崔城 作品数:27 被引量:64 H指数:5 供职机构: 中国医科大学基础医学院生理学教研室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省自然科学基金 辽宁省科技厅博士启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
胰岛素在小鼠受精卵早期发育中的作用 被引量:1 2008年 大量研究已经证实生长因子和激素在胚胎早期发育的细胞增殖与分化过程中起着重要的作用.应用定量ELISA,RT-PCR,免疫印迹和免疫荧光的方法检测胰岛素在小鼠受精卵和卵母细胞中的表达和定位.发现胰岛素均匀分布在卵细胞的胞浆中.同时也检测到mTOR(mammalian target of rapamycin)和p70S6K的表达、活性和定位.在小鼠受精卵中mTOR和p70S6K的表达没有明显不同.二者在G1,G2和M期分布在细胞浆,在S期聚集在原核的周围.在不同时期,mTOR的活性是波动的.利用PI3K的特异性抑制剂渥曼青霉素,观察到卵裂率明显减低.当使用mTOR的特异性抑制剂雷帕霉素时,受精卵的第一次有丝分裂延迟.这些结果表明胰岛素存在于小鼠的卵母细胞和受精卵中,并且胰岛素可能通过激活PI3K/PKB/mTOR/S6K的信号传导通路在小鼠的早期胚胎发育中发挥功能作用. 于秉治 张哲 邓欣 徐小燕 冯晨 李延笑 崔城 宿文辉 赵鸿梅 于大海关键词:小鼠 胚胎 胰岛素 MTOR Cdc25B在小鼠受精卵的表达和定位 被引量:4 2007年 为阐明细胞分裂周期(Cdc)25B调控小鼠受精卵发育的机制,利用Western印迹检测小鼠受精卵各时期Cdc25B的表达及Cdc2-Tyr15的磷酸化状态。利用间接免疫荧光技术观察Cdc25B在小鼠受精卵的定位。构建pEGFP-Cdc25B融合表达载体并显微注射到受精卵中,观察Cdc25B在受精卵M期的定位变化。结果表明Cdc25B在G1和S期被磷酸化,在G2和M期去磷酸化。Cdc2-Tyr15在G1和S期处于磷酸化状态,G2期只检测到Cdc2-Tyr15轻微的磷酸化信号,M期未检测到任何Cdc2-Tyr15的磷酸化信号。Cdc25B在G1期定位于细胞质和细胞核中,S和G2期定位于细胞质的皮质部分,M期由细胞质转向核区。证明Cdc25B核输出后激活有丝分裂促进因子,从而启动小鼠受精卵的有丝分裂。 崔城 宿文辉 于秉治关键词:小鼠受精卵 CDC25B MPF 川芎嗪及配方治疗耳部疾病的研究进展 被引量:1 2001年 崔城 汤浩关键词:耳部疾病 药物疗法 川芎嗪 宽频噪音对AD模型大鼠NOS1表达及ABR阈值的影响 2002年 目的 观察衰老与阿尔采默病AD模型大鼠颞叶和颞叶在 96dB宽频噪音暴露下NOS1表达及ABR阈值的影响。方法 采用WesternBlot及图像分析技术 ,结合ABR测定方法。结果 双侧海马CA1 区微量注射谷氨酸前 ,电击后 2 4h有记忆者为 69 6 % ,损伤后仅为 1 4 7% ,两者差别有非常显著性 (P <0 0 1 )。 3组大鼠加量噪音自身前后ABR阈值差值都有显著性差异 (P <0 0 1 )。谷氨酸组在加噪音前ABR阈值与对照组有差异 (P <0 0 5)。谷氨酸组大鼠颞叶、颞叶NOS1表达多于加噪音后的同组鼠 ,有较明显的下调趋势。结论 宽频噪音抑制AD模型大鼠颞叶。 朱启文 汤浩 侯伟健 杨宇 崔城关键词:阿尔采默病 AD 一氧化氮合酶 小鼠受精卵微注射Cdc25b mRNA可提高卵裂率并促进受精卵发育 被引量:3 2008年 为了观察Cdc25B蛋白及PKA/Cdc25B信号途径在小鼠受精卵发育中的作用,将突变型和野生型Cdc25b转录成mRNA,显微注射到小鼠受精卵中,放入含有或不含有dbcAMP的M16中,相差显微镜下观察受精卵卵裂情况;用蛋白激酶活性测定方法检测MPF的活性;利用Western印迹检测Cdc2-Tyr15的磷酸化状态.结果显示,未加dbcAMP的Cdc25b-S321A mRNA注射组与Cdc25b-WT组相比,能够提前使受精卵发生G2/M期转变,导致卵裂,并明显提高卵裂率;MPF的活性测定和Cdc2-Tyr15磷酸化状态的检测结果也显示,Cdc25b-S321A组先于Cdc25b-WT组提前激活MPF.此外,Cdc25b-S321A mRNA注射组可以有效恢复由PKA引起的受精卵G2期阻滞,显著增加卵裂率;MPF的活性测定和Cdc2-Tyr15磷酸化状态的检测结果也显示,在PKA持续激活的情况下,对比于Cdc25b-WT组,Cdc25b-S321A组提前激活MPF.