王轩 作品数:13 被引量:157 H指数:3 供职机构: 天津市环湖医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 天津市科技计划 天津市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
miR-20a/106b调控NKG2D途径介导儿童型脑干胶质瘤免疫逃逸的实验研究 被引量:4 2021年 目的探讨miR-20a/106b在儿童脑干胶质瘤(BSG)恶性进展中的作用及其机制。方法回顾性纳入2012年1月至2017年12月天津市环湖医院(天津市脑系科中心医院)神经外科接受手术切除的13例儿童BSG患者和5例成人BSG患者。采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织标本中自然杀伤细胞2家族成员D(NKG2D)配体MICA的表达情况,采用生物信息学方法筛选出调控MICA的miRNA。应用人脑胶质瘤LN229和U251细胞株通过荧光素酶报告基因方法验证筛选出的miRNA与MICA的靶向调控关系,通过蛋白质免疫印迹(WB)实验检测miR-20a/106b转染LN229和U251细胞株后MICA的表达情况,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测免疫细胞对LN229细胞株的毒性能力。通过向去胸腺幼年(3周龄)和成年(10周龄)雄性SD大鼠脑桥区立体定向注射LN229细胞株的方法制备BSG幼鼠(J-rat)和成年鼠(A-rat)模型,并根据注射细胞株不同各分为3组,依次为J-rat组、J-rat-scr组、J-rat-miR-20a/106b-d组和A-rat组、A-rat-scr组、A-rat-miR-20a/106b-u组(每组各3只),通过免疫组织化学染色方法检测MICA的表达情况,采用MCID软件检测肿瘤的侵袭性,采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果成人患者的MICA总阳性表达率较儿童患者高(分别为5/5、10/13,P<0.05)。检索结果显示,有23个可能调控MICA的microRNA,其中包括miR-20a和miR-106b。在LN229细胞株中,荧光素酶报告基因结果显示,转染pGL3-MICA-wt(野生型)质粒的荧光强度较对照组和转染pGL3-MICA-mut(突变型)质粒的强(均P<0.05);WB结果显示,与空白对照组和无义序列组比较,AS-miR-20a组、AS-miR-106b组及AS-miR-20a/106b组MICA的表达均增加(均P<0.05)。上述实验在U251细胞株得到相似的结果。不同效靶比(20∶1,10∶1,5∶1)情况下,AS-miR-20a/106b组LDH的活性高于对照组和AS-miR-20a/106b+MICA mAb组(均P<0.05),但后两组的差异无统计学意义(均P>0.05)。术后头颅MRI结果显示,3组幼鼠和3组成年鼠均成 王轩 陈钦 尚彦国 施铭岗 王虎 佟小光 韩磊 康春生 于春江关键词:脑干 儿童 肿瘤逃逸 急性颈内动脉起始部和颅内大血管串联闭塞的血管内治疗 被引量:3 2020年 目的探讨颈内动脉起始部闭塞串联颈内动脉颅内段和大脑中动脉闭塞致急性缺血性卒中患者血管内治疗的有效性和安全性。方法2018年8-11月共5例颈内动脉起始部闭塞串联颈内动脉颅内段和大脑中动脉闭塞患者,均行颈内动脉起始部支架植入术,再行颅内动脉支架取栓术。术后即刻采用脑梗死溶栓血流分级(TICI)评价血管再通程度,术后3 d、90 d和1年采用改良Rankin量表(mRS)评价预后。结果5例患者均顺利完成颈内动脉起始部支架植入术以及颈内动脉颅内段和大脑中动脉支架取栓术,手术成功率为5/5。术后即刻TICI分级3级2例、2b级2例、2a级1例,血管再通率为4/5,未发生颅内出血或动脉再闭塞,神经功能明显改善。术后90 d mRS评分0分2例,2分2例,3分1例。术后1年均预后良好(mRS评分0~1分)。结论颈内动脉起始部闭塞串联颈内动脉颅内段和大脑中动脉闭塞致急性缺血性卒中患者,急诊行颈内动脉起始部支架植入术并顺行颅内动脉支架取栓术安全、有效。 