左石 作品数:39 被引量:79 H指数:5 供职机构: 贵阳医学院附属医院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 贵州省科学技术基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
DNA甲基转移酶在肿瘤形成中的研究进展 被引量:1 2007年 DNA甲基化是基因表达调控中重要的调节方式之一,可通过影响癌基因和抑癌基因的表达以及基因组的稳定性而参与肿瘤形成。DNA甲基化是由DNA甲基转移酶(DNMT)催化发生并维持的,并认为DNMT活性增高是肿瘤细胞具有特征的早期分子改变,因而受到越来越多的学者关注。 左石 邹声泉关键词:DNA甲基化 基因 肿瘤形成过程 反义MBD1基因片段真核表达载体的构建及鉴定 2006年 目的构建反义MBD1基因片段真核表达载体,为研究MBD1基因功能提供工具。方法根据MBD1基因cDNA序列中编码序列,设计PCR引物,在引物5′端分别添加Xba I和Kpn I 酶切位点,将PCR片段反向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆位点上,构建反义MBD1基因片段真核表达载体,并用PCR、酶切法和DNA测序鉴定。结果PCR鉴定得到322 bp特异性条带, 双酶切得到327 bp目的基因片段和5.4 kb载体片段,DNA测序说明插入片段序列是正确的。结论采用基因克隆技术,成功构建了反义MBD1基因片段真核表达载体,为研究MBD1基因在DNA甲基化和肿瘤发生中的功能提供了实验工具。 左石 郭伟 邹声泉关键词:基因表达 质粒 胆管癌的分子生物学特性 被引量:1 2006年 胆管癌是危害人类健康的恶性肿瘤,其发生发展是多因素、多步骤的病理过程,涉及癌基因的激活、抑癌基因的失活、细胞凋亡和细胞周期调控失常等多方面。但作为胆道的恶性肿瘤, 其具有独特的生物学特性,如神经浸润与转移、与肝炎病毒感染有关等。现综述其分子生物学特性,旨在进一步探讨胆管癌的发病机制,提高胆管癌诊治水平。 左石 邹声泉关键词:胆道肿瘤 分子生物学 反义调控DNA甲基转移酶1基因对人胆管癌细胞生长的抑制效应 被引量:1 2007年 目的观察转染反义DNMT1基因真核表达载体对人胆管癌细胞QBC-939生长的影响,初步探讨DNMT1基因在胆管癌发生中的表遗传学机制。方法将构建好的反义DNMT1基因真核表达载体用脂质体介导法转入人胆管癌细胞QBC-939,Western blot检测转染前后DNMT1蛋白的表达变化,MTT法和软琼脂克隆形成试验观察各组细胞的生长增殖能力,流式细胞术观察细胞生长周期及凋亡率的变化。结果(1)Western blot检测证实转染反义基因能使DNMT1蛋白表达水平降低;(2)转染反义DNMT1基因能抑制QBC-939的生长曲线,并使其软琼脂克隆形成率从(38.020±4.120)%减少至(14.860±2.129)%,差异有显著性意义(P=0.000);(3)转染反义DNMT1基因能影响QBC-939的细胞周期,使之阻滞于G1期,细胞凋亡率从(1.63±0.27)%增加到(6.19±0.78)%,差异亦有显著性意义(P=0.000)。结论通过转染反义DNMT1基因真核表达载体,可下调DNMT1在QBC-939细胞中的表达水平,并能抑制胆管癌细胞的生长和增殖,促进凋亡的发生,提示DNMT1可能通过甲基化途径与胆管癌的发生有关。 左石 刘民锋 罗剑 徐立宁 陈勇军 唐启彬 邹声泉关键词:胆管肿瘤 DNA甲基转移酶1 反义RNA DNA甲基化 胆管癌表遗传学研究 表遗传学是指基于非基因序列改变所导致的基因表达水平变化,它决定了基因转录的开关及其表达方式。