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不同来源的脱氧核糖核酸酶在基因表达量分析中应用效果的比较研究被引量：1: 2013年; 目的:比较在基因表达量分析中使用不同来源的脱氧核糖核酸酶(DNase)去除样本中残留DNA的应用效果差异,为研究者根据自己的实验需求选择合适的DNase提供依据。方法:选择国内外广泛使用的3种DNase,分别为Invitrogen DNase,TaKaRa DNase和Tiandz DNase。按照各种DNase的说明书对Trizol法提取的胎盘总RNA中残留DNA进行降解,定量方法采用实时荧光PCR测定反转录后的cDNA量。比较各种DNase对不同浓度RNA样本中残留DNA的处理效率、RNA损失量、操作时间及成本等。结果:三种DNase酶均能够完全降解不同残留量的DNA(10 ng、100 ng及1μg),实时荧光定量PCR均未检测到残留DNA。Invitrogen DNase对DNA的处理过程耗时最短,操作过程造成各种浓度RNA模板的损失量均最低,但成本最高;TaKaRa DNase处理的耗时居中,成本居中,RNA损失量最高,尤其对低浓度(<100 ng/μL)RNA样本;Tiandz DNase处理的耗时最长,成本最低,RNA损失量居中,当模板浓度较高(>500 ng/μL)时,损失量相对减少。结论:不同来源的DNase在基因表达量分析中对样本处理的应用效果各不相同,在不同样本分析中可参考以下原则正确使用合适的DNase,以保证分析的顺利和结果的准确:对于RNA提取量较多的样本,三种DNase均可选择,但如考虑成本,首选Tiandz DNase,如考虑耗时或RNA损失量,首选Invitrogen DNase,如既考虑耗时又考虑成本,可选TaKaRa DNase;对RNA提取量较少的血液或少量细胞(如单细胞)样本,应选择Invitrogen DNase。; 李小燕黄欢王珏卢守莲孙丽洲; 关键词：DNASE 基因表达量 RNA提取

胎儿超声软标记与结构畸形在产前诊断染色体异常中的意义被引量：4: 2019年; 目的:探讨胎儿超声软标记、结构畸形在产前诊断染色体异常病例中的临床意义。方法:回顾性分析608例行染色体核型分析胎儿的超声征象及染色体检测结果,总结染色体异常胎儿的超声征象特点,比较超声软标记、结构畸形胎儿染色体异常检出率的差异。结果:608例中,染色体核型分析结果异常54例(检出率8.9%),其中21-三体25例(46.3%);18-三体9例(16.7%);13-三体2例(0.04%);Turner综合征1例(0.02%);余17例为其他染色体异常。染色体核型分析结果异常中有31例(57.4%)存在超声征象异常。高危因素为超声因素的检出率(12.3%)明显高于非超声因素的检出率(6.7%)(P<0.05)。结构畸形的染色体异常检出率(28.6%)明显高于超声软标记的染色体异常检出率(6.7%)(P<0.01)。结论:发现胎儿存在结构畸形或多个软标记阳性,特别是合并羊水过多或其他高危因素(高龄、血清学检查阳性)时应建议行染色体检查以明确诊断;发现单个超声软标记时,没有必要过分强调其可能的染色体风险,以免引起孕妇精神紧张和过度医疗。; 郭晨燕卢守莲孙丽洲; 关键词：产前超声检查染色体异常

正常及去势大鼠骨组织形态的比较研究: 2001年; 目的 :比较正常大鼠骨组织形态与去势大鼠的差别 ,探讨绝经后骨质疏松的发生机制。方法 :切除成年雌性大鼠双侧卵巢制成实验性骨质疏松动物模型 ,将股骨远端骨组织经甲基丙烯酸甲酯等包埋切片后观察骨组织形态、测量各项参数。结果 :去势大鼠骨组织皮质及骨小梁变薄 ,骨矿化率增高 ,矿化缘长度增加 ,小梁表面破骨细胞数明显增多。结论 :卵巢功能下降 ,骨吸收形成失衡是早期骨丢失的主要机制。; 卢守莲程云英; 关键词：骨组织形态计量学绝经后骨质疏松雌激素卵巢功能

羊水直接PCR法快速诊断脊肌萎缩症的实验研究被引量：3: 2013年; 目的:建立一种快速、简便的产前诊断脊肌萎缩症的检测方法。方法:基于运动神经元生存基因SMNc和SMNt的两个同源拷贝碱基的差异,对SMNt基因第7、8外显子进行缺失分析,抽取孕妇羊水后用作者自行研制的"HpH-Buffer",以离心后羊水沉淀中的胎儿细胞为模板直接进行PCR扩增,扩增产物进行酶切限制性片断长度多态性分析,对2例有脊肌萎缩症患儿生育史的孕妇怀有的胎儿进行产前基因诊断。同时,为考察羊水直接扩增方法的效率,对羊水样本直接扩增和对羊水样本中提取的基因组DNA扩增进行了平行实验。结果:2例胎儿均有SMNt基因第7、8外显子缺失;以羊水为模板和以基因组DNA为模板进行扩增的效率相似。结论:应用"HpH Buffer"直接对羊水样本中SMN基因上外显子7、8进行扩增,结合限制性片断长度多态性分析SMNt上是否发生缺失,可缩短诊断时间,节约诊断成本,减少检测过程中可能出现的样本交叉污染,有望成为临床上产前诊断脊肌萎缩症的新方法。; 黄欢王珏卢守莲洪蕾谢爱萍曹郡孙丽洲; 关键词：脊肌萎缩症 SMN基因产前诊断基因诊断