尚彦国 孙涛 王轩 高恺明 佟小光关键词:动脉闭塞性疾病 颈内动脉 脑血管造影术 靶向AKT1和COX-2的RNAi抑制U251胶质瘤细胞侵袭的体外实验 被引量:3 2010年 目的应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术敲低恶性胶质瘤细胞系U251中AKT1和COX-2表达后,在体外对细胞侵袭转移的抑制作用,初步探讨其可能的作用机制。方法构建重组腺病毒载体rAd5-A-C同时搭载靶向AKT1和COX-2的shRNA干扰序列,将其转染至恶性胶质瘤细胞系U251细胞。Realtime PCR检测RNAi后目的基因mRNA的表达水平,Western Blot检测目的基因及MMP-2、MMP-9、TIMP-2的表达情况。酶联免疫吸附试验检测转染前后分泌到细胞外的MMP-2和MMP-9的浓度变化。划痕实验和Transwell实验评价肿瘤细胞转染前后的细胞侵袭能力的变化。结果rAd5-A-C转染组AKT1和COX-2的mRNA和蛋白表达均明显抑制;MMP-2、MMP-9表达下调,TIMP-2表达则上调。ELISA检测胞外MMP-2、MMP-9浓度明显减低;划痕实验显示细胞转移运动能力明显减弱,Transwell体外侵袭实验结果显示穿过细胞数明显减低(P<0.001)。结论重组腺病毒介导的RNAi技术可以序列特异性地抑制U251细胞AKT1和COX-2的表达,在体外对U251细胞侵袭转移产生明显抑制作用,可能成为恶性胶质瘤治疗的新策略。 王轩 韩磊 杨旸 岳晓 张安玲 王广秀 贾志凡 浦佩玉 申长虹 康春生关键词:恶性胶质瘤 颅外椎动脉V3段相关血管重建术进展 2022年 传统后循环搭桥术以前循环血管为供血主体,属于颅外-颅内低流量搭桥。颅外椎动脉V3段搭桥可结合复杂的颅底技术,以颅内-颅内或联合搭桥形式对后循环整体一期进行更深入的改造;不仅可作为血管搭桥术式设计的主体处理椎基底动脉系统,还可重建前循环血流。本文系统阐述V3段搭桥涉及的重要血管特点和显露方法,以及V3段各种搭桥构型的创新设计理念、疾病适应证和实际应用原则。 王轩 佟小光关键词:脑血管重建术 椎动脉 中国颅内破裂动脉瘤诊疗指南2021 被引量:135 2021年 颅内动脉瘤是颅内动脉壁的局限性病理性扩张,存在破裂倾向。而颅内动脉瘤破裂是自发性蛛网膜下腔出血最常见的病因。蛛网膜下腔出血作为一种对中枢神经系统甚至其他系统造成严重损害的疾病,具有残死率高、临床症状复杂、自然史及转归不明确、治疗方式及效果不佳、并发症多样、随访不统一等一系列问题。自美国心脏协会/美国卒中协会动脉瘤性蛛网膜下腔出血指南发布后,我国先后发布了《中国蛛网膜下腔出血诊治指南2015》《中国蛛网膜下腔出血诊治指南2019》两版指南。破裂颅内动脉瘤(RIA)作为蛛网膜下腔出血的首要病因,其相关高质量研究及先进的诊疗技术陆续发布,而我国关于RIA的规范性诊疗仍缺乏推荐,故专家组结合文献、研究和临床经验共同撰写了本指南,旨在对RIA的病因、诊断、治疗、并发症以及随访等内容进行更新与改写。 中国医师协会神经介入专业委员会 中国颅内动脉瘤计划研究组 张鸿祺 杨新健 屈延 贺民 段传志 张彤宇 刘鹏 向思诗 冯华 王天龙 王坤 刘海啸 郭为 李进 田蕊 郭慎全 何旭英 赵兵 王轩 陈周青 吴建梁 麦麦提图尔荪·阿不杜拉关键词:颅内动脉瘤 破裂颅内动脉瘤 并发症 随访 大脑前动脉搭桥术在复杂前交通动脉瘤中的应用 被引量:4 2021年 大脑前动脉搭桥术是治疗前交通动脉瘤的重要方法,根治动脉瘤的同时应保证大脑前动脉灌注区的血供。大脑前动脉搭桥术旨在重建前交通动脉功能,情况复杂,手术难度大。在血运结构上,前交通动脉作为Willis环的前部枢纽,远离颞浅动脉和颈外动脉等常规供体动脉,血管重建方案在受体动脉方面需兼顾双侧血管,与血管搭桥术密切相关的前交通动脉复合体存在诸多变异;在手术操作上,前交通动脉位置深在,术野狭小,属于深部搭桥,同时因额叶的遮挡,供血区和受血区同时显露受到限制,动脉瘤体较大时更增加显露难度。基于上述血流动力学和血管结构的复杂性,以及随着手术入路向颅底扩展形成的各种颅内搭桥新路径,本文对大脑前动脉搭桥术在前交通动脉瘤中的特点、血管重建方案的创新设计和手术入路的选择进行综述。 佟小光 王轩关键词:大脑前动脉 脑血管重建术 颅内播散性黄色瘤一例报告并文献复习 被引量:3 2013年 播散性黄色瘤(xanthoma disseminatum,XD)是一种罕见的良性非朗格汉斯细胞起源的组织细胞增生性疾病,以全身皮肤播散性橘黄色丘疹为特征。累及颅内的XD患者,国外仅19例,且多合并于全身系统病变,国内目前尚无报告。