吴坤陆
- 作品数：5 被引量：38H指数：4
- 供职机构：浙江大学农业与生物技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 表达Cryptogein基因的烟草抗病性和耐盐性增强被引量：8
- 2004年
- 隐地蛋白(cryptogein, Crypt)是由隐地疫霉(Phytophthora cryptogea)分泌的一种分子量约为10 kD的蛋白类激发子. 用农杆菌介导的叶盘转化法获转Crypt (PAL::Crypt)和CryK13V (CaMV35S::CryK13V) 基因的烟草植株. 接种试验结果表明, T2代转基因烟草株系对黑胫病菌(Phytophthora parasitica var nicotiana, Ppn)、赤星病菌(Alternaria alternata)和野火病菌(Pseudomonas syringae pv tabaci)的抗性显著增强. Northern杂交和RT-PCR分析结果表明, 低水平的表达转化基因Crypt和CryK13V就足以激活PR-1a和PR-5等防卫反应相关基因的表达; 在PAL::Crypt转化系统中, 病原菌Ppn能快速和高水平诱导PR-1a等病程相关基因的表达, 表明诱导型PAL启动子对入侵病原菌能及时识别并快速、有效地激活防卫反应, 从而赋予转基因植株抵抗病原菌侵染的能力. 研究还发现, 表达Crypt和CryK13V基因的烟草植株耐盐性比对照明显提高, 转化株系中高水平组成型表达PR基因和转录因子可能与耐盐性增强有一定正相关性. 上述结果表明, 植物对生物和非生物逆境的抗性途径和机制存在着交叉.
- 蒋冬花陈旭君吴坤陆郭泽建
- 关键词：耐盐性抗病性基因工程烟草病原菌
- 水稻WRKY89中的亮氨酸拉链结构增强蛋白与W盒元件的相互作用被引量：8
- 2005年
- WRKY蛋白是一类参与植物生物和非生物胁迫反应、代谢、发育等过程的转录调节因子.水稻WRKY89与其他的WRKY成员同源性较低,推测由263个氨基酸组成,其N端带1个可能的亮氨酸拉链结构.采用pET-29b载体原核表达了OsWRKY89和其3个N端缺失的衍生物,并采用Ni柱的方法对表达的蛋白进行了纯化.凝胶阻滞结果表明,OsWRKY89能与含顺式元件W盒的DNA序列特异结合,而缺失N端亮氨酸拉链的OsWRKY89与该元件的结合能力显著下降.酵母双杂交结果表明,亮氨酸拉链样结构参与OsWRKY89蛋白的同源相互作用.进一步缺失OsWRKY89至部分WRKY结构域导致表达的蛋白完全丧失与上述元件的结合活性,表明WRKY结构域是DNA结合中不可缺少的.这些结果说明亮氨酸拉链结构在蛋白质与蛋白质互作和DNA与蛋白质中起重要作用.
- 王海华郝中娜谢科吴坤陆郭泽建
- 关键词：相互作用增强蛋白水稻转录调节因子胁迫反应顺式元件
- WRKY基因家族的进化及水稻WRKY基因表达谱的研究
- 本文针对水稻WRKY转录因子家族的全基因组进行了分析：以WRKY结构域对水稻基因组(国际水稻基因组计划的粳稻精细图谱的基因组)作序列搜索，对获得的序列进行基因预测。结合cDNA/EST及基因表达等方法验证，通过全基因组分...
- 吴坤陆
- 关键词：WRKY基因系统发生分析进化表达谱
- 稻瘟菌诱导的水稻WRKY基因OsWRKY52的分离和鉴定(英文)被引量：17
- 2005年
- WRKY蛋白参与植物对生物或非生物胁迫反应和一些发育、代谢过程,在植物中组成一个转录因子大家族.从水稻cDNA文库中分离到一个新的WRKY基因——OsWRKY52cDNA,包括一个1719bp的开放读码框,推测编码一个由572个氨基酸组成的蛋白质,与燕麦(Avenasativa)AsWRKY1具有54%的氨基酸一致性.该基因被非亲和性稻瘟菌快速诱导.凝胶阻滞实验结果表明,原核表达的OsWRKY52能与水稻PR1a启动子上的W盒元件特异结合.采用酵母单杂交体系的方法证明了OsWRKY52具有转录激活活性,其丝氨酸岛、苏氨酸岛和C端的富酸性氨基酸区是负责转录激活的区域.这些结果提示OsWRKY52作为一个转录激活子,可能参与植物对稻瘟菌的应答反应.
- 王海华谢科吴坤陆郭泽建
- 关键词：DNA结合
- 水稻WRKY蛋白OsWRKY87的分析
- ＜正＞WRKY DNA结合蛋白是一类至今只在植物中发现的转录调节蛋白。它含有大约60个氨基酸的保守域,其中不变的W、R、K、Y位于其N端,一个新的锌指类基元位于其C端。WRKY蛋白参与植物抗病防卫、衰老、发育、伤诱导、抗...
- 王海华郝中娜谢科吴坤陆郭泽建
- 文献传递
