张飞伟
- 作品数：19 被引量：69H指数：5
- 供职机构：成都生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 盐生杜氏藻锰超氧化物歧化酶(MnSOD)在大肠杆菌中的功能鉴定被引量：14
- 2007年
- 将极端耐盐的盐生杜氏藻(Dunaliella salina)的锰超氧化物歧化酶(DsMnSOD)基因克隆到表达载体pET32a中,并转入SOD缺陷型大肠杆菌菌株K12(SOD-)中,诱导重组蛋白表达,在耐盐、抗辐射和抗寒方面对其功能进行验证.结果显示,导入外源DsMnSOD基因的工程菌,在有氧条件下受到各种胁迫时,生长状况明显优于原菌,其耐受NaCl浓度从8%提高到10%,耐受紫外线(295 nm,83μW/cm2)照射时间从45 s提高到65 s,4℃培养的存活率从10.7%提高19.0%,且SOD的酶活表达依赖于Mn2+的存在.
- 邓婷婷李静马根王晓林赵向丽张飞伟乔代蓉曹毅
- 关键词：盐生杜氏藻锰超氧化物歧化酶
- 大肠杆菌植酸酶的原核表达及酶学性质被引量：6
- 2009年
- 将大肠杆菌植酸酶appA基因重组于表达载体pET32a中,导入大肠杆菌Origami(DE3)构建工程菌Origami(DE3)-pET32a-appA.对表达的appA重组植酸酶经Ni柱亲和纯化、SDS-PAGE分析表明,纯化后条带单一,酶的纯度较高.对其酶学性质的研究表明,该酶反应的比活力为3.36×106U/mg;最适pH为4.5;最适温度为60℃;在80℃和85℃的耐干热能力超过耐湿热能力;在37℃下,Mg2+﹑Ca2+﹑Mn2+对酶活性有促进作用,Co2+﹑Cu2+﹑K+对酶活性有不同程度的抑制作用,而Fe3+和Zn2+对酶活性有强烈的抑制作用;此外,该酶还具有非常好的抗胃蛋白酶水解的能力和部分抗胰蛋白酶水解的能力.
- 黄敏徐辉曹瑜朱俊张飞伟尤芳芳乔代蓉曹毅
- 关键词：原核表达酶学性质
- 超滤在氢氧化铝佐剂制备中的可行性研究
- 2024年
- 目的研究氨水法制备氢氧化铝佐剂工艺中使用超滤替代透析工艺去除NH4+的可行性。方法取氨水法制备的氢氧化铝胶体溶液稀释并超滤至氨质量浓度低于0.04%, 浓缩定量至起始体积;另取等体积氢氧化铝胶体溶液, 透析至氨质量浓度低于0.04%。超滤或透析后, 收集氢氧化铝胶体溶液进行高压蒸汽灭菌。依据中国药典2020年版三部及《预防用含铝佐剂疫苗技术指导原则》对2种工艺制备的佐剂进行外观、pH、铝含量、吸附率、沉降率、等电点、粒径大小及分布、X-射线衍射等质量指标检测。结果超滤工艺制备的3批佐剂pH为4.63±0.04、铝含量为(4.963±0.027) mg/ml、平均粒径为(123.2±7.3) nm、粒径分布为40~500 nm、等电点为10.9±0.1、回收率为91.4%±0.5%;透析工艺制备的3批佐剂pH为4.86±0.25、铝含量为(4.959±0.340)mg/ml、平均粒径为(120.6±6.2) nm、粒径分布为40~500 nm、等电点为10.9±0.4、回收率为91.5%±2.5%。2种工艺制备的氢氧化铝佐剂质量指标差异无统计学意义(t值为-1.58~0.46, P值为0.251~0.918)。结论相较于透析工艺, 采用超滤工艺制备的氢氧化铝佐剂所有质量指标未改变, 且质量一致性更好。
- 杨希飞胡高翔周阳黄攀张雄张飞伟
- 关键词：超滤
- 疫苗制品中抑菌剂去除研究进展被引量：2
- 2022年
- 本文依托国家药典委员会药品标准制修订研究课题(2020S03),对中国药典已收载添加抑菌剂的单剂量液体疫苗去除抑菌剂的可行性开展了研究,根据研究结果评估去除抑菌剂的风险效益,为《中国药典》修订提供技术支持。
- 朱德武瞿明霞闫亚楠姜崴李景良付博张飞伟杨勇张锐王晓娟孟丽杨汇川吴永林潘海龙
- 关键词：抑菌剂硫柳汞苯酚单剂量疫苗
- 一种氢氧化铝佐剂的制备方法
- 本发明公开了一种氢氧化铝佐剂的制备方法，它包括以喷雾状向三氯化铝溶液中加入氨水至溶液pH值为6.4‑6.8。本发明制备氢氧化铝佐剂的方法中，通过使氨水成喷雾状加入三氯化铝溶液，氨水与三氯化铝反应更加均匀，形成的非羟基氧化...