当人类进入后基因组时代后,尤其是人类表观基因组计划的提出和实施,表遗传学引起了越来越多的学者关注,并逐渐成为阐明基因组功能的关键... 左石关键词:DNA甲基转移酶1 DNA甲基转移酶3B 胆管肿瘤 真核细胞 RASSF1A 暴发性胰腺炎治疗的难点和争议 被引量:4 2011年 暴发性胰腺炎(FAP)是指在起病72 h内的急性胰腺炎,其临床特点是来势异常凶猛,腹痛、腹胀症状非常严重,腹膜刺激征很明显,生命体征无法稳定,很早即出现休克和多器官功能障碍综合征(MODS)。由于FAP的发病机理和病理生理具有特殊性,治疗上存在很多难点,且并发症多及病死率高,因此,近年来备受关注。 孙诚谊 左石关键词:暴发性胰腺炎 反义DNA甲基化酶3b基因片断真核表达载体的构建及鉴定 2005年 目的构建反义DNA甲基化酶3b(DNM T 3b)基因片断真核表达载体,为研究DNM T 3b基因功能提供工具。方法根据DNM T 3b基因cDNA序列中编码序列设计PCR引物,在上下游引物5′端分别添加X baⅠ和K pnⅠ酶切位点,RT-PCR从胆管癌细胞QBC-939中获得485bp的DNA片断;将该片断反向插入真核表达载体pcDNA 3.1(+)的多克隆位点,构建反义DNM T 3b基因片断真核表达载体,并用PCR、酶切法和DNA测序鉴定。结果PCR鉴定得到467bp特异条带,双酶切鉴定得到471bp片断和5.4kb载体片断,DNA测序说明插入片断序列正确。结论本研究构建的反义DNM T 3b基因片断真核表达载体可为进一步研究DNM T 3b基因功能提供实验工具。 左石 罗剑 刘民锋 徐立宁 董泾青 郭伟 邹声泉关键词:DNMT3B 反义技术 DNA甲基化 系统方法在认识重症急性胰腺炎中的作用 2001年 重症急性胰腺炎(SAP)是一种病情凶险病死率极高的急腹症.自1889年Fitz首次全面地描述急性胰腺炎以来,人类历史对本病的临床及研究已逾百年,但有关重症急性胰腺炎的病因、发病机理及治疗等问题尚未完全解决,而传统的医学模式难以适应现时对本病诊治的要求,重症急性胰腺炎的诊治需要更多地关注各器官之间的相互作用,并把系统功能损害作为疾病发展过程中不同阶段的组成部分,系统地加深对重症急性胰腺炎认识. 左石 孙诚谊 胡韵 杨成兰关键词:胰腺炎 p27^(kip1)基因在人胆管癌细胞化疗增敏效应中的作用 被引量:4 2006年 目的探讨外源性p27kip1在人胆管癌细胞系QBC939中高表达对胆管癌细胞化疗敏感性的影响。方法通过携带人p27kip1基因的重组腺病毒载体Ad-p27mt转染人胆管癌细胞系QBC939。经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测p27kip1在胆管癌细胞中的表达;经MTT比色法及流式细胞术检测5-氟尿嘧啶(5-FU)、丝裂霉素(MMC)、环磷酰胺(CTX)对转染p27kip1前后的QBC939细胞生长抑制及凋亡的影响。结果Ad-p27mt转染后5-FU、MMC和CTX对QBC939细胞生长抑制率,分别由转染前的41.89%、45.59%和38.91%显著增加为56.15%、55.65%和51.69%;凋亡率也由13.76%、11.76%和10.46%,明显升高为41.39%、35.94%、34.46%,差异均有显著性意义(均P<0.05)。结论p27kip1在QBC939细胞中高表达,能显著增强胆管癌细胞对化疗药物的敏感性,为基因联合化疗药物治疗胆管癌提供了参考依据。 罗剑 曹治华 刘民锋 左石 董泾青 邹声泉关键词:腺病毒 化疗敏感性 胆管癌 重视胆道肿瘤生物学特性的基础研究 被引量:1 2006年 邹声泉 左石关键词:胆道肿瘤 生物学特性