李艳冬
- 作品数：9 被引量：104H指数：6
- 供职机构：湖州市农业科学研究院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- GhMADS3基因组成型表达对矮牵牛花形和花色的影响被引量：14
- 2007年
- 利用农杆菌介导法将GhMADS3基因转入矮牵牛。对14株转基因植株进行分析鉴定,GUS染色表明外源基因在转基因植株中表达,PCR检测显示GhMADS3整合到矮牵牛的基因组中,RT-PCR分析表明GhMADS3在转基因植株中表达。转基因植株花器官普遍较野生型小,花萼膨大、顶尖向内弯翘,花冠深裂且边缘伴有不规则褶皱,柱头裸露在外,花器官颜色较野生型变淡甚至完全白化。测定花瓣、花萼中花色素苷和花萼中叶绿素含量,结果表明转基因植株均较对照偏低。说明GhMADS3的导入使得矮牵牛花形、花色发生改变。
- 郑亚东郭余龙陈旭李艳冬欧建龙李名扬
- 关键词：矮牵牛花色花形MADS-BOX
- 提取金荞麦愈伤组织总RNA的一种有效方法被引量：1
- 2011年
- 目的:建立金荞麦愈伤组织总RNA提取方法。方法:采用CTAB法结合LiCl沉淀的改良方法提取RNA,紫外分光光度检测、0.8%非变性琼脂糖凝胶电泳检测、RNA的反转录等评价RNA质量。结果:提取的总RNA 28S和18S条带清晰,且A260/A280在1.9～2.0,以提取的RNA为模板反转录的cDNA长度范围较广(500 bp～5 kb)。结论:该方法提取出的总RNA质量能满足RT-PCR等分子生物学操作的要求,且简单、有效、经济,可用于金荞麦愈伤组织总RNA的提取。
- 眭顺照马婧李艳冬祝钦泷李名扬
- 关键词：金荞麦愈伤组织总RNA提取
- 资源植物野生金荞麦的研究进展被引量：48
- 2006年
- 中国地大物博,有30000多种高等植物,居北半球之首,其中资源植物十分丰富,也是天然药物主产国之一。自20世纪70年代以来,中国的资源植物研究尤其是药用植物的研究发展迅猛,近20年来,从天然产物中开发各种新药成为世界科学家研究的热点。中国是世界荞麦的起源中心,也是遗传多样性中心。野生金荞麦(Fagopyrumdibotrys)系蓼科荞麦属多年生草本植物,原产于中国西南,分布于陕西、江苏、浙江、江西、河南、湖北、湖南、广西、广东、四川、重庆及云南等省区,是一种营养丰富并具有重要药用价值的资源植物。野生金荞麦中蕴涵着丰富的优异基因,作为中国重要的传统中药材,金荞麦的块根活性提取物(植物次生代谢产物)具有显著的抗癌,抑制肿瘤细胞肺侵袭和转移,以及消炎抗菌等重要作用,是多种有效药物的主要成分之一。除此之外,由于其籽粒蛋白质的组分全,必需氨基酸含量高,富含维生素和微量元素,使其成为一种较理想的保健食品的选用成分。目前,由于人工栽培产量的限制,加之栽培品种在营养价值上、药用有效活性成分和效价上均低于野生品种,这就造成了对野生金荞麦资源的大量需求,从而对野生资源造成了极大的破坏。鉴于此,中国现已将其列为国家二级保护植物。国内外已经展开了资源收集、多样性、生理特性、育种、药效学以及生态环境等方面的研究,基于活性成分合成的功能基因的研究,国内外还未见报道,为了进一步开发野生金荞麦的利用价值,发掘其优异的功能基因,并保护其野生基因资源,综述了野生金荞麦在本草、原植物分类及分布、多样性、核形、化学及功能成分、药理药效、生态环境、栽培及组织培养方面研究的新进展,并从基础研究、组织培养、基因工程、抗癌机理研究、育种研究、保健品开发等方面作了展望。
- 刘光德李名扬祝钦泷李艳冬眭顺照
- 关键词：资源植物
- 彩叶草叶片cDNA文库的构建与分析被引量：4
- 2007年
- 用植物(叶)总RNA抽提试剂盒提取彩叶草红色品种顶部叶片总RNA,用SMARTcDNALi-braryConstructionKit构建cDNA文库。经测定原始文库滴度为1.2×106pfu/ml,扩增总文库滴度为6.7×109pfu/ml,重组率达到98%,插入片段在0.5kb到2kb之间,1kb以上的占60%。通过PCR检测,从总文库中检测到了彩叶草CHS、DFR及ANS基因的特异片段。各项指标都表明,已获得较高质量的cDNA文库,为彩叶草叶色基因的分离克隆,彩叶草类黄酮类色素合成的分子调控的研究奠定了基础。
- 祝钦泷李艳冬刘光德郭余龙眭顺照李名扬
- 关键词：彩叶草叶片CDNA文库叶色
- 金荞麦二氢黄酮醇4-还原酶基因(FdDFR1)的克隆及序列分析被引量：16
- 2009年
- 【目的】克隆金荞麦二氢黄酮醇4-还原酶基因(FdDFR1),分析其序列特征。【方法】利用同源克隆的原理,采用RACE结合cDNA文库筛选的方法,从金荞麦cDNA文库中克隆DFR基因(FdDFR1);对其序列进行生物信息学分析和Southern杂交检测。【结果】克隆到一个DFR蛋白基因(FdDFR1),通过Southern杂交分析,推测在金荞麦基因组中DFR基因是1～2个基因的小家族,FdDFR1是单拷贝基因;FdDFR1基因编码一个长341个氨基酸的蛋白质,在N端存在一个NADP结合位点"VTGASGFVGSWLVMRLLEHGY",还存在一个底物结合特异性决定的氨基酸基序"TVNVEEKQKPVYDETCWSDVDFCRRV"。【结论】首次从金荞麦中克隆到类黄酮代谢的中期关键酶基因(FdDFR1),它具有DFR同源基因的典型特征。
- 刘光德雷兴华祝钦泷钟光驰郭铁英李艳冬眭顺照李名扬
- 关键词：金荞麦克隆类黄酮
- 金荞麦愈伤组织诱导及其总黄酮含量测定方法的建立被引量：13
- 2010年
- 金荞麦是蓼科(Polygonaceae)荞麦属(Fagopyrum Mill.)一种营养丰富并具有重要药用价值的多年生草本植物,其块根活性提取物(其成分同悬浮培养的次生代谢产物即黄酮类化合物)是多种重要的抗癌药物和癌预防药物的主要成分之一.利用金荞麦腋芽的叶片和茎段进行愈伤组织的诱导,筛选出最适合愈伤组织生长的培养基为1/2MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.3mg/L(或IBA 0.3mg/L)+2,4-D 0.1mg/L.并在借鉴其他物种利用分光光度法测定总黄酮含量的基础上,对金荞麦愈伤组织的显色时间等条件进行了优化,得到了一种适合金荞麦愈伤组织总黄酮含量测定的方法.该方法简单易行,为悬浮培养和其工厂化生产黄酮类化合物时总黄酮含量的测定奠定了基础.
