彭威风 作品数:11 被引量:14 H指数:3 供职机构: 山东省农业科学院 更多>> 发文基金: 教育部科学技术研究重点项目 河南省基础与前沿技术研究计划项目 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
水稻OsRhoGDI2基因RNA干扰载体的构建 2011年 水稻OsRhoGDI2是通过酵母双杂交筛选到的小G蛋白Rho家族成员OsRacD互作蛋白的编码基因,为了研究OsRhoGDI2与OsRacD的相互作用及其在水稻发育中的功能联系,本研究基于序列比对的提示,选择了OsRhoGDI2基因长度为285 bp的特异区段,分别以正向和反向插入中间载体pKANNIBAL中,并亚克隆到受控于CaMV 35S启动子的植物表达载体pART27上,获得了OsRhoGDI2基因的RNA干扰载体,为利用水稻转基因技术鉴定该基因在水稻发育中的功能,以及与OsRacD基因的功能联系奠定基础. 彭威风 梁卫红 李莉关键词:水稻 RNA干扰载体 水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK14的克隆及表达分析 被引量:5 2010年 促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是生物体内信号转导的重要组分,受多种生物及非生物胁迫的刺激活化。利用RT-PCR方法克隆了水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK14的cDNA序列(GenBank登录号为GQ265780)。该序列全长1660bp,包含1个1629bp的开放阅读框,编码蛋白由542个氨基酸组成,包含典型的蛋白激酶结构域及磷酸化位点TDY基序。序列比对和分析显示,OsMPK14基因位于水稻第5染色体上,其编码区由9个外显子和8个内含子组成。采用半定量RT-PCR技术,检测了光照、低温、高盐、干旱和脱落酸对该基因在水稻地上部分和根中表达的影响。结果显示高盐、低温、脱落酸都能上调其表达,而干旱对其表达具有微弱的抑制效应,光照可以降低该基因在水稻地上部分的表达,提高在根中的表达。基因可能在水稻非生物胁迫的应答中具有重要作用,其表达受多种因素调控。 梁卫红 毕佳佳 彭威风 张帆 石宏浩 李莉关键词:水稻 基因克隆 逆境胁迫 光敏色素介导的光信号影响水稻PIF转录因子表达模式分析 彭威风 周晋军 梁卫红 谢先芝关键词:水稻 光敏色素 水稻Rho GDP解离抑制因子OsRhoGDI2基因功能的初步鉴定 水稻OsRhoGDl2基因是通过酵母双杂交筛选获得的水稻Rho家族OsRacD的潜在互作蛋白编码基因,为研究二者在功能上的联系,构建了受控于CaMV35S启动子的与绿色荧光蛋白融合表达的OsRhoGDl2基因和OsRac... 彭威风 李莉 石宏浩 张帆 梁卫红关键词:水稻 亚细胞定位 转基因 文献传递 水稻光敏色素相互作用因子基因OsPIL11的表达模式及其在光信号传导中作用的初步分析 被引量:4 2012年 分析了OsPIL11基因(6个潜在的PIF转录因子之一)的表达模式,结果表明OsPIL11在水稻中的表达具有器官特异性,并且受叶片发育、脱落酸、茉莉酮酸和水杨酸调控。为了进一步分析OsPIL11在植物光信号传导中的作用,构建了OsPIL11基因的过量表达载体,并将其转化至烟草。通过比较转基因和野生型烟草植株幼苗在红光和远红光下的光形态建成特征,发现红光下生长的OsPIL11转基因烟草下胚轴较短、真叶和子叶较大;然而在远红光下,转基因和野生型烟草植株的表型没有差异。