析发现,124个克隆含有7个以上的重复序列,其中完全的为80个(64.5%),不完全的为40个(32.3%),复合的为15个(3.2%),重复次数范围为7—165次,平均为52次。在124条序列中共59条可以设计引物。
- 郭宝英谢从新祁鹏志吴常文邓一兵
- 关键词：微卫星磁珠富集DNA文库
- 紫贻贝(Mytilus edulis)养殖群体的遗传多样性及遗传结构分析被引量：3
- 2012年
- 基于线粒体DNA的COⅢ基因序列对我国沿海重要经济贝类紫贻贝3个养殖群体(烟台、乳山、东极)的遗传多样性和遗传结构进行了研究。由PCR扩增获得32个体的COⅢ基因750bp的部分序列,其多态性遗传参数统计显示,32个个体共检出18个单倍型,总群体单倍型多样性指数(Hd)为0.946,核苷酸多样性指数(Pi)为0.0207,平均核苷酸差异数(K)为15.316,三个群体均显示出较丰富的遗传多样性。遗传分化系数(Fst)表明,东极群体与烟台群体及乳山群体已明显分化,而烟台群体和乳山群体间无遗传分化,并且存在着较大的基因流。
- 郭宝英祁鹏志李继姬叶莹莹储张杰吴常文
- 关键词：紫贻贝
- 翘嘴鲌遗传多样性及卵膜糖蛋白ZP3基因的克隆、表达及单核苷酸多态性分析
- 翘嘴鲌(Culter alburnus)，隶属辐鳍鱼纲(Actinopterygii)，鲤形目(Cypriniforme)，鲤科(Cyprinidae)，鲌亚科(Culterinae)，鲌属(Culter)。翘嘴鲌广泛分...
- 祁鹏志
- 关键词：鲤形目翘嘴鲌单核苷酸多态性
- 柑橘衰退病和碎叶病复合感染病原的脱毒研究被引量：3
- 2011年
- 以带毒柑橘品种为试材,采用植物中药制剂处理与热处理结合、茎尖微芽嫁接与植物中药制剂处理结合,用RT-PCR法检测病原带毒情况,并在药剂处理后1、3、5、7、9 d取样,检测抗性相关酶活性的含量变化,结果表明:采用板蓝根和黄芩混合中药制剂处理8次,结合热处理,在PC板制成的温室(白天40℃(6 h/d),晚上25℃,处理50 d)中,可有效地脱除试验苗木中柑橘衰退病和柑橘碎叶病复合感染病原;对柑橘茎尖微芽嫁接苗进行板蓝根和黄芩混合中药制剂脱毒处理后苗木经RT-PCR法检测表明:85.7%植株可以脱除柑橘衰退病和柑橘碎叶病病毒;药剂处理后PPO、POD、SOD酶活性与对照相比均有所提高。
- 乔芬祁鹏志伏卉张鹏吴珊姜玲
- 关键词：茎尖微芽嫁接病原RT-PCR
- 长蛸ISSR-PCR优化反应体系的建立及优化研究
- 2012年
- 以长蛸DNA为模板,利用单因子试验分别对影响长蛸ISSR-PCR反应的DNA浓度、Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs和引物的浓度进行了优化,并通过梯度PCR确定最适退火温度,最终确定长蛸最佳反应体系和PCR扩增程序为:25μL体系,其中包括Taq DNA聚合酶1.5 U,Mg2+2 mmol/L,dNTPs 0.15 mmol/L,引物0.4μmol/L,DNA模板量约50 ng确立退火温度为52℃。利用所建立的ISSR-PCR反应体系,通过对24份野生长蛸样本的检验,获得了清晰、重复性好、多态性高的条带,研究结果对于把ISSR标记技术引入研究长蛸不同地理群体遗传多样性和遗传结构具有重要意义。
- 汤永磊周超祁鹏志吴常文郭宝英
- 关键词：长蛸ISSR
- 柑橘茎尖微芽嫁接脱毒及黄龙病和衰退病分子检测的研究
- 本实验采集带有典型衰退病症状的江西新余蜜柑母株茎尖进行了茎尖微芽嫁接(STG)，获得了成活苗169株;并对稻叶蜜柑、市文蜜柑、翡翠柚、处红柚、瓯柑2003年以来已获得的186株STG苗及母株进行了黄龙病和衰退病分子检测;...
- 祁鹏志
- 关键词：柑橘黄龙病衰退病茎尖嫁接病毒唑
- 文献传递
- 翘嘴鲌(Culter alburnus)TMEM-57基因的克隆、组织表达和单核苷酸多态性分析
- 2012年
- 采用RT-PCR和快速扩增cDNA末端(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术首次克隆了翘嘴鲌TMEM-57蛋白基因的cDNA全序列,该序列全长为2822bp,其中5′-UTR区93bp,3′-UTR区731bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)为1998bp,编码665个氨基酸。NJ法系统进化分析将同科或属中TMEM-57基因分成一个分支,表现出种属间的高度保守性。利用荧光定量PCR(qPCR)技术检测了不同组织的表达量,发现在卵巢中表达量最高,其次为心脏和脑。用直接测序法对TMEM-57基因部分区段单核苷酸多态性(SNP)进行了检测,寻找到11个新的SNP位点。
- 祁鹏志郭宝英谢从新吴常文陆诗敏段友健
- 关键词：翘嘴鲌荧光定量PCR单核苷酸多态性
- 大黄鱼(Larimichthys crocea)补体调节因子CFH和CFHR2基因的分子特征及表达分析被引量：1
- 2015年
- 补体是鱼类免疫系统重要的组分,具有识别和消除外来病原体,激活免疫细胞,调控获得性免疫等功能。在免疫组织中,补体调节因子大约占据了补体成分的二分之一,当受到外界病原刺激时会迅速活化补体成分,并且进一步聚合形成酶复合物发挥一系列免疫效应。CFH和CFHR2是补体替代途径重要的调节因子,对于补体系统正常运转必不可少。为此,本文测定了大黄鱼补体调节因子CFH和CFHR2基因的c DNA全序列,并对基因组织特异性表达和溶藻弧菌刺激后基因m RNA表达量的变化等方面进行了研究。CFH和CFHR2序列全长分别为1332 bp和1170 bp,分别编码443和389个氨基酸,N端信号肽序列分别为24和32个氨基酸。推导的氨基酸序列结构分析表明大黄鱼CFH和CFHR2基因具有RCA蛋白家族的典型特征,即含有多个保守的CCP结构(补体控制蛋白)。实时荧光定量PCR结果显示,CFH和CFHR2在健康大黄鱼的肝、脾、肾、肠、脑、胃、心和肌肉这8种组织中都有表达,其中肝脏的表达量显著高于其它几种组织。溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)侵染了健康的大黄鱼之后,CFH和CFHR2的m RNA表达量均明显上调,并且随着感染时间的变化呈现不同的上升趋势。结果表明补体调节因子m RNA表达量的变化与溶藻弧菌的侵染密切相关,表明了CFH和CFHR2可能在大黄鱼自身免疫机制中发挥重要的作用。
- 郭宝英张川祁鹏志张建设管奥陈宇毋玉婷吴常文
- 关键词：分子特征
