王秀丽
- 作品数:66 被引量:119H指数:5
- 供职机构:中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 猪霍乱沙门氏菌C79102株的制备与检定被引量:1
- 2017年
- 为研究猪霍乱沙门氏菌C79102株的菌种特性,制备了一批猪霍乱沙门氏菌C79102株,并对菌种的真空度、纯粹、剩余水分、培养特性、形态及生化特性、血清学特性、特异性、毒力等进行检定,重点对菌种的毒力进行研究。试验结果表明,该冻干菌种的真空度、纯粹、剩余水分、培养特性、形态及生化特性、血清学特性均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》二〇〇〇版质量标准的规定,特异性检验结果显示C79102在含1%醋酸铊的普通肉汤中不生长,毒力试验结果显示,不同制备方法获得的肉肝胃消化汤培养的菌液毒力差异明显。本研究可以为猪霍乱沙门氏菌的制备和检定提供参考依据。
- 王秀丽张媛李建彭国瑞刘博辛凌翔蒋玉文
- 关键词:特异性毒力
- 安徽省白羽肉鸡中副鸡禽杆菌的分离鉴定及流行病学分析
- 2020年
- 通过病原分离对安徽省多家白羽肉鸡养殖场持续出现疑似鸡传染性鼻炎的鸡群进行确诊,从不同批次发生鸡传染性鼻炎疑似症状的鸡体内分离细菌,经细菌分离、纯化、回鸡试验,共分离到8株细菌,经形态及培养特性、生化试验、血清学特性、16S rRNA基因序列分析等方法对分离的细菌进行鉴定。结果表明,所分离的细菌有1株为A型副鸡禽杆菌,7株为B型副鸡禽杆菌,在安徽省持续引起幼龄肉鸡发生鸡传染性鼻炎的流行中B型副鸡禽杆菌是主要流行毒株。
- 王秀丽于永于雷辛凌翔张媛李俊平李旭妮
- 关键词:副鸡禽杆菌传染性鼻炎
- 重组腐败梭菌α毒素的生物活性及其灭活疫苗的免疫效果被引量:1
- 2019年
- 为了研究重组腐败梭菌α毒素的生物活性及其灭活疫苗的免疫效果,采用PCR法扩增腐败梭菌α毒素基因,构建重组表达质粒pET28α-csa,转化E.coli BL21(DE3);对表达产物的细胞毒性、小鼠致死毒力和抗毒素中和试验等生物活性进行鉴定,并将其制成灭活疫苗免疫家兔和靶动物绵羊,通过攻毒素试验和血清中和试验与类毒素疫苗进行比较。结果显示,重组α毒素能够与腐败梭菌抗毒素血清反应,具有细胞毒性,小鼠致死毒力超过300 MLD/mL,其毒性可以被腐败梭菌抗毒素中和。制成灭活疫苗免疫家兔,随着免疫剂量的增加血清中和效价随之提高,0.25 mL/只(含重组α毒素0.11 mg)免疫即可使家兔获得100%保护,免疫效果优于类毒素疫苗;0.50 mL/只(含重组α毒素0.22 mg)免疫绵羊攻毒保护率为75%。结果表明,重组腐败梭菌α毒素具有很好的生物活性,所制成的灭活疫苗可以作为预防羊快疫的候选疫苗。
- 彭国瑞蒋玉文彭小兵王秀丽李旭妮王猛
- 关键词:腐败梭菌Α毒素生物活性羊快疫
- 一种猪链球菌病间接ELISA抗体检测试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种猪链球菌病间接ELISA抗体检测试剂盒及检测方法,属于生物检测技术领域。所述试剂盒包括包被板、样品稀释液、酶结合物、阳性对照、阴性对照、显色液A、显色液B、浓缩洗涤液、终止液、加样槽、封板和血清稀释板。本...
- 朱良全王豪杰胡云皓刘燕辛凌翔张存帅姚文生张一帜王秀丽王琦佟仁冬金美君
- 布鲁氏菌病实验室诊断方法的研究进展被引量:42
- 2011年
- 对布鲁氏菌病的病原学和血清学诊断技术的研究进展进行了综述,包括灵敏特异的ELISA、FPA、PCR、核酸探针技术、胶体金标记技术及新型可视化LAMP等,以期为布鲁氏菌病的研究提供参考。
- 王秀丽蒋玉文毛开荣丁家波王秋菊何宇彭小兵
- 关键词:布鲁氏菌病病原学血清学
- 链球菌病类活疫苗活菌计数参考品的研制被引量:3
- 2021年
- 研制链球菌病类活疫苗活菌计数参考品,可以更加科学地评价活菌计数结果的准确性和有效性。首先,制备了一批链球菌病类活疫苗活菌计数参考品,对其物理性状、纯粹性、真空度、剩余水分进行检验,并对其均一性、运输稳定性、热稳定性进行测定,另组织3家单位通过协作标定的方式对参考品活菌数进行赋值,用协作标定法统计参考品在12个月内的保存期。参考品的性状检查、纯粹检验、真空度测定和剩余水分测定结果均符合《中国兽药典》的规定;均一性试验结果显示,参考品计数结果的变异系数小于10%,均一性良好;运输稳定性试验证明,参考品在夏季和冬季用泡沫盒加冰袋的方式运输3日内数值仍能保持稳定;加速热稳定性试验验证,参考品在–20℃条件下保存3个月、4℃条件下保存21 d内均可活菌数稳定;通过协作标定,统计出参考品活菌数的赋值范围为(8.5–12.1)×107CFU/支;保存期试验结果证实,参考品在–70℃以下保存一年内活菌数可维持稳定状态。链球菌病类活疫苗活菌计数参考品,不仅可以为链球菌病类活疫苗的活菌计数实验提供参照物,而且可以用于评价马丁琼脂培养基的质量,为兽用生物制品质量控制提供保障。
- 辛凌翔王秀丽吕文静臧莲娜朱冬梅罗颖张媛李晓宁刘博李俊平
- 关键词:链球菌活菌计数参考品
- 一种重组猪丹毒杆菌表面抗原SpaA蛋白及其应用
- 本发明公开了一种重组猪丹毒杆菌表面抗原SpaA蛋白及其应用,该重组猪丹毒杆菌表面抗原SpaA蛋白的编码基因采用具有高度保守性的野生型序列,具备良好的安全性、免疫原性、跨血清型保护效果,可产生具有足够免疫保护力抗体,对于猪...
