浦立勇 作品数:40 被引量:102 H指数:6 供职机构: 南京医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省“135”工程重点医学人才基金 江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
DA与Lewis大鼠品系组合建立大鼠肝移植排斥与耐受模型 2008年 目的建立大鼠原位肝脏移植急性排斥与自然耐受模型。方法采用近交系雄性DA大鼠与Lewis大鼠互为供受体,改良“二袖套”法建立大鼠原位肝脏移植(rat orthotopic liver transplantation,ROLT)模型84例。实验分为4组:排斥组(DA→Lewis,n=12),FK506处理排斥组EDA—Lewis.n=24,术后1~7d用FK506 0.2mg/(kg·d)灌胃],耐受组(Lewis→DA,n=24),同基因组(DA—DA,n=24)。各组中随机取6例观察生存期,其余分别于术后7、14、28d处死6例,收集外周血及肝脏标本。检测血清标本天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)浓度,病理学检查移植物排斥反应程度。结果排斥组中位生存时间(median survivaltime,MST)为12d,而FK506处理排斥组MST为76d,较排斥组明显延长(vs排斥组,P〈0.01)。耐受组与同基因组的MST均〉120d。术后7d,排斥组血清AST、BILI浓度均明显高于其余3组(P〈0.05);术后14d,FK506处理组、耐受组和同基因组血清AST、TBIL浓度无明显差异。术后28d,FK506处理组血清AST、TBIL浓度较耐受组和同基因组明显升高(P〈0.05)。肝脏病理表现:术后7d,排斥组为严重的急性排斥反应,Banff评分Ⅲ级;耐受组为Ⅰ~Ⅱ级,同基因组与FK506处理排斥组为0~Ⅰ级。术后28d,FK506处理排斥组为慢性排斥反应表现,耐受组和同基因组移植无明显排斥反应表现。结论DA与Lewis大鼠品系组合,可以建立稳定可靠的肝脏急性排斥模型与自然耐受模型,两种模型的生存期、肝功能变化、移植物病理表现,符合急性排斥和自然耐受的特点,是进行肝移植免疫研究的良好的动物模式。 浦立勇 姚爱华 吕凌 黄国荣 李相成 张峰 王学浩关键词:近交系 同种异体 排斥 耐受 缺血预处理对于大鼠部分肝移植术后肝再生信号通路的影响 被引量:6 2007年 目的:观察缺血预处理对于大鼠部分肝移植术后肝再生信号通路的影响。方法:采用雄性Lewis大鼠建立50%体积肝移植,将120只大鼠随机分为对照组(C组)和缺血预处理组(IPC组),IPC组大鼠在体内切肝前接受10min肝血流阻断及随后15min的血液复流。分别在术后2、6、24、48h提取肝组织。观察术后两组生存率,提取血清测定谷丙转氨酶(ALT),ELISA法测肝组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素(IL-6)水平,免疫组化法测定肝细胞增殖核细胞抗原(PCNA)。Western blot测定肝脏中cyclin D1、CDK4、STAT3、磷酸化STAT3(P-STAT3)水平。结果:术后两组生存率比较无明显差别,术后ALT水平,IPC组在2、6h低于C组。TNF-α术后6hIPC组明显高于C组。IPC组的IL-6水平在术后2、6、24、48h均高于C组。PCNA显示术后IPC组阳性细胞数明显高于C组。cyclin D1蛋白在术后C组表达弱于IPC组。Cdk4蛋白在术后IPC组表达强于C组。STAT3蛋白术后两组表达相似。P-STAT3蛋白术后C组蛋白表达弱于IPC处理组。结论:经过缺血预处理的50%部分体积大鼠肝移植,IL-6、TNF-α诱导的肝再生信号通路增强,提示肝再生能力也增强。 