- 林静刘群李艳冬马婧李名扬
- 关键词：金荞麦愈伤组织诱导总黄酮分光光度法
- 彩叶草叶片衰老相关新基因Cbcbs的分子特征和功能分析(英文)被引量：7
- 2007年
- 叶片衰老是观叶植物观赏性降低的重要因素之一.为研究彩叶草叶片衰老变化的分子机理,在构建彩叶草衰老叶片cDNA文库及小型EST库的基础上,以1条新的具有胱硫醚-β-合酶(cystathionine beta synthase,CBS)结构域的EST序列为探针,通过RACE与文库结合的方法,克隆了1个具有1对完整CBS结构域的全长cDNA,Cbcbs.CbcbscDNA全长859 bp,包含1个609 bp的ORF框,编码202个氨基酸.其5′UTR区含有1个终止子TAA,3′UTR区含有推测的加尾信号AATAAA和ATTTA元件.CbCBS N端含有线粒体转运肽,具有2个保守的CBS结构域,4个酪蛋白激酶Ⅱ(casein kinaseⅡ,CKⅡ)磷酸化位点,3个蛋白激酶C(protein kinase c,PKC)磷酸化位点和1个酪氨酸硫化(tyrosine sulfation,TS)位点.序列比较和进化分析表明,CbCBS是与衰老或应急相关的蛋白.二级结构和三级结构预测表明,CbCBS的功能主要由CBS结构域决定.RT-PCR分析表明,该基因在叶的各个时期均有表达,但随叶片衰老进程的加快而表达增加,是一个叶衰老相关基因(SAG),推测在线粒体中成熟的CbCBS可能作为细胞能量传感器,在叶衰老引起的能量应急中参与细胞能量水平的调节.
- 祝钦泷李名扬刘光德李艳冬眭顺照郭铁英
- 关键词：彩叶草衰老相关基因叶片衰老
- 药用植物金荞麦悬浮体系的建立及其次生代谢物的生产调控
- 野生金荞麦，亦称野荞麦，天养麦，红三七，多年生草本植物，系蓼科荞麦属中的一个种。是一种营养丰富并具有重要药用价值的资源植物，其主要的活性成分为黄酮类化合物。然而，近些年由于自然环境的破坏、无计划的采挖和栽培技术等原因，使...
- 李艳冬
- 关键词：金荞麦类黄酮
- 文献传递
- 资源植物金荞麦高类黄酮含量愈伤系的获得及其cDNA文库的构建被引量：8
- 2006年
- 用野生金荞麦无菌苗的茎和叶片作外植体,茎在MS添加2.0mg.L-16-BA和0.1mg.L-1NAA的固体培养基上,通过12d的诱导,可获得100%的诱导率;叶在MS添加1.0mg.L-16-BA和0.5mg.L-1NAA的固体培养基上诱导13d,可获得100%的诱导率。茎和叶分别在各自激素组合培养基上连续继代3次后,用目视法直接从大量的稳定愈伤组织中筛选获得4种不同次生代谢能力的细胞系:红色系(Stem1愈伤系)、褐色系(Stem2愈伤系)、浅黄色系(Leaf1愈伤系)和白色系(Leaf2愈伤系)。用分光光度法直接筛选出高类黄酮含量的红色系,其类黄酮含量为6.3804mg.g-1,是含量最低的白色系的3.5倍。用改良的CTAB法提取金荞麦高黄酮含量的红色系1～13d愈伤组织总RNA,用SMARTcDNALibraryConstructionKit构建cDNA文库。经测定原始文库滴度为1.5×106pfu.mL-1,扩增总文库滴度为7.0×109pfu.mL-1,重组率达到98%,插入片段在0.5kb到2kb之间,1kb以上的占66%。通过简并扩增的方式,从总文库中检测到了低峰度表达的R2R3Myb转录调控因子P基因的特异片段。各项指标都表明,已获得较高质量的cDNA文库。金荞麦高类黄酮含量愈伤系的获得及其cDNA文库的构建,不但为野生金荞麦的优异基因资源的保存和其类黄酮次生代谢相关基因的克隆和调控研究打下了的基础,也为最终实现药用次生代谢产物的规模化生产奠定了基础。
- 刘光德祝钦泷郭余龙李艳冬罗莉莉眭顺照李名扬
- 关键词：资源植物金荞麦类黄酮CDNA文库
