周世冠
- 作品数:3 被引量:11H指数:2
- 供职机构:中国医科大学更多>>
- 发文基金:辽宁省教育厅基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 量子点标记肺炎支原体重组蛋白抗体检测抗原方法的建立被引量:6
- 2011年
- 目的建立一种用CdSe/ZnS量子点标记技术用于肺炎支原体检测的方法。方法用重组Mp P1蛋白免疫动物制备免疫血清,硫酸铵沉淀法及离子层析法纯化IgG抗体,纯化抗体用CdSe/ZnS量子点标记,离心沉淀法纯化标记产物。用标记抗体检测Mp抗原。结果量子点标记抗体直接玻片荧光法检测Mp抗原具有较高的敏感性(检测灵敏度在0.001μg/mL),且与呼吸道常见病原菌无交叉反应。结论成功建立量子点标记技术检测肺炎支原体抗原方法,具有操作简单、检测快速的优良,适用于Mp感染的早期诊断。
- 曾晶晶何梦博赵芝娜周世冠王桂珍
- 关键词:肺炎支原体抗原检测
- 肺炎支原体多抗原表位表达载体的构建与鉴定
- 前言:
肺炎支原体(MycoplasmaPneumoniae,Mp)是人类原发性非典型肺炎的病原体,其引起感染的治疗与其它细菌和病毒感染的治疗有所不同,因此,Mp感染诊断意义重大。肺炎支原体细胞表面的粘附蛋白及黏附...
- 周世冠
- 关键词:肺炎支原体蛋白抗原基因克隆重组蛋白
- 重组肺炎支原体CARDS毒素蛋白临床检测应用的初步研究被引量:5
- 2015年
- 目的初步探讨肺炎支原体CARDS毒素蛋白在检测肺炎支原体感染中的应用价值。方法 PCR扩增CARDS毒素基因并连接到PMD-19-T载体,经酶切、PCR及核苷酸测序分析后,将CARDS毒素基因片段克隆到pGEX-6p-1表达载体内并转入受体菌。IPTG诱导大肠埃希菌BL21重组株(pGEX-6p-1-CARDS)的表达。GST柱层析纯化重组CARDS毒素蛋白,以该重组蛋白和重组P1蛋白为抗原建立间接ELISA方法,检测85份感染肺炎支原体的血清标本,并与重组P1蛋白的ELISA结果进行比较。结果 CARDS毒素蛋白表达载体构建成功并表达大小为43kDa的重组蛋白,Western blot测定其能与兔抗Mp多价抗血清发生反应。ELISA结果显示,CARDS毒素蛋白的阳性率为70.59%(60/85),重组P1蛋白的阳性率为63.53%(54/85)。结论本研究成功构建了CARDS毒素蛋白表达载体并获得了稳定表达的重组菌株;在诊断肺炎支原体感染的血清学ELISA试验中,重组CARDS毒素蛋白的敏感性高于重组P1蛋白,为Mp感染的诊断提供了新的可用抗原。
- 司文周世冠刘宝山白爽王蒙王桂珍
- 关键词:肺炎支原体ELISA