柳柯
- 作品数：71 被引量：174H指数：9
- 供职机构：首都医科大学附属北京友谊医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程理学一般工业技术更多>>
- C57BL/6J小鼠耳蜗内毛细胞传入神经突触的超微结构观察被引量：2
- 2011年
- 目的利用投射电镜观察C57Bl/6J小鼠耳蜗内毛细胞传入神经突触的形态和结构。方法选择发育成熟的C57Bl/6J小鼠,ABR检测听力正常后获取耳蜗标本,分别经过半薄定位和超薄连续切片观察的方法寻找观察耳蜗内毛细胞传入神经突触的形态和结构,探讨发育成熟状态下小鼠耳蜗内毛细胞突触的形态和结构特点,并进一步分析它们可能出现的区域以及与周围解剖结构的关系。结果在听力正常的C57Bl/6J小鼠的不同耳蜗内毛细胞核下区域可以观察到带状突触结构,包括ribbon、突触囊泡、突触间隙和突触后致密带等典型结构;然而有时即使是在听力正常的小鼠耳蜗内,也不能同时观察到这些结构的全部,即内毛细胞带状突触的超微结构和形态可能表现出彼此之间存在明显区别的形式。结论在听力正常的生理状态下,成熟小鼠(c57BL/6J)耳蜗内毛细胞突触的形态和结构处于动态变化之中,突触的个体形态和结构可以表现出不同的特点,而这种结构上的动态变化可能和突触功能的变化有关。
- 施磊柳柯赵宁魏宏权刘红娟姜学钧
- 关键词：耳蜗透射电镜C57BL/6J小鼠
- Wnt通路激活对TNF-a诱导的毛细胞炎性损伤的作用
- 宋青玲于树夔曲腾飞齐悦柳柯龚树生
- 宽频带白噪声适度暴露对小鼠听力损害的实验研究被引量：10
- 2014年
- 目的：通过100dB SPL宽频带白噪声对成年C57小鼠进行单次2小时的暴露，观察该种噪声对小鼠听功能损害的特点。方法选取5-6周龄ABR听阈正常的C57小鼠（每组5-7只），随机分为5个实验组分别为：噪声暴露后即刻（P0）、1天（P1）、3天（P3）、7天（P7）、14天（P14）。实验组小鼠于100dB SPL宽频带白噪声环境下暴露2h，本实验采用噪声暴露前的小鼠作为对照组。每只实验小鼠分别于噪声暴露前及暴露后各时间点进行ABR阈值检测以评估听力受损情况，实验采用统计噪声暴露前、后各时间点小鼠ABR差值（阈移）的方法分析实验结果。结果噪声暴露后即刻，小鼠各频率的ABR阈移均为最大值（P〈0.01）：Click（11.92±7.51dB）、4kHz（11.92±5.60dB）、8kHz（12.31±5.99dB）、16kHz （21.54±8.75dB）、32kHz（20.00±8.90dB），且在各个频率的阈移中，以16kHz及32kHz处的高频听力损失最严重，明显高于Click、4kHz及8kHz处的阈移（P〈0.05）。脱离噪声环境24小时后各频率的ABR阈移开始下降，2周以后，小鼠各频率ABR阈值均完全恢复至暴露前水平（P〉0.05）：Click（1.11±6.01dB）、4kHz（1.11±3.33dB）、8kHz（1.11±4.17dB）、16kHz （1.67±4.33）、32kHz（2.78±4.41）。结论100dB SPL宽频带白噪声单次有限暴露可以造成小鼠出现一定程度的听力损害。在频率分布上，高频区域的听力损害更为明显。同时，本研究表明，这种噪声下小鼠听力损害可以表现自我主动恢复的特征。
- 石闯柳柯杨仕明姜学钧施磊
- 关键词：C57BL
- 胆红素对离体培养大鼠耳蜗基底膜的药理效应观察被引量：1
- 2014年
- 目的观察胆红素对离体培养的新生SD大鼠耳蜗器官的损伤效应。方法健康新生3日龄SD大鼠18只,雌雄不限,分离其双侧的内耳共得到耳蜗器官组织36个,体外培养,12h后换液。选择贴壁、存活良好的组织30个入选实验,并随机分为两组(15个/组):实验组于贴壁第二天开始进行胆红素处理,对照组加入相应体积的生理盐水。处理后24h,实验组和对照组同时终止培养,并对其进行固定、免疫组织化学染色,共聚焦显微镜观察毛细胞及螺旋神经节神经元的形态变化并计数,统计对比。结果胆红素组离体培养的耳蜗器官中螺旋神经节神经元胞体及其树突纤维与对照组相比有明显的减少,内外毛细胞形态完整,数量无明显变化。结论大鼠耳蜗器官螺旋神经节神经元对胆红素的毒性敏感,而内外毛细胞对其毒性相对不敏感。
