王新娟
- 作品数:11 被引量:12H指数:2
- 供职机构:河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 河南省猪源链球菌流行菌株的药物敏感性试验
- 应用纸片琼脂扩散法分析了108株猪源链球菌临床流行菌株对13种临床常用药物的耐药性,结果表明:绝大部分菌株对头孢三嗪、氨苄西林、青霉素、万古霉素、新生霉素高度敏感;对阿米卡星、氧氟沙星、环丙沙星中度敏感;对红霉素、四环素...
- 王新娟刘春生徐耀辉杨霞陈陆张金来张九州王川庆
- 关键词:猪源链球菌药敏试验耐药性
- 文献传递
- 河南省猪源链球菌流行菌株的药物敏感性试验
- 应用纸片琼脂扩散法分析了108株猪源链球菌临床流行菌株对13种临床常用药物的耐药性,结果表明:绝大部分菌株对头孢三嗪、氨苄西林、青霉素、万古霉素、新生霉素高度敏感;对阿米卡星、氧氟沙星、环丙沙星中度敏感;对红霉素、四环素...
- 王新娟刘春生徐耀辉杨霞陈陆张金来张九州王川庆
- 关键词:猪源链球菌药敏试验耐药性
- 文献传递
- 河南省猪场猪链球菌血清2型感染情况调查
- 为更好了解河南省猪场猪链球菌2型的感染情况,应用猪链球菌血清2型抗原,采用平板凝集法测定1609份来自河南省17个地市87家猪场的血清样品。结果显示,河南省各地区猪链球菌2型血清抗体猪场阳性率为83.33%~100%,阳...
- 王新娟刘春生徐耀辉杨霞陈陆张金来张九州王川庆
- 关键词:猪链球菌2型平板凝集试验流行病学调查
- 文献传递
- 口蹄疫病毒5’端非翻译区致病机理的分子基础被引量:1
- 2009年
- 该文阐述了口蹄疫病毒5’端非翻译区的结构和功能,综述了近年来口蹄疫病毒5’端非翻译区与宿主细胞间关系及其致病机制方面的研究进展,分析了口蹄疫病毒5’端非翻译区致病机理的分子基础,认为其5’端非翻译区的基因组结构对口蹄疫病毒的复制和扩增是必不可少的,为进一步研究口蹄疫病毒的复制机理、毒力及其决定因素、致弱机理、致病机理及宿主嗜性提供理论参考。
- 许保疆游一付仁一刘惠敏徐雪郭伦涛王新娟
- 关键词:口蹄疫病毒致病机理分子基础
- 河南省猪源链球菌的分离鉴定及四价灭活苗的初步研制
- 为了解猪链球菌病病原在河南省的血清群分布及流行规律,本研究首先从河南省17个地市的临床病例中分离到113株猪源链球菌,结合培养特性、生化特性及血清学反应等对其进行了分群鉴定。结果表明其形态、染色、培养特征及理化特性符合链...
- 王新娟
- 关键词:猪源链球菌
- 文献传递
- 猪链球菌ZKHY株gdh基因的克隆与序列分析被引量:2
- 2010年
- 对猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)进行克隆和序列分析,以ZKHY株的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出谷氨酸脱氢酶基图片段,克隆于pMD-18T载体,转化宿主菌JM109中进行序列测定。将测序结果与GenBank已登录序列进行核苷酸和氨基酸的同源性分析。序列分析显示,成功克隆了猪链球菌ZKHY株的gdh基因,ZKHY与已报道的猪链球菌gdh基因有密切的亲缘关系,核酸序列与血清2、7、9型的同源性为97.2%~98.4%,其中与2型菌株同源性为97.2%~97.3%;与7型菌株同源性为98.4%;与9型菌株同源性为97.6%。其编码的氨基酸序列同源性则更高,与GenBank中已收录的序列同源性在98.9%以上。ZKYH株可能是属于2、7、9型之外的其他血清型;所克隆的基因在猪链球菌之中非常保守,可以进行表达以用作免疫学方面的相关研究。
- 刘春生王新娟徐耀辉王川庆杨霞陈陆徐雪
- 关键词:猪链球菌克隆
- 猪链球菌9型荚膜多糖cps9G基因的原核表达
- 2011年