因此,在小鼠受精卵发育过程中PKA主要通过磷酸化Cdc25B的321位丝氨酸,从而调控MPF的激活与失活来控制有丝分裂进程. 崔城 张哲 于秉治关键词:小鼠受精卵 蛋白激酶A 庆大霉素中毒后豚鼠耳蜗毛细胞的再生 被引量:1 2004年 目的 :通过庆大霉素中毒后不同时间豚鼠耳蜗毛细胞变化的观察 ,研究哺乳动物耳蜗毛细胞受损后能否再生。方法 :将 6 0只豚鼠随机分成庆大霉素组和生理盐水对照组。应用扫描电镜 (SEM)技术并结合听脑干反应 (ABR)测试 ,观察耳蜗毛细胞情况和ABR阀值变化。结果 :庆大霉素组耳蜗毛细胞在 30d时ABR阈值有明显恢复 ,但未达到正常水平 ,同时耳蜗第三转有新生的静纤毛出现。结论 :庆大霉素损伤后的毛细胞可以再生。 倪月秋 汤浩 崔城关键词:庆大霉素类 耳蜗 毛细胞 脂质体转染质粒DNA成功导入小鼠受精卵 被引量:1 2010年 目的研究脂质体转染方法将质粒DNA导入小鼠受精卵中的可行性。方法用免疫细胞化学方法在受精卵内检测pAkt(Ser473)蛋白的分布。用脂质体转染的方法将质粒FLAG-PIPP或FLAGvector导入受精卵,再用Western Blot检测两组卵细胞中pAkt(Ser473)的表达量。用荧光显微镜检测GFP-PH/ARNO质粒在卵细胞中的表达同时观察胰岛素对其影响。结果 pAkt(Ser473)抗体成功穿过透明带表达在受精卵内,细胞膜表达最强。与FLAGvector转染的受精卵相比,pAkt(Ser473)在转染FLAG-PIPP质粒的受精卵内表达量明显减少。与PIP3结合的GFP-PH/ARNO绿色荧光以细胞核表达为主,并且胰岛素可以使荧光增强。结论脂质体转染方法可成功地将质粒DNA穿过透明带导入小鼠受精卵内。 邓欣 赵宇 李亘松 朱亚勤 刘莹 宋阳 崔城 于秉治关键词:转染 受精卵 透明带 川芎嗪对庆大霉素耳中毒耳蜗外毛细胞和血管纹的保护作用 被引量:2 2002年 目的 探讨在庆大霉素 (gentamycin ,GM )耳中毒情况下 ,川芎嗪 (tetramethylpyrazine,TMP)对豚鼠耳蜗外毛细胞和血管纹边缘细胞的保护作用。方法 12只豚鼠随机分为GM组、联合用药组、TMP组及对照组 ,用药十天后处死 ,采用透射电镜观察耳蜗外毛细胞及血管纹边缘细胞超微结构 ,扫描电镜观察血管纹边缘细胞表面形态。结果 透射和扫描电镜显示 ,联合用药组外毛细胞及血管纹边缘细胞超微及表面结构破坏均明显轻于庆大霉素组 ,特别是其中的线粒体结构破坏与数目减少更显著轻于庆大霉素组。结论 川芎嗪具有保护庆大霉素耳中毒耳蜗外毛细胞和血管纹结构的作用 。 崔城 汤浩 李煜兴 曲非 张合 王爱梅关键词:血管纹 川芎嗪 毛细胞 耳毒性 14-3-3蛋白在生殖细胞中的作用 被引量:1 2012年 14-3-3蛋白是在所有真核细胞中广泛表达的一类高度保守的酸性蛋白家族,主要通过磷酸化依赖的方式与靶蛋白结合从而发挥其调控作用。到目前为止,我们已经发现14-3-3蛋白能与超过300种蛋白质相互作用,几乎参与细胞的所有重要生理、病理过程。14-3-3蛋白在受精卵和卵母细胞中既与通道蛋白、烟碱乙酰胆碱受体相互作用,又参与信号转导、细胞凋亡和细胞周期的调控并且在精子的发生中发挥重要作用。本文主要对14-3-3蛋白在生殖细胞中的可能功能作一简要介绍。 任秀丽 崔城关键词:酸性蛋白 生殖细胞 蛋白质相互作用 烟碱乙酰胆碱受体 蛋白结合 过磷酸化 Cdc25B蛋白过表达可使小鼠胚胎突破2-细胞期阻滞 被引量:2 2008年 目的:探讨Cdc25B蛋白过表达对小鼠2-细胞期胚胎发育的影响。方法:利用体外转录试剂盒将Cdc25B转录成mRNA,将mRNA显微注射入小鼠2-细胞期胚胎中,观察胚胎发育情况和卵裂率。用蛋白激酶活性测定方法和Western印迹分别检测Cdc25B蛋白过表达小鼠胚胎MPF的活性及Cdc2-Tyr15的磷酸化状态。结果:hCG后48 h,mRNA注射组有超过40%的2-细胞期胚胎分裂到4-细胞期而对照组仍停留在2-细胞期;激酶活性测定显示注射Cdc25B mRNA后,MPF的活性显著升高;Cdc2-Tyr15的磷酸化状态变化与激酶活性测定结果一致。结论:Cdc25B蛋白过表达可以激活有丝分裂促进因子(MPF),从而使小鼠2-细胞期胚胎突破2-细胞期阻滞,发育到4-细胞期。 崔城 汤浩 于秉治关键词:CDC25B MPF