仲跻巍 刘现忠 姚爱华 浦立勇 李相成关键词:缺血预处理 肝移植 肝再生 信号通路 大鼠30%小体积肝移植模型三种切肝方法的比较 被引量:6 2007年 目的:探讨不同肝叶选取和切肝方法对小体积肝移植术后生存率的影响,以建立理想的成功率高的大鼠30%小体积肝移植模型.方法:采用以Kamada的"二袖套法"非动脉化大鼠原位肝移植模型为基础,建立大鼠30%小体积肝移植模型.实验分为3组:Ⅰ组:中叶供肝的30%小体积肝移植组(n=28):Ⅱ组:右中叶和右叶供肝的30%小体积肝移植组(n= 15);Ⅲ组:改进切肝方法的30%中叶供肝小肝移植组(n=36).观察3组术后并发症和7d生存率.结果:Ⅱ组切肝时间和术后肝后下腔静脉狭窄的发生率明显低于Ⅰ组(11±3 min vs 13±2 min,P=0.0305;0/15 vs 8/28,P=0.036),但胆漏的发生率高于Ⅰ组(4/15 vs 0/28,P=0.011).Ⅲ组肝后下腔静脉狭窄的发生率明显低于Ⅰ组(1/36 vs 8/28,P=0.008),其他并发症发生率各组间无明显差别.术后7d生存率Ⅰ(33%)、Ⅱ(50%)、Ⅲ(60%)组间无统计学差别.结论:采用中叶供肝、改进切肝技术可以建立具有更稳定的大鼠30%小体积肝移植模型. 姚爱华 浦立勇 李相成 姜超 马跃峰 刘现忠 仲跻魏 王学浩关键词:肝移植 小体积 肝切除 单人操作建立大鼠原位肝移植模型的学习曲线分析 2007年 目的:分析单人操作大鼠原位肝移植(rat orthotopic liver transplantation,ROLT)模型建立术的学习曲线。方法:将作者学习制作该模型最初的100例资料分为5阶段(各20例),对操作时间,无肝期,手术成功率,长期存活率及并发症率进行分析。结果:Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ阶段操作无肝期较Ⅰ,Ⅱ阶段明显减少(P=0.000),手术成功率从35%稳定上升至100%,长期存活率经历Ⅲ阶段55%~60%的平台期,达到95%;并发症率大大降低,模型稳定。结论:初学者经过耐心反复的训练,可通过学习曲线,熟练掌握ROLT术,成功建立肝移植基础研究需要的各种模型。 黄国荣 李相成 浦立勇 姚爱华 吕凌 王学浩关键词:肝移植 超声和微泡超声造影剂介导核因子κB圈套寡核苷酸抗大鼠肝移植后的急性排斥 被引量:2 2006年 目的:观察经超声介导的核转移因子κB圈套寡核苷酸作用后大鼠移植肝的肝功能变化、急性排斥的病理情况及受体的生存时间,探讨超声介导的核因子κB圈套寡核苷酸抗大鼠肝移植急性排斥的作用。方法:实验于2005-04/11在南京医科大学第一附属医院动物实验中心完成。①DA大鼠和Lewis大鼠各36只随机分为3组;每组DA大鼠(供体)、Lewis大鼠(受体)各12只,行DA大鼠至Lewis大鼠的原位肝移植。①对照组:对供肝无干预处理。②生理盐水组:生理盐水1mL+核因子κB圈套寡核苷酸100μg灌注供肝,并在冰水浴中经超声(频率2MHz)处理1min。③10%声诺维组:10%声诺维生理盐水1mL+核因子κB圈套寡核苷酸100μg灌注供肝,并在冰水浴中经超声(频率2MHz)处理1min。④检测各组受体大鼠(n=4)术后第1,4,7天的肝功能(天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转氨酶)变化、病理组织学检查术后第4天移植肝的排斥情况(n=4,按Banff标准进行程度分级,分为0,Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,0级:无排斥证据;Ⅲ级:严重排斥)、统计各组受体大鼠生存率。结果:生理盐水组和10%声诺维组各有1只受体大鼠在术后3d内死亡,未纳入统计。进入结果分析34只。