李永东
- 作品数：6 被引量：54H指数：3
- 供职机构：江苏出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 口蹄疫快速检测方法的建立
- 张常印姜平唐泰山李玉峰王凯民李永东陈国强王先炜姜焱杜以军张敬友杨晓伟柯家法段舒怡
- 建立了口蹄疫通用的口蹄疫病毒实时荧光定量RT-PCR方法、口蹄疫病毒套式RT-PCR方法、O型口蹄疫病毒RT-PCR方法、单抗竞争ELISA方法。所建立的检测方法适用于目前我国出入境检疫实验室，建立的检测方法准确、灵敏，...
- 关键词：
- 关键词：口蹄疫RT-PCR方法口蹄疫病毒
- 口蹄疫病毒实时RT-PCR检测方法的建立被引量：16
- 2006年
- 目的用TaqMan技术建立了一种实时RT-PCR的方法,用于检测口蹄疫病毒,并优选出最佳检测样品。方法设计合成一套引物和TaqMan探针,通过反应条件的优化,建立实时RT-PCR的方法,以扩增口蹄疫病毒的3D基因,并用该法检测患病仔猪的气管、前肢肌肉、皮肤、舌、颈浅淋巴结、脾脏、喉头、食管、腹股沟淋巴结、肺脏、扁桃体、肝脏、肾脏、胸肌、心脏、鼻黏膜、后肢肌肉、脑、骨髓、软腭和血清等样品。结果(1)该方法检测FMDV下限为0.01TCID50,其敏感性比普通RT-PCR高100倍,并具有较好的特异性和重复性,(2)FMDV感染仔猪血清、淋巴结、扁桃体和肝脏中病毒含量较高是检测口蹄疫病毒很好的样品。结论建立了一种实时RT-PCR检测口蹄疫病毒的方法。
- 李永东张常印姜平唐泰山杨晓伟杜以军
- 关键词：口蹄疫病毒TAQMAN实时RT-PCR
- 猪口蹄疫病毒多抗原表位重组腺病毒的构建与鉴定
- 本研究设计构建了含有猪O型口蹄疫病毒VP1(21-60)-(141-160)-(200-213)位氨基酸的基因的重组腺病毒质粒pAd-VP,经PacI酶切后转染HEK-293A细胞,3次噬斑纯化获得了重组腺病毒rAd-V...
- 杜以军姜平杨晓玮汤景元李玉峰李永东
- 关键词：口蹄疫病毒重组腺病毒表位
- 猪口蹄疫病毒多抗原表位重组腺病毒的构建与鉴定
- 本研究设计构建了含有猪O型口蹄疫病毒VP1(21-60)-(141-160)-(200-213)位氨基酸的基因的重组腺病毒质粒pAd-VP,经PacI酶切后转染HEK-293A细胞,3次噬斑纯化获得了重组腺病毒rAd-V...
- 杜以军姜平杨晓玮汤景元李玉峰李永东
- 关键词：口蹄疫病毒重组腺病毒表位
- 文献传递
- 猪口蹄疫病毒多抗原表位重组腺病毒的构建与鉴定被引量：4
- 2005年
- 本研究设计构建了含有猪O型口蹄疫病毒VP1(21-60)-(141-160)-(200-213)位氨基酸的基因的重组腺病毒质粒pAd-VP,经PacI酶切后转染HEK-293A细胞,3次噬斑纯化获得了重组腺病毒rAd-VP。该重组腺病毒于HEK-293A细胞连续传代至20代效价稳定,TCID50为10-10/mL。RT-PCR检测证明目的基因在mRNA水平上可有效表达;应用O型口蹄疫病毒标准阳性血清进行间接荧光抗体试验,在rAd-VP感染的HEK-293A细胞的胞质可见清晰荧光。证明该重组腺病毒对VP1(21-60)-(141-160)-(200-213)位氨基酸的基因进行了成功的表达,从而为FMDV多抗原表位腺病毒活载体疫苗的研究奠定了基础。
- 杜以军姜平杨晓玮汤景元李玉峰李永东
- 关键词：口蹄疫病毒重组腺病毒表位
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒实时PCR检测方法的建立被引量：34
- 2005年
- 设计合成了一套引物和TaqMan探针,以扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒的核衣壳蛋白基因,通过反应条件的优化,在国内首次建立了快速定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的实时PCR方法,并用该法检测患病猪的肺脏等样品。结果表明该方法具有较好的特异性和重复性,对PRRSV细胞培养物的检测下限为0.01TCID50,敏感性比常规RT-PCR高100倍;对10份PRRS疑似猪肺脏样品检测5份为阳性,与病毒分离的阳性符合率为100%。该方法具有快速、灵敏、准确、低污染等优点,在PRRSV的早期检测、预防控制、进出口检疫及基础研究中会起到重要作用。
- 黄娟姜平张常印唐泰山李永东张治涛
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒TAQMAN实时PCR
