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临床分离菌株ICR小鼠血流感染模型的建立被引量：10: 2014年; 目的建立革兰阴性菌和革兰阳性菌ICR小鼠血流感染模型,为寻找能在疾病早期鉴别不同病原菌所致血流感染的炎症指标等研究提供有效可靠的实验模型。方法收集临床分离的大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌菌株,将不同浓度的细菌悬液通过尾静脉注射入ICR小鼠体内,按Reed-Muench方法计算半数致死量LD50,并根据1/2LD50浓度的菌液建立小鼠感染模型,通过进行小鼠血液白细胞(WBC)计数和C-反应蛋白(CRP)检测,肝和肺的病理改变观察,验证造模结果。结果大肠埃希菌的LD50为1.77×109 CFU/ml,金黄色葡萄球菌为4.21×108 CFU/ml;运用1/2LD50的菌液浓度感染后6h,大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌感染小鼠血浆CRP即明显升高,分别为(263.3±28.7)、(499.1±32.6)ng/ml;感染后12h,各组小鼠的WBC明显升高;感染12h即可观察到肝和肺的炎症细胞浸润,至感染48h肺泡腔可见大量渗出液,肝脏可见明显坏死灶。结论成功建立小鼠血流感染模型,为血流感染的早期诊断和不同病原菌感染的鉴别诊断等研究提供了可靠的动物模型。; 谢尹晶段晋燕张洪瑞王娜刘一凡吴小利唐红卫王成彬; 关键词：血流感染动物模型

支气管上皮细胞、中性粒细胞联合培养与细胞表面黏附分子产生的炎症通路研究被引量：1: 2014年; 目的探讨支气管上皮细胞(BEAS-2B细胞)与中性粒细胞联合培养时细胞间黏附分子1(ICAM-1)、ICAM-3、血管细胞黏附因子1(VCAM-1)等细胞表面黏附分子的产生机制。方法免疫磁珠法提取外周血中性粒细胞,建立中性粒细胞与BEAS-2B细胞联合培养体系。流式细胞仪(FCM)检测BEAS-2B细胞和中性粒细胞中ICAM-1、ICAM-3、VCAM-1的表达量,蛋白质印迹检测细胞内NK-κB及p38-MAPK的表达。结果 BEAS-2B细胞和中性粒细胞联合培养时,BEAS-2B细胞表面黏附分子ICAM-1、ICAM-3、VCAM-1的表达量均较单独培养时明显增高(P<0.05),加入抑制剂(MG-132、SB203580)表达量均明显下降(P<0.05);两种抑制剂对BEAS-2B细胞VCAM-1、ICAM-3表达作用比较差异无统计学意义(P>0.05);而MG-132对ICAM-1表达的抑制作用比SB203580强(P<0.05),且在调控ICAM-1表达上两种抑制剂有协同作用。蛋白质印迹显示联合培养组BEAS-2B细胞内Phospho-IκBα及Phospho-p38-MAPK蛋白水平明显增高(P<0.05)。结论 BEAS-2B细胞与中性粒细胞联合培养可激活BEAS-2B细胞体内NF-κB及p38-MAPK通路,与ICAM-1、ICAM-3、VCAM-1的表达相关。; 唐红卫韩铭向代军刘一凡张洪瑞吴小利谢尹晶李绵洋王成彬; 关键词：中性粒细胞细胞表面黏附分子炎症通路

黑火药烟雾致吸入性肺损伤大鼠模型的建立与评价被引量：8: 2013年; 目的构建黑火药烟雾所致吸入性肺损伤大鼠模型并对其进行评价。方法分析黑火药烟雾成分,建立吸入性肺损伤大鼠模型。42只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组和建模后1、2、6、24、48、96h组(n=6),检测各组大鼠动脉血气的变化,测定肺湿/干比(W/D)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数及蛋白含量,并取肺组织行大体及镜下病理组织学观察。结果黑火药烟雾成分主要为CO2和CO,且12min内浓度稳定。大鼠吸入烟雾后表现为低氧血症,COHb于吸入后1h达峰值(P<0.05),W/D于2h达峰值(P<0.05),吸入后24h内BALF白细胞数呈进行性增加(P<0.05),蛋白含量显著增高(P<0.05)。病理观察可见肺组织出血、水肿及炎性细胞浸润,呈急性肺损伤表现,至吸入后96h仍未恢复。结论通过黑火药烟雾暴露可成功建立大鼠吸入性肺损伤模型,且具有易复制、稳定、可靠的优点,可用于战场环境下吸入性肺损伤的实验研究。; 刘一凡唐红卫吴小利谢尹晶张洪瑞段晋燕向代军兰晓梅李绵洋王成彬李登清; 关键词：黑火药烟雾吸入损伤

