李建丽
- 作品数:75 被引量:128H指数:6
- 供职机构:河南农业大学更多>>
- 发文基金:河北省农业科技成果转化资金项目国家科技支撑计划湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 一株肾型鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定
- 南省某肉鸡养殖场疑似传染性支气管炎的发病鸡群中分离到1株病毒,并进行了鸡胚矮小化试验、新城疫病毒增殖干扰试验、动物回归试验、血凝性测定及RT-PCR鉴定等,结果表明,该病毒在SPF鸡胚上盲传三代(F3)即出现侏儒胚,无血...
- 王和平张桂红王延树邹立宏李建丽尤永君杨保收
- 文献传递
- 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法和应用
- 本发明提供一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法和应用,属于生物工程技术领域;所述猪肺炎支原体培养基由基础培养基和辅助培养基组成,主要由MEM、牛肉浸粉、酵母浸出粉、水解乳蛋白、胃黏液素、精氨酸溶液、猪血清和鸡血清等成分组成...
- 高晓磊张德宝刘涛朱秀同郁宏伟杨保收梁武柳珊李建丽
- 文献传递
- 非结构蛋白NS1-ELISA检测禽流感野毒感染抗体
- 利用 RT-PCR 技术扩增获得了 H5N2亚型禽流感病毒的 NS1基因,ORF 长度为678 bp。并成功构建了重组表达载体 pET-NS1,将其转化 BL(DE),用终浓度1 mmol/L 的 IPTG 诱导表达5h...
- 王泽霖李建丽陈少渠柴丽娜
- 关键词:H5N2亚型RT-PCRNS1基因
- 文献传递
- H9N2亚型禽流感病毒非结构蛋白基因NS1的表达及其单克隆抗体的研制被引量:2
- 2011年
- 利用RT-PCR技术扩增获得了H9N2亚型禽流感病毒的NS1基因,ORF长度为654bp。成功构建了重组表达载体pET-NS1,将其转化BL21,并诱导表达出了相对分子质量大约为28 000的NS1融合蛋白。NS1融合蛋白经His trap Hp Kit柱子纯化,采用缓慢稀释和透析相结合的方法复性H9N2-NS1蛋白,获得纯度较高的NS1蛋白,以纯化的NS1免疫BALB/c小鼠,间接接ELISA方法筛选阳性克隆,对获得的抗H9N2-NS1单克隆抗体(McAbs)进行特异性分析;建立了2株稳定分泌抗H9N2-NS1McAbs的杂交瘤细胞系6B9和6C2;腹水的特异性鉴定结果表明,2株McAbs能特异性的识别H9N2-NS1,而与H5N2亚型AIV、H9N2亚型AIV、NDV、IBV、IBDV、ILTV、EDS76均不发生反应。Western blotting鉴定表明,所获得的单抗只与NSl蛋白条带反应。亚类显示,6B9为IgG1,6C2为IgG2b。结果表明,2株抗H9N2-NS1McAbs的制备对H9N2亚型禽流感病毒检测试剂盒的研制以及该病的防治有重要意义。另外,NSl蛋白单抗的成功研制为进一步研究NSl蛋白的结构、功能与细胞的相互作用机制及AI遗传变异规律奠定了一定的基础。
- 杨霞陈少渠李建丽王川庆王泽霖
- 关键词:H9N2亚型NS1基因单克隆抗体
- 表达鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白的重组嵌合型新城疫病毒La Sota株的构建
- 2024年
