汤亭亭
- 作品数:365 被引量:1,279H指数:17
- 供职机构:上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市骨科内植物重点实验室建设基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学一般工业技术化学工程更多>>
- 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4诱导新鲜异体骨移植免疫耐受的实验研究被引量:2
- 2005年
- 目的 利用外源性细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 ( cytotoxic T lymphocyte- associated antigen 4immuno globlin,CTL A4 - Ig)阻断T细胞反应的第2信号,诱导新鲜同种异体骨移植免疫耐受。 方法 采用近交系小鼠BAL B/C 6 6只作为骨移植的受体,进行异位肌袋一次及第2次骨移植。一次移植分为3组,每组18只,一组移植C5 7BL/6小鼠骨骼,注射L6 (对照品) ,为AL组;一组移植C5 7BL/6小鼠骨骼,注射CTL A4 - Ig,为AC组;一组移植同系BAL B/C小鼠骨骼,注射PBS缓冲液,为AB组。在第2、4及6周,进行血淋巴细胞亚群分析,血清抗体测定,供体细胞及抗原二次刺激实验及组织学观察。另取12只BAL B/C小鼠,进行第2次移植实验,供体为C5 7BL/6小鼠的骨骼,注射CTL A4 - Ig后2周,分别移植C5 7BL/6 ( BC组)和C3H( BH组)小鼠的骨骼,检测产生免疫耐受的特异性。 结果 AL组与AB组比较,产生了强烈的免疫排斥反应,移植后2、4及6周,CD4 T细胞的增殖明显增加( P<0 .0 5 ) ,血清抗体明显增多( P<0 .0 5 ) ,供体细胞及骨抗原二次刺激的细胞增殖也明显增加( P<0 .0 5 ) ;AC组免疫排斥反应较轻,在CD4 T细胞的增殖、血清抗体及二次刺激的细胞增殖方面均与AB组相似( P>0 .0 5 ) ;组织学观察也显示,异体骨周围的淋巴细胞浸润消失,软骨诱导及新骨形?
- 郭传友戴戎汤亭亭
- 关键词:细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4C57BL/6小鼠CTLA4-IGC57BL/6小鼠CD4T细胞血清抗体测定移植免疫反应
- 不同剂量阿仑膦酸钠对磨损颗粒诱导假体周围骨溶解的影响
- 2008年
- 目的观察不同剂量阿仑膦酸钠对磨损颗粒诱导假体周围骨溶解的影响,确定其合适剂量。方法雄性SD大鼠24只,经膝关节将钛合金假体及混合磨损颗粒植入胫骨近端(双侧),随机分为对照组和实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组6只,术后对照组每日空腹生理盐水2ml灌胃;实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组每日空腹阿仑膦酸钠灌胃,剂量分别为0.01、0.1、1mg/(kg.d),持续6周。术后12周处死取材,进行组织学观察及组织形态计量学测定。结果对照组和实验Ⅰ组假体柄周围纤维界膜厚,细胞成分多,与纤维界膜连接处新生骨边缘呈虫蚀状,新生骨对假体的支撑作用较差;实验Ⅱ、Ⅲ组假体柄周围纤维界膜较薄,新生骨与假体间可见有直接接触,对假体有良好的支撑作用。假体周围界膜厚度及面积的形态计量学检测并经统计学分析显示:对照组与实验Ⅰ组、实验Ⅱ与Ⅲ组间差异无显著性(P>0.05),对照组和实验Ⅰ组分别与实验Ⅱ组和实验Ⅲ组间差异有显著性(P<0.05)。结论以阿仑膦酸钠预防磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解时,最适合剂量为0.1mg/(kg.d)。
- 李宏斌朱振安毛远青严孟宁汤亭亭侯筱魁戴尅戎
- 关键词:阿仑膦酸钠假体周围骨溶解
- 阿仑膦酸钠不同给药时间间隔对磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解影响被引量:3
- 2006年
