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杜芝燕: 作品数：110 被引量：226H指数：9; 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>

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新鉴定的转移相关基因: ＜正＞对于肿瘤转移的共识,第一点,肿瘤的异质性是一普遍的现象,即不是所有肿瘤细胞都具有转移能力;在同一肿瘤内的不同细胞亚群具有不同的转移潜力。虽然肿瘤细胞必先具有成瘤性,然后才可能在远隔部位生长成为转移灶,所以成瘤性是...; 陆应麟张金强孟宇宏陈惠华王妍徐元基杜芝燕; 文献传递

肿瘤转移相关新基因MAG-1和MAG-2的克隆被引量：9: 2003年; 目的　从两株人肺巨细胞癌细胞株中分离并鉴定人肺癌转移相关基因 ,为探讨肿瘤转移的分子机制奠定基础。方法　以细胞系PLA 80 1的两个具有不同转移潜力的亚克隆为模型 ,利用抑制消减杂交(suppressionsubtractivehybridization ,SSH)技术克隆差异片段 ,对得到的片段经基因芯片筛选后测序并与GenBank数据库进行同源性比较 ,然后用Northern杂交和RT PCR对其中的两条序列进行验证 ,并进行详细的生物信息学分析。结果　获得了 79条在高转移细胞中高表达而在低转移细胞中低表达的序列 ,在与这些序列同源的己知基因中包括两条功能未知的全长cDNA序列BC0 0 62 3 6和BC0 0 2 42 0 ,分别命名为MAG 1和MAG 2。MAG 1定位于 4q2 1,由 4个外显子组成 ,MAG 2定位于 2 q3 5 ,由 9个外显子组成 ,基因长度分别为8.5kb和 5 .2kb。二条序列均有开放阅读框架 (ORF) ,编码产物以α螺旋为主并含有部分片层结构和无规卷曲。结论　MAG 1和MAG 2在高低转移性肺巨细胞癌细胞株中的表达具有显著差异 ,二者的表达与高转移潜能具有相关性 ,提示MAG 1和MAG 2可能参与肿瘤转移过程。; 张金强孟宇宏杜芝燕陈泽建凌贤龙徐元基陆应麟; 关键词：肿瘤基因克隆肺癌抑制消减杂交技术 SSH

新型纳米转染试剂转染PNP自杀基因体外杀伤实验被引量：4: 2003年; 将壳聚糖纳米粒包裹的报告基因pEGFP-N1质粒转染至HEK293细胞,并在HEK293细胞中成功表达荧光蛋白的基础上,进一步将本室自行构建的PNP基因的真核高效表达载体质粒pcDNA3-PNP转染至HEK293细胞。转染72h后,对转染的HEK293细胞给予前体药6-MPDR至终浓度40μg/ml,一天后,采用MTT比色法测定药物对细胞增值的影响,并进行统计学处理。实验结果表明采用壳聚糖纳米粒转染试剂转染并给予前体药6-MPDR的实验组活细胞数,与用壳聚糖转染但不给前体药6-MPDR的对照组活细胞数相比,有显著差异(P<0.05),说明新筛选出的壳聚糖纳米粒转染试剂可以将PNP自杀基因递送至靶细胞中,并在细胞中进行表达,从而使PNP/6-MPDR自杀基因系统发挥杀伤细胞的作用。分别采用相同工作浓度的脂质体与壳聚糖纳米粒转染试剂转染相同浓度的基因质粒,壳聚糖纳米粒对靶细胞生长数量影响很小,说明的壳聚糖纳米粒细胞毒性大大低于阳离子脂质体的细胞毒性。; 杜芝燕黄伟李峰生谢庆军陆应麟崔光华; 关键词：基因转染绿色荧光蛋白