- 为构建表达鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白D(gD)的重组新城疫病毒(NDV)La Sota株,本研究将ILTV强毒株gD基因胞外域与NDV F基因信号肽、跨膜域和胞质尾区融合,并插入到含有NDV基因VII型F和HN基因的嵌合型La Sota株感染性cDNA克隆pLa Sota-VIIF/HN的P和M基因之间,将获得的重组感染性克隆pLa Sota-VIIF/HN-gD与辅助质粒pCIneo-NP-P-L共转染BHK-21细胞,拯救出表达gD蛋白的重组嵌合型NDV La Sota株rLaSota-VIIF/HN-gD,并采用血凝试验鉴定正确后,将重组病毒在9日龄SPF鸡胚中连续传至10代,提取10代重组病毒基因组RNA,反转录成c DNA作为模板,以ILTV gD基因插入位点两侧的鉴定引物进行PCR鉴定;采用第10代重组病毒感染BHK-21细胞,以ILTV gD蛋白多克隆抗体作为一抗进行间接免疫荧光试验(IFA);分别对鸡红细胞吸附的重组病毒感染的鸡胚尿囊液上清和从红细胞上解离下来的纯化的重组NDV病毒粒子经western blot鉴定,并对重组病毒对鸡胚的致病性和在鸡胚中的复制动态进行初步研究。PCR结果显示ILTV gD基因能够在重组病毒中稳定存在;IFA和western blot鉴定结果显示,重组病毒能够正确表达ILTV的gD蛋白,而且gD蛋白嵌合表达在重组病毒颗粒上。鸡胚致病性试验和鸡胚中的复制动态试验结果显示,重组病毒保持了La Sota疫苗株的低致病性和良好的复制特性,rLaSota-VIIF/HN-gD的鸡胚平均死亡时间(MDT)为168 h,1日龄雏鸡脑内接种该重组病毒的致病指数(ICPI)为0.20,鸡胚半数感染量(EID_(50))峰值可达10^(-8.66)/100μL。本研究所制备的重组病毒r LaSota-VIIF/HN-gD为研制基因VII型NDV和ILTV的二联活疫苗奠定了基础。
- 田静格徐鸣荷王向东张意航李岩刘俊杰李星雨韩城昊张伯顺卜德新于春梅丛雁方杨盼盼乔麒龙王增李建丽李永涛王白玉赵军
- 关键词:传染性喉气管炎病毒二联活疫苗
- 硫酸头孢喹肟的应用研究
- 2012年
- 头孢喹肟又名头孢喹诺、头孢喹咪,为第四代动物专用头孢菌素,20世纪80年代由德国赫斯特公司首先开发,并于1993年批准上市,近年来国内可独立研发生产,
- 李向超徐兆强李建丽尤永君
- 关键词:头孢喹诺硫酸头孢菌素
- 狂犬病的流行现状及其免疫防控
- 2010年
- 狂犬病(Rabies)又名恐水症,是由弹状病毒科的狂犬病病毒引起的、以侵犯中枢神经系统为主的一种人兽共患传染病,发病后,病死率几乎为100%。野生动物是RABV的主要储存宿主,犬在携带和传播RABV中起主要作用。在发展中国家,特别是我国,95%以上的人狂犬病由带毒犬传染。带毒动物咬伤或破损皮肤被带毒动物舔舐是狂犬病传播的最主要途径。据报道,全世界每年估计因狂犬病导致死亡的人数为4万~7万,
- 朱子洁李建丽王和平李丽华杜朝峰
- 关键词:狂犬病病毒人兽共患传染病免疫中枢神经系统野生动物
- 一种制备狂犬病疫苗的方法
- 一种制备狂犬病疫苗的方法,属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤:a.细胞接种;b.制苗用细胞培养;c.病毒接种;d.病毒培养与收获;e.疫苗制备。本发明对制苗用种毒进行了复壮,加强了病毒繁殖能力;采用激流灌注式生物反应...
- 邱贞娜刘涛郑朝朝郁宏伟柳珊韩佳丽杨保收梁武李建丽
- 文献传递
- 动物用活疫苗耐热保护技术的研发与产业化
- 梁武何平有朱秀同郁宏伟刘涛杨保收李建丽吴雅清柳珊赵玉龙马明韩佳丽邱贞娜邹立宏尤永君
- 课题通过筛选耐热保护剂配方,应用先进的冻干工艺,将动物用活疫苗的保存温度从-15℃以下提升至2-8℃,将保存期延长至3年,且进一步提升产品质量。该技术的应用使得动物用活疫苗在贮运过程中无需冷冻即能保证疫苗质量,解决了贮运...
- 关键词:
- 关键词:冻干工艺动物疫病预防
- 肉鸽新城疫及大肠杆菌混合感染的诊断被引量:1
- 2005年
- 席瑞珍李建丽马仲彬李晶江倩
- 关键词:新城疫肉鸽大肠杆菌养禽业就诊