氯吡格雷治疗下CYP2C19与P2Y热点突变致血小板高反应性的效应研究被引量：7: 2014年; 目的研究氯吡格雷治疗患者CYP2C19和P2Y热点突变导致血小板因药物耐受而出现高反应性的效应关系,探索检出突变相关功能改变的临床适用方法.方法病例对照研究.选取104例接受抗血小板治疗且冠状动脉介入术前服用负荷剂量（300 mg/d）氯吡格雷的冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）患者,在术后12 ～24 h内测定血小板功能,通过血栓弹力图（TEG）检测血小板抑制率,通过流式细胞术检测CD62p和血管扩张刺激磷蛋白（VASP）;焦磷酸测序法测定中国人群药物代谢酶热点突变CYP2C19＊2（681G＞ A）、CYP2C19＊3 （636G＞ A）和血小板膜糖蛋白受体基因P2Y1 （893C ＞T）、P2Y12 （52G＞ T）4个位点基因多态性.以CYP2C19分型结果为依据分为野生组（＊1/＊ 1）、杂合突变组（＊2/＊1）、纯合突变组（＊2/＊2）,结合其他3个位点突变情况,分析各组氯吡格雷作用下的血小板功能差异.应用单因素方差分析进行不同基因型组间比较,两组间比较选用t检验及非参数检验进行统计学分析.结果野生组血小板反应指数（PRI）为（35.75±23.11）％,杂合突变组为（48.77 ±24.22）％,纯合突变组为（66.73±15.74）％,差异有统计学意义（F=9.170,P＜0.05）;野生组CD62p水平为（9.38±11.16）％,杂合组为（9.45±8.91）％,纯合突变组为（10.87±8.31）％,差异无统计学意义（F=0.087,P＞0.05）;37例受试个体中未检出P2Y1（893C＞ T）位点突变,检出1例P2Y12（52G＞ T）位点突变.结论 CYP2C19＊2突变与氯吡格雷疗效降低密切相关,VASP检测的血小板反应指数可有效反映其改变.; 吴小利李健向代军刘一凡张洪瑞谢尹晶唐红卫徐菡邸平王成彬; 关键词：噻氯匹定微丝蛋白质类磷蛋白类细胞黏附分子

PL-11血小板聚集仪检测全血血小板聚集功能方法学评价及临床意义被引量：3: 2013年; 目的评价PLT-11血小板聚集仪电阻抗原理检测全血血小板聚集功能这一新方法的性能及临床价值。方法①参照美国临床和实验室标准协会,(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)相关文件,测试PL-11血小板聚集分析仪的日间、批内、批间的不精密度,准确性,携带污染率及线性性能。②选取2012年8月至2013年2月到解放军总医院就诊的患者100例,同时采用PL-11电阻抗法和临床比较公认的光学比浊法(light transmittance aggregometry,LTA)检测血小板聚集功能,对两种方法进行相关性分析;分析添加诱聚剂前两次检测的PLT的重复性,用散点图、相关系数表示。结果①PL-11电阻抗法和LTA法检测血小板聚集率相关性良好,r=0.62,P<0.01;②2个时间点的重复性较好,PLT(r=0.95,P<0.01);③各项检测的结果都符合CLIA’88的要求,其中检测的高值、低值质控品的PLT、RBC、MCV、MPV的日间、批内、批间不精密度的CV<5%,高值、低值的总变异系数(coefficient of varible,CV)分别为PLT(3.00&1.68),RBC(1.63&2.16),MCV(1.30&0.75),MPV(1.40&1.46);RBC、PLT的携带污染率分别为1.16%,1.02%,均<1.5%;PLT在40~800×109/L、RBC在0.3~6.0×1012/L的线性良好,r均>0.995;准确性实验,四大参数偏倚符合文件要求。结论 PL-11血小板聚集仪电阻抗原理检测全血血小板聚集功能的性能良好,是一种准确、可靠的检测血小板聚集功能的新方法。该仪器具有自动化程度高、操作简便、人为影响因素小等优点。; 吴小利李健向代军刘一凡张洪瑞谢尹晶唐红卫徐菡邸平王成彬; 关键词：血小板聚集功能 PLT

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白鉴别革兰阳性菌与革兰阴性菌感染的实验研究被引量：3: 2015年; 目的通过建立全身感染性疾病小鼠模型,探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在鉴别诊断革兰阳性菌感染和革兰阴性菌感染方面的价值。方法选择216只ICR小鼠,每组8只,通过尾静脉分别注射金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌,建立革兰阳性菌和革兰阴性菌所致的小鼠全身感染模型,分别在感染后1、3、6、12h及1、2、3、5、7d处死各组小鼠,检测其血清NGAL浓度。结果金黄色葡萄球菌感染组的小鼠NGAL浓度在感染后3h明显升高,为(926.84±245.76)ng/ml,大肠埃希菌感染组的小鼠NGAL浓度在感染后1h明显升高,为(554.34±47.63)ng/ml;ROC曲线分析显示,金黄色葡萄球菌感染组和大肠埃希菌感染组NGAL的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.908、0.979,两者差异无统计学意义。结论 NGAL在感染早期即明显升高,但其变化在金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌引发的小鼠感染模型之间并无差异。; 谢尹晶段晋燕张洪瑞刘一凡吴小利唐红卫杨继勇罗燕萍王成彬; 关键词：中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白革兰阳性菌革兰阴性菌

