张拓宇
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:天津大学化工学院更多>>
- 发文基金:唐山市科学技术研究与发展指导计划项目河北省教育厅科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:理学化学工程更多>>
- 渗透剂与人工伴侣耦合辅助苹果酸脱氢酶包含体的复性被引量:1
- 2008年
- 苹果酸脱氢酶不仅是一种重要的糖代谢酶,而且具有较高的经济价值和理论研究价值。为了获得苹果酸脱氢酶包含体的有效体外复性方法,本文将渗透剂(蔗糖,甜菜碱,海藻糖)与人工伴侣体系(CTAB/β-CD)耦合,进行了大肠杆菌苹果酸脱氢酶(eMDH)包含体的体外复性研究。结果发现,人工伴侣与蔗糖或甜菜碱耦合,可明显提高eMDH包含体的复性效果,复性后产物的活性较稀释复性提高了2倍以上;但未发现海藻糖与人工伴侣存在这种耦合作用。同时发现,耦合作用还可降低人工伴侣体系中CTAB与β-CD的最佳配比(从1∶8下降到1∶6),从而可提升人工伴侣体系的总用量,实现较高酶浓度条件下的有效复性。另外,利用渗透剂对蛋白质的热保护作用,实现了在较高温度(15℃)下eMDH包含体的复性。对复性产物结构的初步分析发现,耦合作用可使eMDH分子的α-螺旋及二聚体含量明显增多,因此复性产物的活性也显著提高。
- 张拓宇董海龙董晓燕
- 关键词:复性渗透剂人工伴侣
- 渗透剂与人工伴侣耦合作用辅助苹果酸脱氢酶复性研究
- 苹果酸脱氢酶(Malate dehydrogenase,MDH)是生物体三羧酸循环中的一种关键酶,在药物生产过程中利用其催化特性可实现DL-苹果酸的拆分,从而得到D-苹果酸这种重要的手性碳源,具有较高的经济价值。同时,M...
- 张拓宇
- 关键词:渗透剂
- 文献传递