- 洋葱AcSCL4的克隆及其功能分析
- 2024年
- 【目的】初步探讨AcSCL4在洋葱成花中的功能,为解析洋葱成花分子调控机制提供理论基础。【方法】以长日生态型洋葱品系SB2为试验材料,根据已有的洋葱转录组数据,通过qRT-PCR筛选目的基因AcSCL4后进行基因克隆,并对其进行生物信息学分析;构建AcSCL4基因的过表达载体pB221-3300-AcSCL4并转化农杆菌,采用花序浸染法浸染拟南芥,并对T_(3)代纯系转基因植株进行表型分析和开花相关基因表达量分析。【结果】洋葱AcSCL4基因CDS长1515 bp,编码504个氨基酸;AcSCL4蛋白N端高度变异,C端有GRAS结构域。聚类分析发现,AcSCL4与石刁柏和棉花的SCL4蛋白亲缘关系较近。与野生型拟南芥相比,AcSCL4过表达植株表现晚花表型。荧光定量PCR结果表明,与野生型拟南芥相比,AcSCL4过表达植株开花调控基因CO和FT的表达量极显著下降。【结论】AcSCL4通过调控CO及FT基因表达来抑制洋葱开花。
- 张旭吴小旭张智慧张智慧秦蕾王勇
- 关键词：洋葱基因克隆
- 表达绿色荧光蛋白的鸭肠炎病毒gE基因转移载体构建
- 2009年
- 本实验利用PCR方法扩增DEVC-KCE株gE基因片段(包含gI基因及其侧翼序列),扩增产物克隆入pGEM-T载体测序后亚克隆至pUC19 EcoRI、SalI位点间,获得pUC-gE。将增强型绿色荧光蛋白表达盒插入pUC-gE BamHI位点,构建转移载体pUC-gE-EGFP。该转移载体有7个单一酶切位点可供外源基因插入,上下游侧翼分别为1.57Kb和1Kb。将转移载体pUC-gE-EGFP转染鸭胚成纤维细胞(DEF),观察到绿色荧光,说明EGFP基因获得有效表达,为开发以鸭肠炎病毒为载体的多价、多联基因工程疫苗提供了物质基础。
- 乌伊罕赵妍刘晓玫张智慧马波王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒绿色荧光蛋白
- 鸭肠炎病毒us2基因转移载体的构建
- 2009年
- 以鸭肠炎病毒(DEV)C-KCE株基因组DNA为模板,PCR扩增得到us2全基因(包含s3、us3部分基因),将扩增产物克隆入pMD18-T载体,EcoRⅠ和HindⅢ双酶切连入pUC19载体,获得质粒pUC-us2。将完整的EGFP表达盒插入us2基因内BamHⅠ位点,得到转移载体质粒pUC-us2-EGFP。脂质体法将转移载体质粒pUC-us2-EGFP转染DEF细胞,观察到绿色荧光,说明EGFP基因获得表达。
- 刘晓玫赵妍乌伊罕张智慧马波王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒
- 鸭肠炎病毒ul27基因编码产物B细胞线性表位优势区的初步鉴定
- 将DEVC-KCE株ul27基因9个片段插入原核表达载体pET-32a后转化宿主菌Rosetta(DE3)PlysS进行诱导表达,纯化后的产物以鸭抗DEV高免血清进行Western blot分析,结果表明UL27-1、U...
- 马波刘峰源张杨刘晓玫乌伊罕赵妍张智慧王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒GB
- 文献传递
- 鸭肠炎病毒糖蛋白B单克隆抗体的制备与鉴定
- 鸭病毒性肠炎（Duck virus enteritis，DVE），又名鸭瘟（Duck plague，DP），是由鸭肠炎病毒（Duck Enteritis Virus，DEV）引起的鸭、鹅及多种雁形目禽类的一种急性、热性、...
- 张智慧
- 关键词：鸭病毒性肠炎鸭肠炎病毒单克隆抗体
- 文献传递
- 鸭肠炎病毒gE基因胞外区的原核表达与抗原性分析
- 2010年
- 乌伊罕赵妍刘晓玫张智慧马波王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒抗原性分析原核表达GE基因胞外区病毒性肠炎
