王海艳
- 作品数：4 被引量：42H指数：3
- 供职机构：青岛农业大学农学与植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 苹果腐烂病菌诱导产孢方法被引量：15
- 2012年
- 为了研究一种能诱导苹果腐烂病菌快速大量产孢的方法,测试了6种培养基对苹果腐烂病菌的诱导产孢效果。结果发现,苹果腐烂病菌在加蜂蜜水和蛋白胨的带壳大麦上能大量产孢。接种苹果腐烂病菌菌丝的带壳大麦,在黑暗中培养15天后可产生大量黑色子实体。已形成子实体的大麦粒在黑光灯下诱导25天后开始产生分生孢子。每颗大麦粒平均产生11个子实体,其中15%的子实体能溢出分生孢子角。70 g大麦粒上所产生的分生孢子可配制浓度为106个孢子/mL的孢子悬浮液1500~2000 mL。试验还发现,不同的腐烂病菌菌株在同一条件下产孢量存在很大差异。
- 赵红王彩霞陈晓忍王海艳李保华
- 关键词：苹果腐烂病分生孢子
- 农杆菌介导苹果炭疽病菌的遗传转化及转化子鉴定被引量：9
- 2013年
- 【目的】优化农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化苹果炭疽病菌(Colletotrichumgloeosporioides)的技术体系,并对转化子进行筛选鉴定,比较其生物学特性和致病性差异。【方法】以苹果炭疽病菌LXS010101分生孢子为转化受体,利用携带重组双元载体的农杆菌进行转化;对获得的转化子进行遗传稳定性测定、PCR检测及Southern blot分析;选取一定数量的转化子,比较其菌落形态、生长速率及分生孢子发育等主要生物学性状及致病性的差异。【结果】苹果炭疽病菌的最优转化体系为:病菌分生孢子悬浮液浓度1×105个/mL,共培养温度和时间分别为22℃和24 h,共培养基中添加200μmol.mL-1乙酰丁香酮,其转化效率达到1×105个孢子可获得439个转化子。随机选取30个转化子进行鉴定,发现T-DNA已整合进炭疽病菌基因组中,在所检测的转化子中都是以单拷贝的形式整合,且能够稳定遗传。与野生型菌株相比,转化子的菌落形态没有发生明显变化,但23.33%的菌株生长速率显著减低;转化子ATJ-3和ATJ-15不能产生分生孢子,在28个产孢菌株中,分生孢子萌发率显著减低的菌株占39.29%,附着胞形成比例显著减低和形态异常的菌株占25.00%。致病性测定结果显示,11个转化子的致病力显著降低,其中菌株ATJ-19完全丧失致病能力。【结论】优化的苹果炭疽病菌遗传转化技术体系,可用于炭疽病菌致病相关基因的克隆及致病分子机理的研究。
- 王海艳李保华张清明李桂舫董向丽王彩霞
- 关键词：苹果炭疽病菌
- 农杆菌介导樱桃干腐病菌的遗传转化被引量：1
- 2013年
- 以携带潮霉素磷酸转移酶基因的pBIG3C为转化载体,根癌农杆菌EHA105为转化介体,对樱桃干腐病菌LXS230101分生孢子进行转化。结果表明,樱桃干腐病菌的最优转化体系为:α型分生孢子浓度为106个/mL,培养基中添加200μmol/mL乙酰丁香酮(AS),共培养温度和时间分别为25℃和72 h,其转化效率为1×106个α型分生孢子产生686个转化子。随机选取转化子进行PCR和Southern blot鉴定,发现T-DNA已整合进樱桃干腐病菌基因组中;转化子在不含潮霉素的PDA培养基中连续培养5代后,仍表现出对潮霉素的抗性,表明外源基因能在樱桃干腐病菌中稳定遗传。
- 王海艳李保华李桂舫王彩霞
- 苹果树腐烂病内生拮抗放线菌A-2的鉴定及其活性评价被引量：18
- 2013年
- 以苹果树腐烂病菌Valsa mali为靶标菌,从健康苹果树枝条中获得一株高效内生放线菌A-2。采用生长速率法、对峙培养法和玻片法测定了菌株A-2的抑菌谱及对苹果树腐烂病菌菌丝生长和孢子萌发的影响;利用离体枝条烫伤接种法测定了菌株A-2对腐烂病的防治效果。结果表明:A-2发酵滤液对腐烂病菌的抑制率达90%以上,对其他9种常见的植物病原真菌也具有良好的拮抗作用;菌株A-2可导致腐烂病菌菌丝畸形、分支增多和局部膨大;不同稀释倍数的A-2发酵滤液对苹果离体枝条腐烂病均有明显的防效,接种病原菌前后24 h和同时施用500倍发酵滤液的防效均达70%以上。根据培养特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析,将菌株A-2鉴定为卡伍尔链霉菌Streptomyces cavourensis。
- 张清明王彩霞王海艳李保华董向丽李桂舫
- 关键词：内生放线菌拮抗作用苹果树腐烂病菌