- 张一帜张媛李建李俊平冯妍王秀丽刘元杰李旭妮王甲任小侠
- 禽腺病毒Penton蛋白的表达
- 自2015年以来,我国养禽业大面积爆发由禽腺病毒(fowl adenovirus,FAdV)引起的肝炎-心包积水综合征,使养禽业遭受巨大经济损失。在禽腺病毒12个血清型交叉混合感染严重且各血清型之间交叉保护尚不清楚的情况...
- 宋佳诚杨明珠刘博张一帜王秀丽刘丹侯亚欣李俊平
- 关键词:禽腺病毒原核表达蛋白纯化
- 一株表达EGFP基因的重组伪狂犬病毒的构建及其复制稳定性分析
- 2022年
- 为探寻伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)基因缺失株rPRV-bc-8基因组UL4-UL3基因间区域是否可作为外源基因的插入位点,在实验室已构建的含有增强型绿色荧光蛋白(Enhance Green fluorescent protein,EGFP)基因的转移质粒pMD-US6+7-EGFP-US2的基础上,通过DNA体外分子克隆技术将UL4序列替换左同源臂US6+7序列,UL3序列替换右同源臂US2序列,并将PolyA引入转移质粒,得到转移质粒pMD-UL4-EGFP-UL3。利用脂质体转染法将转移质粒pMD-UL4-EGFP-UL3与亲本毒rPRV-bc-8共转染PK-15细胞,经蚀斑纯化成功得到一株能够稳定表达EGFP基因的重组伪狂犬病毒rPRV-UL4-EGFP-UL3。通过倒置荧光显微镜观察以及PCR鉴定确定EGFP基因已成功插入到伪狂犬基因组的UL4-UL3之间,并通过细胞传代试验分析得到重组毒的遗传稳定性良好。通过体外增殖试验分析得到重组病毒rPRV-UL4-EGFP-UL3在细胞内的增殖速度较快,接种后12 h内滴度始终高于亲本毒rPRV-bc-8,接种后40 h达到最高滴度108.3 TCID50/mL,与亲本毒的最高滴度接近,但是最高滴度的出现时间晚于亲本毒,并且在达到平台期后病毒滴度下降的比亲本毒快。通过对病毒培养液中荧光蛋白浓度进行测定,结果显示在接种后56 h时荧光蛋白浓度达到最高值4793.9 ng/mL,之后进入平台期。综上结果表明构建的重组病毒具有良好的遗传稳定性及体外复制能力,并且外源基因EGFP在此位点具有良好的表达效果,为进一步相关重组病毒的构建奠定了基础。
- 杨明珠陈晓春张媛王秀丽李俊平
- 关键词:重组病毒增强型绿色荧光蛋白
- 牛多杀性巴氏杆菌病疫苗效力检验用攻毒菌的研究
- 2024年
- 为提高我国牛多杀性巴氏杆菌病疫苗效力评价方法的稳定性、可靠性及检验效率,研究制备了活菌数定量的攻毒用牛多杀性巴氏杆菌C45-2株的冻干菌。对其性状、纯粹、真空度、剩余水分、均一性、活菌数稳定性及毒力稳定性进行了检验和评价。冻干攻毒菌在疫苗效力检验中进行应用,并与-70℃冻存的攻毒菌液进行了比较研究。结果表明,定量冻干菌的性状、纯粹、真空度和剩余水分均符合冻干制品的要求;均一性检查变异系数与低温冻存菌液变异系数均小于6%,均一性良好;保存15个月活菌数稳定性良好,较冻存菌液有明显的优势;保存12个月内毒力略有下降,但不影响疫苗的效力检验,可有效评价疫苗质量。试验表明冻干菌株能满足牛多杀性巴氏杆菌效力检验使用,且简化了细菌培养步骤,提高了检验结果的稳定性和工作效率。
- 王琦李建刘元杰刘燕姚文生王秀丽
- 关键词:效力检验