本文报道1例单纯发生于鞍区及松果体区而酷似生殖细胞瘤的XD,并结合文献进行讨论。 王轩 于春江 张宏伟 申长虹 张大建 俞凯 于士柱关键词:文献复习 黄色瘤 颅内 组织细胞增生性疾病 细胞起源 朗格汉斯 儿童型与成人型脑干胶质瘤差异性的相关miRNA表达谱初步研究 被引量:2 2012年 目的筛选儿童型脑干胶质瘤(BSG)对照于成人型BSG差异表达的miRNA,为探索儿童型BSG发病机制和治疗中的miRNA干预策略提供可供选择的目标miRNA。方法利用miRNA芯片检NJL童型与成人型BSG原位动物模型的miRNA表达谱,分析二者差异性表达的miRNA,并挑选差异表达最明显的miRNA在两种BSG的人体标本中进行qRT-PCR和原位杂交验证。结果两个组别中共检测到216个miRNA表达,以成人型BSG为比照,儿童型BSG中3.5倍以上差异表达上调的miRNA10个、下调的29个。其中差异最明显的为miR-20a和miR-106b,选取二者在两种BSG的人体标本中进行qRT—PCR和原位杂交验证,结果提示芯片结果适用于人类。结论研究两种BSG的差异性表达的miRNA,将会为解释儿童型BSG较之成人型BSG的恶性进展及以此为控制BSG这-严重威胁儿童生命的疾病提供新的思路。 王轩 张宏伟 于春江 张安玲 韩磊 浦佩玉 申长虹 康春生 王坤关键词:脑干肿瘤 微RNAS 基因表达谱 微阵列分析 联合经岩入路手术中相关静脉结构及硬膜的处理策略 被引量:1 2023年 联合经岩入路在现代颅底入路体系中具有重要地位。采用该入路处理岩斜区内或部分累及海绵窦区的岩斜区病变时,深入理解颅底静脉结构与硬膜切开方法至关重要。大脑中浅静脉是大脑半球血流的"闸门",涉及海绵窦、翼静脉丛、岩上窦三大颅底引流渠道。其中蝶基底静脉、蝶岩静脉和岩上静脉这三种颅底通路性静脉与经岩手术入路的选择及静脉保护策略密切相关。硬膜切开技术不断发展,旨在尽可能保护重要静脉结构的同时,增加显露空间。本文梳理上述技术改良的脉络,探讨联合经岩入路手术中相关静脉结构及硬膜的处理策略。 王轩 佟小光关键词:大脑半球 浅静脉 静脉保护 颅底 岩斜区 腺病毒载体介导shRNAs共调控胶质母细胞瘤细胞中miR-221/222的表达及功能的体外研究 被引量:2 2016年 目的构建能够对胶质母细胞瘤小分子RNA(miR)-221和miR-222达到多层次、半定量、共调控效果的腺病毒载体系统。方法应用载体融合和短发夹RNA(shRNA)引导链3'端突变的策略构建出突变型(mut)-shmiR-221/222和经典型(class)-shmiR-221/222 2种共表达腺病毒载体并转导入LN229和U251细胞中,分别为class-shmiR-221/222转导组、mut-shmiR-221/222转导组,同时设空白对照组,采用实时荧光定量PCR检测3组细胞miR-221/222的表达,Western blotting检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(1Bp27kip1)蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期G1期阻滞情况,倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,Caspase-3/7萤光素酶法检测细胞凋亡,编写基于核苷酸循环基序(NCM)的软件,推断shRNA和靶miR的准确三维结构并计算相应的自由能状态。结果空白对照组、mut-shmiR-221/222转导组、class-shmiR-221/222转导组细胞miR-221/222的表达依次下调;p27kip1表达水平依次上调;G0/G1期比例依次上调,S期比例依次下调,G1期阻滞比例依次上调;细胞破坏和丧失原有形态的程度依次上调,细胞数量依次下调;细胞凋亡依次增加,差异均有统计学意义(P〈0.05);自由能计算结果显示,mut-shmiR-221/222转导组(-32.7、-32.7)的引导链与靶miR结合时发生作用的热力学稳定性较class-shmiR-221/222转导组(-42.1、-41.5)减低。
结论成功构建shRNA共表达腺病毒载体,利用shRNA引导链3'端突变的策略影响热力学稳定性可以对胶质母细胞瘤细胞miR-221/222多层次、半定量调控。 王轩 韩磊 张安玲 王广秀 浦佩玉 于春江 申长虹 佟小光 康春生关键词:胶质母细胞瘤 小分子RNA 腺病毒载体