- 魏晓泉赵立东丛涛柳柯杨仕明林昶
- 关键词：耳蜗离体培养胆红素毛细胞螺旋神经节
- 庆大霉素暴露对小鼠肾脏与耳蜗功能损伤效应的对应关系研究被引量：2
- 2017年
- 目的观察氨基糖甙类药物庆大霉素进入小鼠肾脏和耳蜗毛细胞在时间和数量上的特点及肾功能和听功能损害情况。方法将18只6周龄的C57小鼠随机分为3组,分别为对照组(contr)、用药后1天组(d1)、用药后7天组(d7),每组6只动物。置备完成的Texas Red标记庆大霉素(GTTR)以100mg/kg浓度腹腔注射小鼠,1次/天,通过激光共聚焦显微镜观察荧光标记庆大霉素在各组小鼠耳蜗毛细胞和肾脏组织积蓄情况,采用Image-Pro Plus软件测算标本荧光强度值,并进一步估算各标本庆大霉素摄取情况。同时,通过生化检测和听力检测,观察用药后小鼠肾功能和听功能损害情况。结果小鼠标本荧光强度(OD)值测算结果:用药后1天,小鼠肾脏组织中庆大霉素即达到了高水平,P<0.01;与此同时,小鼠耳蜗毛细胞内虽然检测到明显的红色荧光,但是其OD值要明显低于肾脏组织。用药后7天,肾脏组织和耳蜗毛细胞的OD值均比对照组有极为显著的升高(P<0.01)。对小鼠肾功能和听力的检测显示,用药后1天小鼠血液中BUN和Scr水平即有明显升高,表明此时肾功能已受到损害;而用药后1天小鼠ABR阈值和对照组相比却未见显著升高(P>0.05),表明此时听力损害尚未显现。在用药后7天,小鼠BUN、Scr和ABR阈值水平和对照组相比均有显著改变(P<0.01)。结论和肾功能损害相比,庆大霉素对小鼠听觉损害具有时间上的滞后效应,而这种时间上的延迟反应为听力损害的临床干预提供了可能。
- 孙克冰柳柯
- 关键词：RED小鼠肾脏功能听功能
- 氨基糖甙类药物毒性对耳蜗内毛细胞传入神经突触后谷氨酸受体的影响被引量：2
- 2012年
- 目的 探讨氨基糖甙类耳毒性药物暴露下小鼠内毛细胞传入神经突触后谷氨酸受体表达水平的变化,以及这种变化和小鼠听功能改变之间的关系。方法 选择5周大小的C57BL/6J小鼠,每天腹腔注射庆大霉素1次,药物浓度为100mg/kg,连续给药14d,分别在第7天、第14天时检测受试小鼠的ABR(Click&Tone burst),并以未进行腹腔注射给药的小鼠(0d)作为对照组。使用抗GluR2/3抗体对小鼠基底膜铺片标本进行染色标记,以观察耳蜗内毛细胞传入神经突触后谷氨酸受体(GluR2/3)的表达情况。结果 注射庆大霉素小鼠在第7天、10天、14天时听力损失明显,听力阈值显著高于对照组(p<0.05)。应用庆大霉素后第7天和14天,耳蜗内毛细胞传入神经突触后谷氨酸受体(GluR2/3)的表达水平和对照组相比显著增高,听力损失最为严重,提示GluR2/3在突触后的过高表达和耳聋程度存在相关性。结论 氨基糖甙类耳毒性药物持续暴露可以造成耳蜗内毛细胞传入神经突触间隙内谷氨酸递质过表达,与耳聋程度呈正相关。
- 徐义策王雪峰柳柯施磊杨仕明
- 关键词：耳蜗听阈
- 线粒体去乙酰化蛋白SIRT3在噪声诱导隐匿性听力损失中的作用被引量：1
- 2022年
- 目的探讨线粒体去乙酰化蛋白(sirtuin-3,SIRT3)在噪声性隐性听力损失(noise-induced hidden hearing loss,NIHHL)中的作用。方法将注射过SIRT3抑制剂[3-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)pyridine,3-TYP]与未经处理的C57BL/6J小鼠分别于100 dB白噪声下暴露2 h,并在噪声暴露(noise exposure,NE)后1 d和14 d进行测听。利用免疫荧光染色观察内毛细胞(inner hair cell,IHCs)带状突触(ribbon synapses,RS)的变化。冰冻切片下,4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)染色观察耳蜗内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的累积。结果与对照组相比,噪声组及3-TYP组小鼠均在噪声后出现短暂性听力阈值的升高,ROS的累积及带状突触的丢失。与噪声组小鼠相比,3-TYP组小鼠在噪声后第14天听力未恢复正常,带状突触丢失明显,且伴有ROS的显著累积。结论NE诱发了内耳的氧化应激反应,SIRT3可能通过抵抗氧化应激作用来保护耳蜗带状突触及听功能。