- 张飞伟刘少祥杨希飞胡高翔张华杨勇
- 文献传递
- 喷雾式添加氨水对氢氧化铝佐剂质量一致性的影响被引量：1
- 2022年
- 目的通过喷雾式添加氨水制备氢氧化铝佐剂,分析其对佐剂质量批间一致性的影响。方法分别以喷雾和流加方式添加氨水至三氯化铝溶液各制备3批氢氧化铝佐剂,比较两种氨水添加工艺制备的佐剂粒径、pH、外观等质量指标。结果喷雾方式添加氨水制备的3批佐剂平均粒径为(96.7±8.6)nm,pH为4.93±0.02,透析后沉淀量为(20.9±0.4)g/L;流加方式添加氨水制备的3批佐剂平均粒径为(161.0±24.7)nm,pH为4.85±0.06,透析后沉淀量为(105.6±13.8)g/L。相较于流加,以喷雾式添加氨水制备的3批佐剂为均一的乳白色悬液,粒径更小,透析后透析袋底部大颗粒沉淀明显减少,批间一致性更好。结论采用喷雾方式将氨水加入三氯化铝溶液中,可使氨水与三氯化铝溶液接触更加充分,产物更加均匀,有助于提高氢氧化铝佐剂外观、粒径、pH等质量指标的批间一致性。
- 杨希飞刘少祥胡高翔周阳黄攀张华张莉杨坤张飞伟
- 关键词：粒径PH
- 不同胁迫下盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶基因表达及其与甘油合成的响应被引量：8
- 2007年
- 在已克隆的盐藻(Dunaliella salina)3-磷酸甘油脱氢酶GPD基因的基础上,利用实时荧光定量PCR的方法,研究了经高盐、厌氧、磷酸盐以及氧化等不同外界胁迫条件下该基因的表达情况,并同时监测了盐藻细胞甘油合成的动态变化.对比酿酒酵母的GPD基因,发现D.salina GPD基因受高渗诱导,同时D.salina细胞内可能存在多个形式的GPD基因.
- 孙晓菲黄非梁雪张飞伟杨旺桂白林含乔代蓉曹毅
- 关键词：盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶荧光定量PCR甘油合成
- 利用玉米芯水解液发酵生产木糖醇的研究被引量：13
- 2008年
- 以玉米芯为材料,分别从压强、温度、酸浓度以及水解时间几个方面对玉米芯的水解条件进行了研究,确定低压、120℃、水解时间为2 h作为玉米芯半纤维素的水解条件;同时研究了利用玉米芯水解液发酵生产木糖醇的条件,结果表明热带假丝酵母(Candida tropicalis)的最优发酵条件为:初始pH 7.5,装液量70%,接种量10%,发酵温度28℃.
- 张飞伟苏艳秋黄敏郑红波吴鹏黎娅乔代蓉
- 关键词：木糖醇木糖发酵
- 一种白喉类毒素的制备方法
- 本发明公开了一种白喉类毒素的制备方法，它包括如下步骤：(1)取白喉杆菌培养液，加入硫酸铵至硫酸铵的终浓度为20～24％(w/v)，离心，去除沉淀，澄清过滤；(2)加入硫酸铵至硫酸铵的终浓度为21～25％(w/v)，离心，...
- 秦敏张飞伟张华唐朝晖吴永超顾洁耿其秀
- 文献传递
- 发酵罐酸洗钝化对百日咳杆菌生长和产毒的影响
- 2020年
- 目的:探讨发酵罐酸洗钝化对百日咳杆菌生长和产毒的影响。方法:定期对百日咳发酵罐进行酸洗钝化处理,去除其表面附着的代谢螯合物。通过检测后续培养收获物菌浓度(550 nm吸光度值)、一次盐析沉淀量、发酵产物中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)和丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)含量,比较分析酸洗钝化对发酵培养和产毒的影响。结果:对处理前后各连续10批相关指标进行比较,处理后菌体550 nm吸光度均值由4.663提高至5.490,一次盐析沉淀量均值由4.84 g/L提高至5.90 g/L,PT平均含量达到3.3μg/ml,FHA平均含量达到7.6μg/ml,处理前后各连续10批菌体浓度和一次盐析沉淀量数据采用t检验计算出P值分别为0.03和0.05,差异均有统计学意义。结论:定期对发酵罐进行酸洗钝化可有效改善百日咳杆菌发酵及产毒水平。
- 杨坤杨勇吴永超张飞伟闵宪捷杨希飞雍雪飞刘少祥潘海龙
- 关键词：百日咳发酵钝化