双卵巢切除后外周血单核细胞ER-mRNA的表达有质疏松关系的研究: 程云英卢守莲任慕兰; 关键词：去势大鼠外周血单核细胞绝经后骨质疏松症; 文献传递

卵巢摘除大鼠外周血单核细胞ER-mRNA表达与骨小梁退变的相关研究被引量：4: 2000年; 目的　探讨外周血单核细胞及其雌激素受体 ( ER) m RNA表达水平 ,在绝经后骨质疏松发生机理中所起的作用。方法　成年雌性 SD大鼠 30只 ,随机分 3组 ,去势组 ( OVX组 ) ,假手术组 ( Sham组 ) ,OVX+Premarin组 ( ERT组 )。术后 6周后采各大鼠心脏血 ,分别以 1用放免法测定血清雌二醇 ;2外周血单核细胞计数以及分离培养纯化单核细胞后运用 RT- PCR法检测 ER- m RNA;3各组行骨组织形态计量学测定。结果　 1OVX组与 Sham组相比 ,血清 E2 显著下降 ( P<0 .0 1)。外周血单核细胞( PBM)数显著升高 ( P<0 .0 1) ,而 PBM的 ER- m RNA表达显著降低 ( P<0 .0 1) ,骨组织形态计量学检查 OVX组显示骨小梁面积 ,骨小梁宽度 ,皮质骨面积 ,骨小梁游离末端数均明显降低 ( P<0 .0 5) ,而骨小梁表面破骨细胞数 ,骨矿化沉积率 ,骨矿化缘长度及骨小梁间距等都显著增加 ( P<0 .0 5,P<0 .0 1) ,2 ERT组的血清 E2 ,PBM数及其 ER- m RNA与 Sham组相比无显著差异 ( P<0 .0 5) ,骨量及显微结构亦无明显减少和破坏 ( P<0 .0 5) ,但与 OVX组相比 ,则各项指标均有显著差异 ( P<0 .0 5)。结论　 1卵巢切除后骨量丢失可能与单核细胞表达 ER量减少 ,使单核细胞向破骨细胞的分化增多 ,而使骨吸收增强有关。 2激素替代治疗可能通过调节单核?; 程云英卢守莲任慕兰庄育红; 关键词：单核细胞激素替代治疗

改良荧光原位杂交技术在产前诊断中的应用被引量：12: 2009年; 目的：评价改良荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization,FISH）技术在产前诊断中的应用。方法：用改良FISH技术检测119例孕16-24周孕妇的羊水间期细胞及10例孕25-32周胎儿脐血间期细胞,5例孕9-12周绒毛间期细胞,每例均行常规染色体核型分析。结果：应用改良FISH法,所有样本均在6h内获得检测结果,除2例羊水培养失败外,其余样本均在3周内获得细胞遗传学诊断。两种方法均检出特氏综合征、18-三体综合征、21-三体综合征各1例,另5例常规染色体核型分析异常,因超出检测范围,FISH法未能检出,所有样本的两种方法检测结果均一致。结论：经改良后的FISH技术缩短了诊断时间,缓解了孕妇及家属的焦虑心情,且可用于多种不同样本的检测,因其高效、省时、取材多样等优点在产前诊断具有重要的临床价值。; 张静引孙丽洲肖云山卢守莲王珏曹郡; 关键词：荧光原位杂交染色体异常产前诊断羊水绒毛膜绒毛

双卵巢切除后外周血单核细胞ER-mRNA的表达与骨质疏松关系的研究: 目的:通过建立绝经后骨质疏松的动物模型,测定去势大鼠外周血雌激素水平,外周血单核细胞数及其表达雌素受体(ER)mRNA水平,探讨外周血单核细胞在绝经后骨质疏松发生机制中所起的作用.方法:成年雌性SD大鼠30只,随机分3组...; 程云英卢守莲任慕兰庄育红; 文献传递

辅助生殖妊娠流产与自然妊娠流产绒毛核型分析比较被引量：4: 2013年; 目的观察辅助生殖妊娠后流产与胚胎染色体异常的关系,探讨辅助生殖技术对胚胎染色体异常发生的风险。方法选择体外受精(IVF)或宫腔内人工受精(IUI)妊娠后自然流产患者51例(辅助生殖组)、自然妊娠后自然流产患者76例(自然妊娠组),对其绒毛标本进行细胞培养、染色体制备及核型分析。结果研究对象绒毛标本均进行细胞培养,成功得到核型分析结果 122例(辅助生殖组51例,自然妊娠组71例),成功率为96.1%。辅助生殖组染色体异常28例(IVF 23例、IUI 5例)、自然妊娠组37例,染色体异常率分别为54.9%、52.1%,两组比较P>0.05。两组出现频率最高的染色体异常类型是常染色体三体。结论胚胎染色体异常是辅助生殖妊娠后流产的主要原因之一,但辅助生殖技术并未增加染色体异常发生的风险。; 董自江卢守莲孙丽洲李艳张阳; 关键词：绒毛膜绒毛

47,XX,+der(13;22)(q21;p13)mat胎儿一例: 2008年; 曹郡肖云山卢守莲王珏孙丽洲洪蕾; 关键词：智力低下儿胎儿夫妇双方宫内孕

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