- 本研究旨在克隆表达猪链球菌9型荚膜多糖部分抗原表位。设计1对引物,采用PCR法以猪链球菌9型河南分离株PY-2的基因组DNA为模板扩增出cps9G全基因序列。用限制性核酸内切酶BamHⅠ、XhoⅠ进行双酶切后,将其定向克隆到pET32a(+)中,构建重组表达质粒pET32a-cps9G,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,并优化表达条件。结果表明,经1.2mmol/L IPTG诱导4h后SDS-PAGE分析表明,重组菌株表达出了约50 700的融合蛋白条带,与预期一致。Western-blotting分析表明,该融合蛋白具有特异的生物学活性。这为以后建立快速、简便、特异的免疫学检测方法及制备单克隆抗体提供了较好的抗原,同时为研制猪链球菌亚单位疫苗和诊断试剂盒奠定了基础。
- 刘春生徐耀辉陈陆杨霞王新娟刘春明王川庆
- 关键词:猪链球菌克隆原核表达
- 猪链球菌种及其1、2、7型多重PCR检测方法的建立与应用被引量:8
- 2010年
- 【目的】建立致病性猪链球菌种及其1、2、7型的快速多重PCR检测方法,并进行初步的临床应用。【方法】根据猪链球菌种特异的gdh基因序列及其1(14)、2(1/2)、7型特异的cps1I、cps2H、cps7H基因序列,分别设计4对引物,通过对单个基因PCR和多重PCR扩增条件、反应体系的优化,建立了快速检测猪链球菌种及其1(14)、2(1/2)、7型的4重PCR方法。利用保存的猪链球菌不同血清型菌株和其他相关标准菌株作为参考菌株,对建立的多重PCR方法进行特异性和敏感性试验。用所建立的4重PCR方法对河南省不同地市的39份猪扁桃体样品进行检测,并选取部分样品的PCR产物进行测序验证。【结果】所建立的4重PCR方法特异、敏感,对猪链球菌2型的最低检出水平为2.52×103CFU/mL。临床检测及测序结果显示,该多重PCR准确性较高。【结论】建立的4重PCR方法可用于猪链球菌主要致病血清型的快速检测。
- 刘春生徐耀辉陈陆刘春明王新娟高冬生王永生张九州王川庆
- 关键词:猪链球菌多重PCR
- 河南不同临床型鸡支气管炎病毒流行毒株的分离鉴定及其S1基因变异分析被引量:1
- 2010年
- 经鸡胚接种、RT-PCR、气管环培养等方法从河南地区发病鸡群中分离、鉴定出2株鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitic virus,IBV),分别命名为HN/HL株和HN/SG株。应用RT-PCR方法对尿囊液中HN/HL株和HN/SG株以及本室保存的H120株的S1基因全序列进行了扩增,并对其进行克隆测序。结果显示,3株IBV目的片段全长分别为1828、1825、1819bp,3个序列相互之间存在多位点的变异,同时存在插入和缺失现象;对推导的氨基酸序列进行分析表明,HN/HL株S蛋白裂解识别位点序列为HRRRR,而HN/SG株和H120株S蛋白裂解识别位点同为RRFRR。将测序结果同GenBank上登录的其他IBVS1基因相比较,发现本试验的HN/HL株与疫苗H120株的同源性仅为78.1%,HN/SG株与H120株的同源性仅为81.1%,而HN/HL株与HN/SG株的同源性为87.9%。同源性及遗传进化分析还发现,已报道的腺胃型ZJ971株和QX株在分子水平上应该分别属于呼吸型和肾型IBV。
- 徐雪王川庆王泽霖杨霞陈陆王宏魁刘春生刘慧敏郑鹿平郭伦涛王新娟
- 关键词:肾型IBV克隆与序列分析
- 河南不同临床型鸡支气管炎病毒流行毒株的分离鉴定及其S1基因变异分析
- 前言:IBV是冠状病毒科的代表株,其基因组为不分节段的正链单股RNA,共编码3种结构蛋白:纤突蛋白(S)、核衣壳蛋白(N)和膜蛋白(M)。S基因是IBV基因组中变异最大的部分,S蛋白成熟裂解为S1和S2两个蛋白亚基。其中...
- 徐雪王川庆王泽霖杨霞陈陆王宏魁刘春生刘慧敏郑鹿平郭伦涛王新娟
- 文献传递