胶乳增强免疫比浊法测定血浆和尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的方法学评价被引量：7: 2013年; 目的对胶乳增强免疫比浊法测定血浆和尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）进行方法学评价.方法按照美国临床和实验室标准协会（Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI）评价方案和相关文件的要求进行验证性研究,对胶乳增强免疫比浊法的不精密度、检测限、线性范围、正确度和抗干扰性等进行评价.同时,测定20例急性肾损伤患者（AKI）、166例慢性肾病患者（CKD）以及100名健康对照者血浆和尿液中NGAL水平.结果胶乳增强免疫比浊法测得NGAL低值和高值的重复性估计值为1.90％（低值）和1.22％（高值）,实验室内不精密度为4.06％（低值）和2.57％（高值）;空白限（limit of blank,LoB）为3.1μg/L,血浆NGAL（sNGAL）和尿液NGAL（uNGAL）的检出限（limit of detection,LoD）分别为12.5和21 μg/L.用胶乳增强免疫比浊法测定血浆和尿液NGAL在25～ 4250 μg/L的线性良好;sNGAL和uNGAL平均回收率分别为98.89％、98.28％（低值）和102.61％、95.44％（高值）;与国外同类试剂盒相比,测定结果基本一致.血红蛋白≤7 g/L,胆红素≤0.6 g/L,维生素C≤0.6 g/L,肝素钠≤5g/L,内脂≤1％时,对sNGAL测定结果无显著性干扰,血红蛋白≤10 g/L,胆红素≤0.6 g/L,维生素C≤0.6 g/L,uNGAL测定结果在可接受范围内.AKI组、CKD组血浆和尿液NGAL水平与健康对照组比较差异均有统计学意义;AKI组较CKD组显著升高.sNGAL、uNGAL的水平均与肾小球滤过率估算值（eGFR）呈负相关（r=-0.758、-0.692,P均＜0.01）.结论胶乳增强免疫比浊法测定血浆和尿液NGAL的不精密度符合要求,线性范围宽,具有自动化程度高、检测速度快等优点.; 张洪瑞向代军白洁王宇马骏龙谢尹晶吴小利刘一凡唐红卫李绵洋王成彬高基民; 关键词：急相蛋白质类胶乳增强免疫比浊法

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白鉴别革兰阳性菌和革兰阴性菌感染的动物实验研究: ：通过建立全身感染性疾病小鼠模型,探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)在鉴别诊断革兰阳性菌感染和革兰阴性菌感染方面的价值....; 谢尹晶段晋燕张洪瑞刘一凡吴小利唐红卫杨继勇罗燕萍王成彬; 关键词：革兰阳性菌感染革兰阴性菌感染

血清胱抑素C与β_2微球蛋白在慢性肾病新分期中的检测与意义被引量：6: 2014年; 目的探讨血清胱抑素C(Cys C)与β2微球蛋白(β2-MG)在慢性肾脏疾病(CKD)患者新分期中的临床诊断意义。方法选择解放军总医院2011年12月至2013年1月肾内科219例住院患者为研究对象,检测患者Cys C、β2-MG和其他肾功能指标,采用MDRD公式计算肾小球滤过率(eGFR)。分析Cys C、β2-MG与其他检测项目的相关性。结果 CKD不同分期患者Cys C和β2-MG指标差异有统计学意义(P<0.05)。随着eGFR下降,Cys C和β2-MG在CKD新分期中呈明显升高趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。Cys C和β2-MG与肌酐、尿素氮有较好的相关性。结论 Cys C、β2-MG是用于评价CKD患者肾功能较好的实验室指标。; 向代军张洪瑞白洁王璐马飞彭文红马骏龙王成彬; 关键词：血清微球蛋白慢性肾脏疾病

尿α1微球蛋白、β2微球蛋白对2-4期慢性肾病患者的诊断价值: 目的探讨尿α1 微球蛋白、β2 微球蛋白在慢性肾病新分期2-4 期患者中诊断价值.方法对我院2011 年12 月-2013 年5 月肾内科的134 例住院患者和50 例健康体检者的尿α1 微球蛋白、β2 微球蛋白和其...; 向代军张洪瑞白洁王璐马飞彭文红马骏龙王成彬

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张洪瑞

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