- 杨紫荆赵春丽梁文琦陈钟壡柳柯柳柯
- 关键词：氧化应激
- 后半规管途径导入不同血清型腺相关病毒转染小鼠耳蜗内毛细胞的效果比较
- 2022年
- 目的探讨不同血清型的腺相关病毒经后半规管途径导入成年小鼠转染内耳细胞的效率及安全性。方法将20只6~8周C57BL/6J小鼠采用数字表法随机分为5组:腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)4组,AAV8病毒注射组、AAV9病毒注射组、AAVie病毒注射组和Anc80L65病毒注射组,均采取后半规管路径进行注射,每只注射病毒溶液2μL;正常对照组,每只注射0.9%(质量分数)氯化钠注射液2μL,均以左耳为手术耳。各组于术前1 d及术后2周行听觉脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检查,随后取材进行免疫荧光染色观察病毒在基底膜的分布情况。结果AAV8组:术后2周观察见耳蜗顶中转34.6%±1.8%内毛细胞被转染,中底转39.0%±5.9%内毛细胞表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP);AAV9组:术后2周见耳蜗顶中转92.5%±1.1%内毛细胞被转染,中底转94.6%±1.0%内毛细胞表达GFP;AAVie组:术后2周见耳蜗顶中转96.7%±1.5%内毛细胞被转染,中底转97.7%±0.8%内毛细胞表达GFP;Anc80L65组:术后2周见耳蜗顶中转62.5%±3.3%内毛细胞转染,中底转63.1%±6.1%内毛细胞表达GFP;正常对照组未见GFP表达。结论经半规管途径注射AAVie、AAV9病毒溶液可以高效转染到耳蜗内毛细胞,此结果对耳聋疾病的内耳基因治疗具有一定的参考意义。
- 刘珊郭瑞郭瑞于倩茹陈钟壡梁文琦滕琪龚树生龚树生
- 关键词：腺相关病毒病毒转染耳蜗内毛细胞后半规管
- 噪声引起的血管纹基质金属蛋白酶变化及其对耳蜗血·迷路屏障的影响
- 目的 研究基质金属蛋白酶(MMPs)在耳蜗血管纹的分布及其在噪声损伤中的变化,探讨MMPs在血-迷路屏障(BLB)正常功能的维持及噪声应答中的作用.方法 本研究在成功构建噪声性聋动物模型的基础上,利用转录组学RNA-se...
- 吴军韩维举郭维维柳柯张继帅塞娜
- 老年性聋耳蜗带状突触数量在时空上的改变被引量：6
- 2016年
- 目的研究年龄相关性听力损失过程中听力阈值变化与耳蜗内毛细胞带状突触标记物数量之间的关系。方法应用C57BL/6J小鼠进行本研究。在本研究中,对鼠龄为1、2、4、6和12个月的C57BL/6J小鼠分别进行ABR阈值检测分析(Click&Tone burst)。对被检测小鼠的耳蜗基底膜标本进行突触前特异蛋白RIBEYE/CtBP2进行免疫荧光标记,采用激光共聚焦观察结合三维重建的方法来计数突触标记物(RIBEYE/CtBP2)的数量并进行统计学分析。结果小鼠的ABR阈值从鼠龄4个月时开始出现显著抬高(P<0.05),以后在鼠龄为6和12个月时抬高更加明显。在频率分布上,这种阈值的抬高在高频区域(8KHz&16KHz)表现的最为明显。同时,本研究发现标记物的数量和ABR阈值的变化呈现一致性的改变:突触标记物数量也在4个月时开始出现减少(P<0.05),且随着鼠龄的增加数量减少更加明显。这种数量减少的表现在高频区域(8KHz&16KHz)表现得尤为显著(P<0.01)。在听力减退的早期阶段(鼠龄4-6个月),小鼠毛细胞,尤其是内毛细胞数量并未现明显的减少。结论老年性听力损失和耳蜗带状突触的数量改变密切相关,突触数量的减少可能是导致年龄相关性听力损失的一个重要因素。
- 王驰柳柯赵立东候琨施磊杨仕明宁博
- 关键词：老年性聋C57小鼠内毛细胞
