孙承英
- 作品数：11 被引量：102H指数：6
- 供职机构：中华人民共和国农业部更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- 四川资阳猪源猪链球菌病病原的分离与鉴定被引量：15
- 2005年
- 目的四川省部分地区发生的不明原因的猪源人畜共患病病原菌的分离与鉴定。方法采用普通RT-PCR和实时荧光PCR相结合的方法对流感和尼帕病毒的RNA进行检测,在Vero细胞和SPF鸡胚同时进行病毒分离,用血清平板对病料进行细菌分离,同时用革兰染色、生化试验、血清凝集试验和PCR进行鉴定,并对分离到的细菌进行药敏试验。结果排除了流感病毒和尼帕病毒感染的可能性。从病料组织中成功分离到3株链球菌,证实为猪链球菌Ⅱ型。通过对其毒力因子进行鉴定,结果发现溶菌酶释放蛋白(MRP)和细胞外蛋白因子(EF)均为阳性。进一步的药敏试验证实:分离菌株对氨苄青霉素、先锋霉素Ⅵ、羧苄青霉素、复方新诺明、头孢呋肟等抗菌药高度敏感。结论病原为猪链球菌Ⅱ型。
- 刘华雷赵永刚王君玮赵云玲李林郑东霞孙承英王珊刘佩兰宋翠平范伟兴陈义平王志亮
- 关键词：毒力因子溶菌酶释放蛋白
- 甲型流感病毒荧光RT-PCR检测方法的设计和检定被引量：6
- 2005年
- 目的 设计甲型流感病毒TaqMan荧光RT-PCR检测方法并对其进行检定。方法 用DNAStar和PrimerPremier5. 0软件设计甲型流感病毒荧光PCR检测所用引物和探针 ;在GenBank中进行Blast以及电子对比证明其具有高度的特异性和保守性 ;和标准RT-PCR进行比较 ,检测此方法的灵敏度。结果 所设计的引物和探针高度特异和保守 ,灵敏度比标准RT-PCR方法高 3～ 27倍 ,并且反转录和PCR可合并为一步。结论 设计了甲型流感病毒TaqMan检测方法 ;该方法具有特异。
- 陈继明王志亮逄增昌孙承英孙映雪宋翠平弋英
- 关键词：甲型流感病毒荧光PCRRT-PCR方法荧光RT-PCR检测反转录
- 我国新城疫病毒分离株分子生物学特性和基因型的研究被引量：9
- 2004年
- 利用一步法RT -PCR技术成功扩增了 37个新城疫病毒分离株的 (其中 2株属于鸽源病毒 )F基因片段 (约5 0 0bp) ,通过对分离株的测序和基因分型表明 ,2 4株属于基因VII型 ,1株属于基因VI型 ,2株属于基因III型 ,1株属于基因I型 ,6株属于基因II型 ,另外有 3株从氨基酸方面分析是基因VII和VI型的杂交体 ,但从进化树方面 ,分离毒SD0 5 4和SD0 6 9属于基因VI型 ,SD0 5 2属于基因VII型。可以看出 ,我国新城疫的流行是极其复杂的 ,既有老基因型的威胁 ,又有新基因型的不断流行 ,同时发现有
- 孟良玉王志亮魏荣宋翠平孙承英毕道荣郑东霞
- 关键词：新城疫病毒分离株分子生物学基因型新城疫
- 美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：19
- 2007年
- 参照美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M基因序列,设计引物和探针,并建立其荧光RT-PCR检测方法,以检测严重危害我国养猪业的此型PRRSV。该法能检测到1 TCID50的PRRSV。用此法检测猪瘟病毒、乙脑病毒、伪狂犬病毒、马动脉炎病毒、圆环病毒Ⅱ型和MARC145细胞的RNA,结果均为阴性。对126份临床样品进行检测应用,检测结果(7份阳性,119份阴性)与病毒分离完全符合。此法中的阳性对照为体外转录的dsRNA,具有高度的稳定性,解决了此类检测方法所用的RNA阳性对照所普遍存在的易于降解的难题。
- 范忠军柴虹陈继明吴延功孙承英王志亮
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR体外转录DSRNA
- 猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒Ⅱ型混合感染的诊断被引量：4
