孔留五
- 作品数：27 被引量：90H指数：6
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 应用RT-PCR检测鸭肝炎病毒Ⅰ型感染被引量：10
- 2007年
- 鸭肝炎病毒Ⅰ型（duck hepatitis virus Ⅰ，DHVⅠ）感染是雏鸭的一种急性高度致死性传染病，主要侵害4周龄以内的雏鸭，特别是1周龄以下的雏鸭最易感染，死亡率较高，是危害养鸭业最为严重的传染病之。1945年在美国首次发现，我国于1963年在上海首次报道了该病的临床病例，至今，全国各养鸭地区均有不同程度的发生和流行。目前，已有多种检测DHVI抗原的方法，
- 罗玉均张桂红陈建红张济培潘全会钟植文何逸民孔留五
- 关键词：鸭肝炎病毒PCR检测VIRUS临床病例
- 一株猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒缺失变异株的分离及鉴定
- 根据GenBank中PRRSV EU型和US型的Nsp2序列特点,设计三对RT-PCR引物,对疑似PRRSV感染猪的血液、肺脏和淋巴结进行RT-PCR扩增检测,并对RT-PCR检测为PRRSV阳性的病料进行PRRSV分离...
- 孔留五康艳梅罗玉均何逸民李小康潘全会张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合症变异株
- 文献传递
- 一种Ⅰ型鸭肝炎病毒的分子生物学鉴别方法
- 本发明公开了一种I型鸭肝炎病毒的分子生物学鉴别方法，包括处理待检样品、制取样品的RNA、反转录得到样品的cDNA、荧光定量RT－PCR或巢式PCR法鉴定I型鸭肝炎病毒等步骤。本发明具有诊断快速、灵敏性高、且适用范围广的有...
- 张桂红罗玉均孔留五陈建红徐小芹廖明
- 文献传递
- 两株猪圆环病毒2型ORF2基因的克隆和序列分析被引量：4
- 2007年
- 根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因序列,设计一对引物,从分离的PCV-2GZ株、HN株的细胞培养物中扩增出ORF2基因(702bp)。将此基因片段克隆入pMD18-T载体,筛选获得重组质粒pMD-ORF2,并对其测序。结果表明,所克隆的ORF2基因与其他PCV-2的ORF2基因核苷酸序列同源性在90.6%～99.6%之间,推导的氨基酸序列同源性在88.9%～98.7%之间。
- 何逸民罗玉均潘全会吴翠花曹宗喜孔留五李少方张桂红
- 关键词：圆环病毒2型ORF2
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株RT-PCR鉴别诊断方法的建立被引量：1
- 2009年
- 孔留五何逸民康艳梅罗玉均李小康潘全会李少方吴翠花张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株基因组结构开放阅读框呼吸道症状
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株实时荧光鉴别及定量测定方法
- 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株实时荧光鉴别及定量测定方法，通过处理待检样品，制取样品的RNA，反转录得到样品的cDNA、分别设计引物对样品cDNA进行PCR反应，扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒的非缺失变异株与缺...
- 张桂红孔留五罗玉均何逸民
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立
- 引言:猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)是引起猪断奶后多系统衰竭综合征(post -weaning multisystemic wasting syndrome,PNDNS)的...
- 何逸民邹国秋罗玉均何冉娅秦宏阳孔留五张桂红
- 关键词：敏感性特异性
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株实时荧光定量PCR鉴别诊断方法的建立
- 根据GenBank登录的PRRSV基因序列,利用PRRSV非缺失变异株与缺失变异株NSP2基因序列特点,设计合成两对特异性引物,经RT-PCR扩增后,用T4连接酶将目的片段与pMD18-T载体连接,并转化到大肠杆菌DH-...
- 孔留五康艳梅李小康何选民张桂红
- 文献传递
- 鸡IFN-α，-β，-γ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
- 根据GenBank上鸡α-、β-、γ-干扰素(ChIFN-α,-β,-γ)基因的序列,在保守区设计并合成各自特异引物,并以鸡3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)为内参,采用SYBR Green I染料建立实时荧光定量PCR(...
- 张贺楠赖汉漳齐岩孔留五张小桃曹伟胜廖明
- 关键词：IFN-ΒIFN-Γ实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型ORF2和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5重组杆状病毒疫苗的研究被引量：1
- 2010年
- 参照GenBank上收录的基因组序列自行设计引物,分别扩增猪圆环病毒2型ORF2和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5。将外源基因分别插入经改造的杆状病毒穿梭载体pFVC,获得3种重组质粒pFVC-ORF2、pFVC-ORF5、pFVC-ORF5-ORF2。将重组质粒pFVC-ORF2、pFVC-ORF5、pFVC-ORF5-ORF2分别转入带有杆状病毒骨架的DH10BacTME.coli感受态细胞中。提取高质量的重组质粒rBacmid-ORF2、rBacmid-ORF5、rBacmid-ORF5-ORF2,将重组质粒转染Sf9细胞,获取重组病毒rAc-ORF2、rAc-ORF5、rAc-ORF5-ORF2。通过间接免疫荧光检测证实了外源基因正确表达。重组杆状病毒rAc-ORF2、rAc-ORF5、rAc-ORF5-ORF2对BALB/c小鼠的免疫试验结果显示,rAc-ORF2、rAc-ORF5、rAc-ORF5-ORF2均能够刺激小鼠机体产生免疫应答,产生抗体,并能持续较长时间。
- 张翔峰何逸民曹宗喜孔留五张得玉秦宏阳张桂红
- 关键词：猪圆环病毒2型猪繁殖与呼吸综合征病毒重组杆状病毒