蜘蛛牵引丝蛋白MaSp1原核表达载体构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：1: 2014年; 目的通过基因工程手段实现牵引丝关键组成蛋白MaSp1在大肠杆菌中的异源表达,并对其进行分离纯化,从而建立基因工程蜘蛛丝基因序列串联拼接、载体构建以及原核表达与纯化的关键技术体系。方法利用同尾酶连接法对合成的基因工程蜘蛛丝基因单体序列进行串联拼接,获得多倍串联体克隆重组子,将鉴定正确的多倍串联体克隆重组子与原核表达载体pET28a(+)连接,转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导其表达,表达产物通过SDS-PAGE和Western印迹进行鉴定。在此基础上对工程菌进行高密度发酵,所获蛋白通过硫酸铵分级分离方法进行纯化。结果与结论成功构建了基因工程蜘蛛丝MaSp1多串联体的表达载体,原核表达蛋白的相对分子质量与预期一致,且纯化的目的蛋白纯度达80%以上。上述研究工作为开展基因工程蜘蛛丝蛋白的规模化制备建立了关键技术方法,并为后续基因工程蜘蛛丝的人工纺丝提供必要的前提和工作基础。; 乔鑫王妍李俊杰段翠密王海滨周瑾杜芝燕王常勇; 关键词：基因工程原核表达蛋白质纯化

香菇多糖对抗模拟微重力环境培养的淋巴细胞免疫功能抑制的实验研究被引量：5: 2012年; 本研究旨在探索香菇多糖对抗旋转式细胞培养系统(rotary cell culture system,RCCS)模拟微重力环境下淋巴细胞免疫功能降低的作用。体外分离培养小鼠脾淋巴细胞,在正常重力环境和RCCS模拟微重力环境下分别添加10、20和40μg/ml的香菇多糖溶液,培养24、48和72 h取样,用MTT法、ELISA和流式细胞术分别检测香菇多糖对细胞增殖度、细胞因子分泌量和表面标志表达的影响。结果表明,10、20和40μg/ml香菇多糖在处理时间内对小鼠脾淋巴细胞增殖无明显促进作用;不同浓度的香菇多糖均可提高小鼠脾淋巴细胞在模拟微重力环境下IL-2和IFN-γ的分泌量和促进小鼠脾淋巴细胞表面CD4和CD8分子的表达。结论:香菇多糖具有对抗模拟微重力环境造成的淋巴细胞免疫功能降低的作用。; 郝彤王滟濛李俊杰杜芝燕段翠密王常勇宋锦苹王林杰李莹辉王妍; 关键词：香菇多糖模拟微重力淋巴细胞

CHIP基因稳定转染人慢性髓系白血病K562细胞诱发有丝分裂异常被引量：1: 2008年; 本研究旨在建立可稳定高效表达E3泛素连接酶CHIP(carboxyl terminus of Hsc70/Hsp70-interactingprotein)的慢性髓系白血病细胞株K562细胞模型,以观察过表达CHIP对细胞生物学特性的影响。采用脂质体介导的方法,经G418筛选及有限稀释法成功建立了可稳定表达野生型CHIP及其TPR及U-box结构域缺失突变体的慢性髓系白血病K562细胞克隆。对过表达CHIP的K562细胞用MTT法检测体外增殖,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测相关蛋白表达,瑞氏-姬姆萨染色进行细胞形态学观测。结果表明,过表达野生型CHIP对K562细胞体外增殖能力没有明显影响,细胞周期中G2/M期细胞比率增加,CHIP对BCR-ABL激酶的稳定性没有影响,但却明显导致细胞形态异常,表现为细胞体积增大及异常核细胞数目增多,出现异常有丝分裂相等,提示CHIP分子对细胞有丝分裂过程可能具有调控作用。结论:野生型CHIP可诱导K562细胞发生有丝分裂异常。; 高莹王妍张旭辉陈国柱杜芝燕徐元基于晓妉; 关键词：CML