①肝移植术后各组受体大鼠天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转氨酶术后第1天便有不同程度的升高;10%声诺维组各时间点的天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转氨酶值明显低于对照组和生理盐水组(P<0.01);对照组和生理盐水组的转氨酶变化差异无显著性。②术后第4天病理组织学检查各组急性排斥情况:10%声诺维组急性排斥较对照组轻(P<0.05),与生理盐水组比较差异无显著性(P>0.05)。③10%声诺维组肝移植术后受体生存时间较对照组和生理盐水组明显延长(P<0.01);对照组与生理盐水组之间术后生存时间差异无显著性。结论:超声和微泡超声造影剂介导的核因子κB圈套寡核苷酸处理大鼠移植肝,能够改善术后移植� 徐三荣 浦立勇 李相成 张峰 王学浩关键词:造影剂 NFKB 一种脂肪组织靶向性多肽-毛蕊花苷-纳米金颗粒衍生物及其制备方法和应用 本发明公开了一种脂肪组织靶向性多肽‑毛蕊花苷‑纳米金颗粒衍生物的制备方法:将脂肪组织靶向性多肽C端的半胱氨酸残基的羧基活化生成酰氯;将毛蕊花苷和氢氧化钠反应得到酚钠;酰氯和酚钠发生酯化反应生成脂肪组织靶向性多肽‑毛蕊花苷... 张亚琴 袁毅 吴金道 李宏卫 武和明 浦立勇文献传递 CD4^+CD25^+Tr细胞与大鼠肝移植自发免疫耐受关系的研究 被引量:7 2006年 目的研究CD4+CD25+Tr细胞及其相关基因Foxp3与大鼠肝移植自发免疫耐受的关系。方法双袖套法建立大鼠原位肝移植模型;密度梯度离心法分离肝内淋巴细胞;免疫磁性分离法(MACS)分选CD4+CD25+T细胞,流式细胞术(FCM)检测所得细胞纯度。体外细胞增殖试验研究CD4+CD25+T细胞的免疫抑制作用。Western蛋白印迹法检测CD4+CD25+T细胞Scurfin蛋白表达。结果自发耐受组大鼠移植肝内CD4+CD25+Tr细胞含量显著高于急性排斥组。混合淋巴细胞反应中,LEW大鼠的脾细胞比DA大鼠自身的脾细胞更能刺激CD4+CD25+T细胞的增殖。CD4+CD25+T细胞能抑制CD4+CD25-T细胞的增殖,当加入外源性IL-2(200U/ml)时,该抑制作用被逆转。结论转录因子Foxp3介导的CD4+CD25+Tr细胞的免疫抑制作用可能是诱导大鼠肝脏移植自发免疫耐受的机制之一。 张峰 吕凌 浦立勇 李相成 姚爱华 张伟 俞悦 王学浩关键词:肝移植 免疫耐受 FOXP3基因 一种肝胆系统肿瘤类器官培养基及培养方法 本发明涉及一种肝胆系统肿瘤类器官培养基,由如下成分组成:基础培养基、条件培养基、青链霉素、谷氨酰胺、HEPES、B27、N2添加剂、N‑乙酰半胱氨酸、烟酰胺、Gastrin I、EGF、FGF10、HGF、重组人Nogg... 高云 王学浩 浦立勇 陈潇远活体肝移植技术创新及术后小肝综合征防治策略 王学浩 张峰 李相成 孔连宝 孙倍成 李国强 成峰 钱晓峰 张传永 吕凌 吴晓峰 王科 浦立勇 俞悦 王平 肝移植是治疗终末期肝病的有效手段,存在主要问题是供体匮乏,制约肝移植广泛开展。活体肝移植(LDLT)是拓展全球性供肝来源的重要途径。该项目组在多项课题资助下,历时近20年,针对活体肝移植和小肝综合征(SFSS)关键问题取...关键词:关键词:活体肝移植 锌原卟啉对肝癌细胞株HepG2顺铂化疗敏感性的影响 被引量:1 2009年 血氧红素酶-1(HO-1),又称热休克蛋白32,是血红素分解的起始酶和限速酶,具有抑制各种细胞凋亡、抗炎及抗氧化应激等重要生物学作用。本研究应用HO-1特异性抑制剂锌原卟啉(Zn—PP)联合顺铂(CDDP)干预人肝癌HepG2细胞,探讨ZnPP抑制HO-1表达对肝癌细胞CDDP化疗敏感性的影响及其可能的机制。 刘养岁 蒋维维 曹能琦 刘涛 浦立勇 孔连宝关键词:肝癌细胞株HEPG2 化疗敏感性 锌原卟啉 顺铂 人肝癌HEPG2细胞 特异性抑制剂