王继德
- 作品数：292 被引量：1,372H指数：18
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 小鼠IL-4真核表达载体的构建及表达
- 2014年
- 目的构建小鼠白介素-4(murine interleukin-4,mIL-4)的真核表达载体,并研究其在293T细胞中的表达。方法 RT-PCR扩增小鼠IL-4基因后,克隆到真核表达载体pcDNA3.0上,利用电泳和测序鉴定重组质粒的大小、序列。脂质体转染法将重组质粒pcDNA3.0-mIL-4转入293T细胞中,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其表达。结果经酶切和测序鉴定重组质粒pcDNA3.0-mIL-4构建成功,并在293T细胞中成功表达。结论 pcDNA3.0-mIL-4可在真核细胞中成功表达,为进一步研究其在炎症性肠病(IBD)动物模型中的生物学功能提供了条件。
- 熊婧林英豪毕丽红王继德刘思德白杨
- 关键词：白介素-4真核表达脂质体293T细胞
- 白细胞介素-23受体基因多态性与炎症性肠病关系的初步研究被引量：5
- 2008年
- 目的初步探讨白细胞介素-23受体（IL23R）基因中两个单链核苷酸多态性（SNP）位点（rs11209026和rs11805303）的遗传多态性和炎症性肠病（IBD）的发病易感性之间的关系。方法采用聚合酶链反应（PCR）直接测序法检测50名健康人和81例IBD患者（其中克罗恩病41例，溃疡性结肠炎40例）的两个SNP位点基因多态性。结果rs11209026位点基因型频率和等位基因频率在克罗恩病患者分别为7．3％和3．7％，在溃疡性结肠炎患者分别为15．0％和7．5％，在对照组分别为14．0％和7．0％，三组间差异均无统计学意义（P值均〉0．05）。rs11805303位点的基因型频率和等位基因频率在克罗恩病患者分别为22．0％和52．4％、在溃疡性结肠炎患者分别为15．0％和41．2％，在对照组分别为34．0％和59．0％，三组间基因型频率比较差异均无统计学意义（P值均〉0．05），而等位基因频率在溃疡性结肠炎患者和对照组间差异有统计学意义（P=0．018）。rs11805303位点基因多态性与溃疡性结肠炎患者的发病年龄、性别、疾病的活动性及发病部位均无关（P值均〉0．05）。结论IL23R两个SNP位点基因多态性与克罗恩病无相关性。rs11805303位点的多态性可能为溃疡性结肠炎患者的一个遗传标志，但与该病病变特点无显著相关。
- 陈正彦智发朝智佳姚国鹏林勇关婧张迎春王继德陈烨姜泊
- 关键词：基因多态性炎症性肠病
- 胃癌超声内镜分期与微小卫星DNA不稳定性关系的研究
- 目的近年来有资料显示,微小卫星 DNA 不稳定性(MIN)与肿瘤及一些癌前病变密切相关,但 MIN 是否与胃癌及其术前分期有关,国内外尚元文献报告。本文以胃癌术前的 EUS 分期为基础,采用银染 PCR-SSCP 技术检...
- 郭文张亚历智发朝王继德赖卓胜姜泊
- 文献传递
- 幽门螺杆菌热休克蛋白60脂质体疫苗的制备及其免疫预防作用被引量：7
- 2005年
- 目的探讨制备脂质体包裹重组幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白60(Hsp60)口服疫苗的方法,并用Hp感染的小鼠模型评价其在预防Hp感染中的作用。方法将PET-22(+)/Hsp60在BL21(DE3)大肠杆菌表达,Ni-NTA琼脂糖树脂纯化Hsp60重组蛋白,用薄膜分散法制备以卵磷脂和胆固醇为膜组分包裹的Hsp60重组蛋白口服疫苗,并用透射电镜测定其粒径。75只BALB/C小鼠分为5组,分别通过灌胃方法给予PBS、空白脂质体、Hsp60重组蛋白+霍乱霉素(CT)、脂质体包裹Hsp60重组蛋白、脂质体包裹Hsp60重组蛋白+CT,每周1次共4次,末次攻击2周再用活Hp攻击3次,3周后处死小鼠,行胃组织快速尿素酶试验、Hp的定植半定量、炎症程度及其炎症活动度的评分。结果可溶性表达产物占全菌总蛋白的27%,经纯化获得纯度为95%的重组蛋白,制备的脂质体粒径为(0.7±0.4)μm。PBS组和空白脂质体组保护率均为0,而Hsp60重组蛋白+CT组、脂质体包裹Hsp60重组蛋白组、脂质体包裹Hsp60重组蛋白+CT组的保护率分别为73.3%、66.7%和86.7%,且均能使免疫小鼠胃粘膜Hp感染数目明显减少,炎症反应减轻。结论口服脂质体能分地代替免疫佐剂,作为Hp疫苗的免疫佐剂,将具有广泛的应用前景。
- 黄文白杨王继德武金宝李国锋张卫民周殿元
- 关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白60疫苗脂质体
- 幽门螺杆菌重组粘附素HpaA生物学活性及免疫原性的体外研究
- 目的:通过体外实验确定rHpaA的生物学活性及免疫原性,进一步研究rHpaA对Th细胞表型的可能作用,探讨其在Hp疫苗应用中的可行性.方法:1、家兔背部皮下多点注射法制备抗HpaA抗血清,琼脂扩散法测定其效价;2、rHp...