体外培养人骨髓间充质干细胞的生物学特性被引量：4: 2004年; 目的　体外分离培养人骨髓间充质干细胞 (MSCs)并研究其一般的生物学特性。方法　通过密度梯度离心法分离MSCs、体外培养传代细胞计数、流式细胞仪检测细胞增殖周期、表面分子测定以及细胞化学染色了解人MSCs一般的特点。结果　人MSCs经过体外培养均一地表达CD2 9、CD4 4、CD16 6 ,而CD34、CD4 5阴性。细胞化学结果显示 ,细胞糖原 (PAS)强阳性 ,脂肪 (SB)为阴性 ,5 %～ 10 %细胞碱性磷酸酶 (ALP)阳性。细胞周期分析表明 :G0 /G1、S和G2 /M所占比例分别为 83 11%、5 17%和 11 72 %。分离细胞在成骨诱导体系下进一步向成骨细胞分化。结论　密度梯度离心法能够分离纯化MSCs有其特殊的生物学特点 ,能够向成骨细胞分化。; 赵宇陆应麟乔群杜芝燕徐元基戚可名; 关键词：体外培养骨髓间充质干细胞生物学特性流式细胞仪细胞计数

一种肝癌靶向性溶瘤腺病毒，其制备方法及用途: 本发明公开了一种肝癌靶向性溶瘤腺病毒，其制备方法及用途。本发明的腺病毒是利用缺氧应答元件HRE和AFP核心启动子AF0.3来构建杂合启动子，构建保留有E1复制启动区基因的重组腺病毒穿梭质粒，再经过同源重组构建重组腺病毒质...; 陆应鳞陈泽建杜芝燕徐丁尧蔺会云徐元基王妍; 文献传递

噬菌体抗体文库的构建及人源抗HIV-1 gp 160抗体的筛选被引量：12: 1998年; 构建人源噬菌体抗体文库如下：ＨＩＶ感染者脾细胞中提取ｍＲＮＡ，经反转录再以人ＩｇＧ重链Ｆｄ两端及轻链“通用”引物分别扩增Ｆａｂ基因片段，依次插入到噬菌粒载体ｐＣｏｍｂ３中，电转化大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ，经辅助噬菌体救助，重组噬菌体得以溶源裂解，Ｆａｂ表达于噬菌体包膜蛋白Ⅲ的Ｎ端．此噬菌体抗体库的容量为５×１０５．筛选抗ＨＩＶ－１同时又具有能被抗独特型抗体“ＩＦ７”所识别的独特型的阳性抗体：以重组包膜糖蛋白ｇｐ１６０及ｇｐ４１多肽对噬菌体抗体文库进行三次淘选，使抗ｇｐ１６０的特异性抗体得到１００倍的富集．然后通过直接ＥＬＩＳＡ和竞争性ＥＬＩＳＡ实验筛选出两株结合性较好的特异性抗ｇｐ１６０抗体－３Ｂ株与１Ｄ株．直接ＥＬＩＳＡ实验表明这两株克隆均能被“１Ｆ７”所识别，为抗独特型多肽的筛选奠定了基础．; 赵云峰王海涛王全立杜芝燕杜芝燕孙红琰杨景庚殷震; 关键词：噬菌体 HIV 独特型抗体

模拟微重力环境下虫草多糖促进淋巴细胞增殖和CD分子表达的实验研究被引量：2: 2012年; 本研究旨在探索旋转式细胞培养系统(RCCS)模拟微重力环境下虫草多糖促进淋巴细胞增殖和表面CD分子表达的作用。体外分离培养小鼠脾淋巴细胞,在RCCS模拟微重力环境中分别添加6.25、12.5、25和50μg/ml的虫草多糖溶液培养,在24、48和72 h检测虫草多糖对淋巴细胞增殖及表面CD分子表达的作用。结果表明,模拟微重力环境抑制了淋巴细胞的增殖能力,25和50μg/ml虫草多糖对淋巴细胞的增殖和CD4、CD8的表达均具有促进作用,但50μg/ml虫草多糖促进淋巴细胞增殖的作用随时间延长变为抑制作用。结论:适宜浓度范围内的虫草多糖具有对抗模拟微重力环境下淋巴细胞增殖能力下降和表面CD分子表达减少的作用,为筛选对抗失重效应、促进免疫力的药物提供理论依据和实验基础。; 郝彤李俊杰杜芝燕段翠密王滟濛王常勇宋锦苹王林杰李莹辉王妍; 关键词：虫草多糖淋巴细胞模拟微重力提高免疫力

杜芝燕

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