- 目的观察阿仑膦酸钠不同给药时间间隔对磨损颗粒诱导假体周围骨溶解的影响,为临床应用阿仑膦酸钠预防人工关节假体周围骨溶解提供理论依据。方法雄性SD大鼠12只,经膝关节将钛合金假体及混合磨损颗粒植入胫骨近端(双侧),随机分成实验Ⅰ组和实验Ⅱ组,每组6只,术后分别每日1次空腹阿仑膦酸钠(0.1 mg/kg)灌胃和每周1次空腹阿仑膦酸钠(0.7 mg/kg)灌胃,持续6周。术后12周处死取材,进行组织学观察及组织形态计量学测定。结果实验Ⅰ组和实验Ⅱ组假体柄周围纤维界膜均较薄,细胞成分少,假体周围新生骨与假体间可见有直接接触,对假体支撑作用良好。假体周围界膜厚度及面积的形态计量学检测发现,两组间差异无显著性。结论阿仑膦酸钠预防磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解时,每周给药1次与每日给药1次可产生同样的效果。
- 李宏斌朱振安严孟宁毛远青汤亭亭侯筱魁戴尅戎
- 关键词:阿仑膦酸盐骨质溶解
- 超高分子量聚乙烯颗粒对巨噬细胞影响的实验研究被引量:4
- 2006年
- 目的探讨超高分子量聚乙烯(UHMWPE)颗粒对巨噬细胞的影响及颗粒对转录因子活化T细胞核因子-2(NFAT2)表达的影响。方法2004年11月至2005年2月将UHMWPE颗粒与巨噬细胞共同培养,在不同时段内观察细胞吞噬UHMWPE颗粒的情况,检测细胞增殖活性的变化,分别采用免疫组化和RT-PCR法检测钙调磷酸酶(CaN)和NFAT2表达的变化。结果巨噬细胞早期即开始吞噬UHMWPE颗粒,CaN和NFAT2表达增强,但细胞增殖活性不增加。结论UHMWPE颗粒能够显著引起巨噬细胞的吞噬,同时使细胞内转录因子NFAT2表达增强。
- 毛远青朱振安汤亭亭李宏斌
- 关键词:人工关节巨噬细胞转录因子
- 骨保护素和骨保护素配体在假体周围骨溶解中作用的实验研究被引量:4
- 2006年
- 目的通过动物实验模拟聚乙烯颗粒诱导假体周围骨溶解,观察骨溶解的组织学反应和界膜内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、骨保护素(OPG)和骨保护素配体(OPGL)的变化,了解上述物质在磨损颗粒诱导假体周围骨溶解中的作用机理。方法实验选用SPF级雄性SD大鼠24只,经双侧膝关节向股骨远端植入钛合金棒,术后2、4、6、8、10周分别向左侧膝关节注入聚乙烯颗粒,右侧注射生理盐水作为对照,术后12周处死动物取材,观察界膜的组织学改变、TNF-α的浓度和OPG、OPGL的mRNA含量变化。所得数据选用配剥t检验进行统计学分析。结果注射颗粒侧钛合金棒周围有明显界膜形成,界膜中的TNF-α也有明显增高。RT-PCR半定量分析发现,注射颗粒侧界膜组织中OPG mRNA水平低于对照侧,而OPGL mRNA水平则高于对照侧(P<0.05)。结论聚乙烯颗粒可引起钛合金棒周围多种细胞参与的异物肉芽肿反应,成骨细胞/骨髓基质细胞OPGL的合成增加而OPG的合成减少,此过程可能与TNF-α的升高有关。
- 王晓庆朱振安孙月华唐坚汤亭亭戴尅戎姚晓
- 关键词:骨溶解肿瘤坏死因子-Α骨保护素骨保护素配体
- 脐血间充质干细胞体外培养方法的改良及其生物学特性研究被引量:4
- 2007年
- 目的:对体外分离培养脐血间充质干细胞(UCB-MSCs)的传统方法进行改进,以提高培养成功率,同时观察其生物学特性。方珐:无菌条件下取28份足月产新生儿脐血,以密度梯度离心法分离其中的单个核细胞,以含10%FBS的α-MEM培养基进行体外培养。原代培养5~7d后半量换液,后每隔3~4d全量换液1次。细胞贴壁之后按改良方法进行培养:方法一,当皿底圆形巨核细胞融合、梭形成纤维样细胞脱落时将细胞悬液移入新的皿中培养;方法二,待皿底圆形巨核细胞渐渐占取优势时,将培养基换为含15%FBS的α-MEM,当圆形巨核细胞大部脱落后换回含10%FBS的α-MEM培养基。显微镜下观察UCB-MSCs的形态,流式细胞仪测定细胞免疫表型,体外成骨及成脂诱导并进行细胞化学染色。结果:28份脐血中20份培养出贴壁细胞,其中13份培养出能融合且可稳定传代的成纤维样细胞,成功率为46.4%,可传至22代而无形态上的变化,而且强烈表达CD105、CD29等MSCs表面标志,而CD34、CD45和CDl06等表达呈阴性。在特定条件下,UCB-MSCs可分化为成骨细胞和脂肪细胞。结论:脐血中存在MSCs,培养方法经改良后可提高UCB-MSCs的培养成功率。UCB-MSCs具有与其他来源的MSCs类似的表型及分化潜能,且易于体外扩增、传代稳定,可望在骨组织工程学研究中有广阔的应用前景。
- 王琪苟三怀汤亭亭刘岩欧阳跃平席焱海韩庆林