- 陈烨周殿元王继德叶桂安梁卫江
- 文献传递
- 克罗恩病相关的NOD2及β-防御素-2基因多态性对β-防御素-2表达的影响
- 2009年
- 目的探讨克罗恩病（Crohndisease，CD）相关的NOD2及人β-防御素-2（humanbeta—defensin2，hBD-2）基因多态性对hBD-2转录活性的影响及主要机理。方法将hBD-2报告基因质粒和NOD2真核表达载体共转染至HEK293T细胞，用脂多糖（LPS）和TNF—α分别孵育刺激后测定hBD-2转录活性变化。结果LPS对hBD-2转录活性有抑制作用（P=0．020），TNF—α可相对升高hBD-2转录活性，呈剂量依赖性（P=0．004）；LPS作用时，NOD2（P268S）改变前后hBD-2的转录活性差异有统计学意义（P=0．008）；hBD-2（-233）改变前后hBD-2的转录活性差异无统计学意义（P=0．053）。在TNF-α（5ng／m1）刺激时，NOD2（P268S）改变前后hBD-2的转录活性差异无统计学意义（P=0．064）；hBD-2（-233）改变前后hBD-2的转录活性差异有统计学意义（P=0．006）；NF—κB抑制剂可显著下调hBD-2转录的激活（P〈0．001）。结论NOD2（P268S）改变能够降低hBD-2的内源性表达；hBD-2（-233）改变导致hBD-2诱生性表达的减少；NF—κB通路可能是hBD-2诱导表达的主要路径。
- 姚国鹏智发朝张迎春陈正彦智佳林勇关婧王继德姜泊
- 关键词：Β-防御素-2CROHN病基因多态性免疫
- 一种防治由幽门螺杆菌感染引起的口腔疾病的口腔护理剂
- 本发明提供了一种防治由幽门螺杆菌感染引起的口腔疾病的口腔护理剂，一种防治由幽门螺杆菌感染引起的口腔疾病的口腔护理剂，该护理剂，每100重量份由药学上可接受的辅料和以下重量份的原料药制备得到的有效成分组成：板蓝根0.4～4...
- 白杨陈烨刘颖王继德张亚历姜泊
- 文献传递
- 胃型上皮Fas表达的调节:幽门螺杆菌致病的自身免疫机制之一被引量：7
- 2003年
- 目的探讨Fas介导的幽门螺杆菌(Hp)致胃上皮损伤机制。方法从Hp感染和非感染胃粘膜新鲜分离胃上皮细胞,流式细胞仪测定新分离及体外培养胃上皮细胞系中Fas的表达;调查Hp活菌及Hp感染时胃粘膜主要的Th1细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对胃上皮Fas表达的调节作用,同时应用ELISA法探讨Fas介导的胃上皮细胞凋亡作用。结果Hp感染胃粘膜上皮Fas阳性数和表达量均高于非感染者(P<0.05),Hp、IFN-γ及TNF-α单独或合用均能提高胃上皮Fas的表达,而胃上皮表面的Fas分子能够介导其IgM单抗引起的致细胞凋亡作用,IFN-γ可增强这种作用。结论直接或间接通过Th1细胞因子增加Fas表达进而损伤胃上皮细胞,是Hp致胃上皮损伤的自身免疫机制之一。
- 王继德白杨林焕建张亚历黄文周殿元
- 关键词：FAS幽门螺杆菌自身免疫机制
- 幽门螺杆菌共识意见(2003·安徽桐城)被引量：9
- 2004年
- 1999年海南会议提出并经全国消化大会确认的"我国对幽门螺杆菌若干问题的共识意见"于2000年发表至今已三年余.
- 张万岱萧树东胡伏莲林三仁胡品津刘文忠王继德徐智民
- 关键词：幽门螺杆菌感染药物治疗中西医结合疗法
- 口腔内幽门螺杆菌与儿童龋齿及口腔卫生状况的关系
- 目的了解3～5岁儿童幽门螺杆菌(Hp)感染状况,龋齿罹患情况以及口腔卫生状况,探讨儿童口腔 Hp 感染状况与龋齿和口腔卫生状况的关系。方法采用敏感性和特异性都高的巢式 PCR 对某幼儿园214名3～5岁儿童(男孩124名...
- 刘颖白杨李菁张亚历陈烨王继德
- 文献传递