- 2006年
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)在我国规模化猪场的传播与蔓延愈演愈烈,给养猪企业、尤其是给种猪场带来了难以估算的损失。其病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒,主要引起母猪繁殖障碍和各日龄猪呼吸疾病。
- 王君玮孙承英赵永刚徐伟李开福徐天刚宋芳任炜杰
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征SYNDROME规模化养猪场临床症状病理剖检
- SYBR GreenI模式荧光RT-PCR鉴别新城疫病毒毒力被引量：13
- 2006年
- 方法根据NDV的F蛋白裂解位点附近的序列,设计分别对应于NDV强毒和弱毒的两对引物,然后用SYBRGreenI模式的荧光RT-PCR方法比较两对引物对同一NDV的RNA扩增效率以及扩增产物的Tm值,来区分NDV的毒力。结果对8株NDV进行检测并测定其鸡胚平均致死时间(MDT),荧光RT-PCR方法的检测结果和MDT测定的结果完全一致,说明此荧光RT-PCR法可用于NDV毒力检测。
- 弋英陈继明王志亮孙承英鲍恩东
- 关键词：新城疫病毒SYBR毒力
- 应用PCR检测非洲猪瘟病毒的研究被引量：8
- 2000年
- 采用ＰＣＲ对非洲猪瘟病毒（ＡＳＦＶ）Ｓｐａｉｎ ７０株、Ｍａｌａｗｉ ８３株、Ｍａｌｔａ ７８株、Ｕｇａｎｄａ株的细胞培养毒以及ＡＳＦＶ组织病料和 ２００份田间样品进行检测，结果表明两对引物 Ｐ１＋ Ｐ２和 Ｐ３＋ Ｐ４对 ＡＳＦＶ具有较好的特异性和灵敏性。运用 ＰＣＲ检测 ＡＳ－ＦＶ操作简单、快速，检测结果与ＨＡＤ自动玫瑰花环试验的阳性符合率为１００％，该方法明显优于常规的血清学方法。
- 蒋正军龚振华尹燕博王树双蔡丽娟郭福生陆明哲孙承英宣华
- 关键词：非洲猪瘟病毒PCR
- SYBR Green Ⅰ模式荧光RT-PCR检测新城疫病毒
- 针对新城疫病毒(NDV)F基因保守区内的核苷酸序列设计1对引物,用此对引物和标准NDV毒株(含NDV强毒和弱毒)的RNA为模板,建立并优化SYBRGreenⅠ模式荧光RT-PCRNDV检测方法.待测样品扩增产物的Tm值和...
- 弋英陈继明孙承英鲍恩东王志亮
- 关键词：新城疫病毒荧光RT-PCR检测核苷酸序列
- 文献传递
- 两种一步法RNA提取试剂的比较被引量：4
- 2004年
- RNA的提取在生物医学研究和临床检测上应用广泛。本文分别用进口Invitrogen公司生产的以及我们自己研制的一步法RNA提取试剂,提取大肠杆菌RNA、鸡肌肉组织RNA和尿裳液RNA,通过核酸电泳和荧光定量RT-PCR进行比较。结果表明用我们自己研制的和进口的试剂提取的RNA都不含有DNA;这些RNA都可以作为模板进行RT-PCR检测,并且在数量上相互之间没有明显差异。说明我们自己研制的一步法RNA提取试剂可以取代进口试剂。此外,本文还讨论了此类试剂一些评定方法。
- 孙映雪孙承英赵永刚陈继明宋翠平王志亮
- 关键词：一步法RNA试剂
- 35株不同来源的新城疫病毒(NDV)分离株F-糖蛋白基因序列测定和基因型被引量：27
- 2003年
- 采用病毒分离试验、鸡胚平均死亡时间毒力试验、RT- PCR和 F-糖蛋白基因序列测定及基因分析 ,对 1996～2 0 0 0年从国内不同地区多种禽类中分离到的新城疫病毒 (NDV)分离毒株进行了研究 ,绘制了基因树。毒力试验结果表明 ,其中有 32株为强毒株 ,有 3株为中等毒力株。DNA序列分析和基因树结果表明 ,这 35株 NDV分为 4个类群 ,其中 2 7株为基因 型 (主要流行毒株 ) ,3株为基因 型 ,4株为基因 型 ,1株为基因 型。结果提示 ,我国新城疫感染来源是一个值得关注的问题。
- 尹燕博龚振华孙承英王娟刘俊辉刘键刘煜黄存艳
- 关键词：基因型新城疫病毒毒力试验