- 关键词:脐血间充质干细胞细胞免疫表型分型
- 膝关节滑膜间质干细胞分离、培养及其多向分化潜能特性的研究被引量:2
- 2009年
- 目的探讨晚期骨关节炎患者膝关节滑膜间质干细胞(synovium-derived mesenchymal stem cells, SMSCs)体外分离、培养的可行性及其在体外向脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞定向分化的特性。方法取膝关节滑膜组织,胶原酶消化获得有核细胞。挑选单细胞克隆,筛选获得SMSCs。流式细胞技术检测细胞表面特异性抗原标志。培养至第三代,分别向脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞诱导分化。油红O染色鉴定向脂肪细胞分化;碱性磷酸酶染色、茜素红染色鉴定向成骨细胞分化;甲苯胺蓝染色鉴定向软骨细胞分化。RT-PCR检测脂肪细胞、成骨细胞标志基因。Ⅱ型胶原免疫组化染色检测软骨细胞Ⅱ型胶原的表达。结果原代SMSCs体外培养呈葵花样细胞集落,传代后可见圆形巨噬样细胞和纺锤形成纤维样细胞,融合后呈成纤维细胞样生长。CD44、CD90呈阳性,CD34、CD71和CD45呈阴性。向脂肪细胞诱导21d,油红O染色阳性;RT-PCR检测有脂蛋白酶、乙二腈及PPARγ2表达;向成骨细胞诱导7、28d,ALP,茜素红染色阳性,有ALP、Osteopontin及Osteocalcin表达;向软骨细胞诱导21d,甲苯胺蓝染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。结论晚期骨关节炎患者膝关节滑膜组织可以分离、培养获得SMSCs。SMSCs具有向脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞发生定向分化的潜能。
- 芮云峰王友汤亭亭汪洋杜琳戴尅戎
- 关键词:滑膜间质干细胞脂细胞
- 适宜组织工程化骨构建的流体剪切力和物质转运速度的研究被引量:1
- 2011年
- 目的 探讨适宜组织工程化骨构建的流体剪切力和物质转运速度.方法 对接种人骨髓间质干细胞的多孔β-磷酸三钙支架进行灌注培养.灌流量相同时,对支架上的细胞分别施加1×、2×及3×的流体剪切力;流体剪切力相同时,分别给予3ml/min、6 ml/min和9 ml/min的灌注.细胞增殖采用MTT法,通过检测碱性磷酸酶(alkalilinphosphatase,AKP)活性、骨桥蛋白(osteopontin,OP)、骨钙素(osteocalcin,OC)分泌及细胞外基质的矿化评价组织工程化骨的构建.通过计算流体动力学得出流体剪切力和物质转运速度.结果 灌流量相同时,剪切力2×组细胞增殖活性最高;2×和3×组AKP活性及OC分泌高于1×组;第28天时,3×组矿化基质最多.流体剪切力相同时,6 ml/min组AKP活性最高;第28天时,3 ml/min组OC分泌最高,矿化基质最多.灌流量相同时,流体剪切力分别为0.004~0.007 Pa、0.009~0.013 Pa和0.013~0.018 Pa;流体剪切力相同时,物质转运速度分别为0.267~0.384 mm/s、0.521~0.765mm/s和0.765~1.177 mm/s.结论 利用接种人骨髓间质干细胞的β-磷酸三钙支架构建组织工程化骨时,0.013~0.018 Pa的流体剪切力及0.267~0.384 mm/s的物质转运速度是适宜的.
- 李德强戴尅戎汤亭亭郭雪岩卢建熙杨爱玲
- 关键词:间质干细胞生物反应器生物转运
- 一种快速过滤筛选骨髓基质干细胞方法
- 本发明涉及一种过滤方法,具体地说关于一种快速过滤筛选骨髓基质干细胞方法。本发明的技术方案如下:一种快速过滤筛选骨髓基质干细胞方法,包括以下步骤:(1)将待用骨髓血进行抗凝处理;(2)抗凝处理后的骨髓血通过过滤复合器过滤;...
- 干耀恺戴尅戎汤亭亭
- 文献传递
- 重组人BMP-2骨诱导中神经营养因子家族及其受体的表达
- 目的通过观察重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)异位诱导成骨过程中神经营养因子家族(NTFs)及其高亲和力受体的表达,探讨神经营养因子在 BMP 骨诱导中的作用。方法将 ICR 小鼠36只随机分为实验组和对照组,建...
- 夏胜利戴尅戎汤亭亭
- 关键词:骨形态发生蛋白骨诱导神经营养因子受体
- 文献传递