这些结果表明,OsPIL11参与红光诱导的幼苗去黄化反应,但是不参与远红光诱导的幼苗去黄化反应。 梁卫红 李莉 彭威风 刘婧 杨慧 谢先芝关键词:水稻 转基因烟草 水稻OsRacD蛋白G15V、T20N点突变对其细胞定位的影响及其与靶蛋白的相互作用 被引量:2 2009年 OsRacD是水稻小GTP结合蛋白Rho家族成员,功能之一是作为"分子开关",通过控制花粉管的延伸生长,参与光敏核不育水稻光周期育性转换过程.为研究该蛋白的作用机制,采用重叠延伸PCR方法,分别在其GTPase结构域中引入G15V、T20N点突变,模拟GTP和GDP结合形式的OsRacD.进一步构建了受控于CaMV35S的与绿色荧光蛋白融合表达的双元植物表达载体;采用农杆菌介导法转化洋葱表皮细胞,在荧光显微镜下观察蛋白在活细胞内定位的特点.结果显示,野生型蛋白在细胞质和细胞膜都有分布,组成型激活的蛋白主要分布在细胞膜上,而失活型蛋白则大都集中到细胞核周围.蛋白相互作用的酵母双杂交体系分析显示,OsRacD及其2个突变体具有不同的靶蛋白结合特性.研究证实,水稻OsRacD蛋白G15V和T20N点突变不仅影响其在活细胞内的定位,而且也影响了与靶蛋白的相互作用.说明处于不同鸟苷酸结合状态的OsRacD具有不同的胞内定位方式,可能通过结合不同的靶蛋白,引发不同的细胞应答事件. 梁卫红 刘肖飞 毕佳佳 吕超慧 彭威风关键词:定点突变 绿色荧光蛋白 蛋白相互作用 水稻OsRhoGDI2蛋白生物信息学分析及亚细胞定位研究 被引量:3 2010年 水稻OsRhoGDI2是通过酵母双杂交筛选到的小G蛋白Rho家族成员OsRacD的互作蛋白的编码基因,为研究OsRhoGDI2和OsRacD的相互作用特点和调控机制,对OsRhoGDI2进行了生物信息学分析和亚细胞定位检测。通过生物信息学方法比较了二者编码蛋白的理化性质、修饰位点和亚细胞定位特点,并进一步构建了受控于CaMV35S启动子的与绿色荧光蛋白融合表达的OsRhoGDI2基因的双元植物表达载体,采用农杆菌介导法转化洋葱表皮细胞,通过荧光显微镜观察了融合蛋白在活细胞内分布特点。OsRhoGDI2和OsRacD具有一些相似的理化特性和翻译后修饰位点,在洋葱表皮细胞中,OsRhoGDI2主要分布在细胞质、细胞膜和细胞核。OsRhoGDI2与OsRacD在蛋白理化特性和胞内分布上存在一定的相关性,OsRhoGDI2蛋白可能在调控OsRacD的胞内分布和活性中发挥重要作用。 彭威风 梁卫红关键词:植物表达载体 亚细胞定位 光敏色素介导的光信号影响水稻PIF转录因子表达模式分析 在拟南芥中的研究表明,PIFs(Phytochrome interacting factors)转录因子在光敏色素介导的光信号传导途径中具有中枢作用。2007年Nakamura等人通过分析水稻基因组数据库发现水稻基因组中... 彭威风 周晋军 梁卫红 谢先芝关键词:水稻 光敏色素 水稻OsRhoGDI2蛋白生物信息学分析及亚细胞定位研究 水稻OsRhoGDI2基因是通过酵母双杂交筛选到的小G蛋白Rho家族成员OsRacD的互作蛋白的编码基因,为研究OsRhoGDI2和OsRacD的相互作用特点和调控机制,本研究对OsRhoGDI2进行了生物信息学分析和亚... 彭威风 梁卫红关键词:植物表达载体 亚细胞定位 文献传递 水稻Rho GDP解离抑制因子OsRhoGDI2基因功能的初步鉴定 水稻OsRhoGDI2基因是通过酵母双杂交筛选获得的水稻Rho家族OsRacD的潜在互作蛋白编码基因,为研究二者在功能上的联系,构建了受控于CaMV35S启动子的与绿色荧光蛋白融合表达的OsRhoGDI2基因和OsRac... 彭威风 李莉 石宏浩 张帆 梁卫红关键词:水稻 亚细胞定位 转基因