卢娜娜
- 作品数：17 被引量：77H指数：6
- 供职机构：北京中医药大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 流感病毒性肺炎小鼠自然杀伤细胞毒性相关信号转导通路差异基因表达及两种不同治法中药方剂的调控作用研究被引量：9
- 2013年
- 目的观察疏风宣肺方和解表清里方对流感病毒性肺炎小鼠自然杀伤细胞（NK细胞）毒性相关信号转导通路差异基因表达的调控作用。方法将90只ICR小鼠按随机数字表法分为对照（N）组、模型（M）组、奥司他韦（C）组以及中药疏风宣肺方高、中、低剂量（SH、SM、SL）组和解表清里方高、中、低剂量（JH、JM、JL）组，每组10只。采用流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1滴鼻感染方法制备流感病毒性肺炎模型；N组以0．05m1等渗盐水滴鼻。于制模后2h，C组给予奥司他韦11．375mg·kg-1·d-1灌胃；SH、SM、SL组给予疏风宣肺方（主要药物金银花、连翘、板蓝根等）3．76、1．88、0．94g.kg-1·d-1灌胃；JH、JM、JL组给予解表清里方（主要药物麻黄、石膏、生甘草等）4．36、2．18、1．09g·kg-1.d-1灌胃；N组及M组则灌胃等量生理盐水；各组均0．2mud，连用4d。提取肺组织总RNA，采用基因芯片筛选出NK细胞毒性信号转导通路相关的差异表达基因，以I表示信号强度；并采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白质免疫印迹试验（Weslernblotting）对部分基因进行验证。结果在NK细胞毒性相关信号转导通路中，M组较N组上调差异基因43个。用药治疗后，SM组下调差异表达基因36个，JM组下调差异表达基因29个，SL组下调差异表达基因22个，JH组下调差异表达基因21个，SH组下调差异表达基因20个，儿组下调差异表达基因10个；SH、SL、JH、JM、JI组表达下调的基因均包括在SM组的表达谱中，表明中剂量疏风宣肺方调控NK细胞毒性作用最显著。荧光定量PCR和Westernblotting测定结果显示，与M组比较，疏风宣肺方与解表清里方各剂量组对肿瘤坏死因子-α（TNF—α）的mRNA及蛋白表达均有显著抑制作用，疏风宣肺方和解表清里方均以中剂量组最低（TNF—αmRNA：1．07±0．19、1．19±0．14比3．20±0．56，均P〈0�
- 卢娜娜刘琪顾立刚周旭澎吴珺邱泽计张洪春晁恩祥张沂
- 关键词：流感病毒性肺炎小鼠
- 疏风宣肺方和解表清里方对流感病毒H1N1感染人肺腺癌上皮细胞A549中TLR3/7信号通路作用的研究被引量：3
- 2015年
- 目的:研究疏风宣肺方和解表清里方体外对人肺腺癌上皮细胞A549中TLR3/7信号通路的影响。方法:利用基因芯片技术研究甲型流感病毒H1N1感染A549细胞后TLR3/7信号通路中基因转录的变化。采用荧光定量PCR和Western blotting法检测各组细胞中的Toll样受体3(Toll-like receptor3,TLR3)、Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,My D88)、激活核因子Kappa B(nuclear factor-Kappa B,NF-κB)的mRNA及蛋白表达的变化。结果:在TLR3/7相关信号传导通路中,与细胞对照组相比,H1N1感染组差异表达基因Tlr3、Tlr7、Myd88、Nfbk1、Mapk8、Mapk13、Ifna1、Ifnβ1明显上调,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组对差异表达基因Tlr3、Tlr7、Myd88、Nfbk1、Mapk8、Mapk13、Ifna1、Ifnβ1明显下调。qRT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组TLR3/7、My D88、NF-κB的mRNA表达均显著升高(P<0.01)。与H1N1感染组比较,疏风宣肺组的TLR3/7、My D88、NF-κB的mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01),解表清里方对TLR3/7、NF-κB的mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01)。同时,疏风宣肺组治疗效果优于解表清里组。Western blotting结果显示,H1N1感染组TLR3/7、NF-κB蛋白较正常组显著升高(P<0.05)。与H1N1感染组比较,两种方药的TLR3/7、NF-κB表达均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:疏风宣肺方和解表清里方可以抑制流感病毒H1N1所诱导的TLR3/7信号通路活化,下调活性NF-κB的转录活性,发挥抗流感病毒的作用。
- 葛世杰卢娜娜刘晓婷张沂顾立刚吴珺邱泽计张洪春晁恩祥
- 关键词：人肺腺癌A549细胞
- 两种不同治法方药对流感病毒感染小鼠差异基因调控作用的研究
- 目的 疏风宣肺方和解表清里方是中日友好医院晁恩祥教授的经验方,经临床实践证实可有效地治疗甲型流感。本研究旨在从基因、mRNA以及蛋白质水平,探讨两种治法抗流感方药对流感病毒性肺炎小鼠肺组织细胞凋亡、炎性细胞因子、基质金属...
- 卢娜娜
- 关键词：CD8+T细胞
- 文献传递
- 疏风宣肺及解表清里方药对流感病毒感染小鼠肺损伤的保护研究被引量：13
- 2013年
- 目的:观察疏风宣肺抗流感方和解表清里抗流感方对流感病毒亚甲型肺适应株(FM1)小鼠病毒性肺炎的治疗作用。方法:流感病毒肺适应株FM1滴鼻感染小鼠,建立小鼠流感病毒性肺炎模型,于病毒感染后2h,对照组、模型组灌服蒸馏水;达菲组给达菲2.5g.mL-1.d-1;其余6组分别灌服疏风宣肺抗流感方药高、中、低剂量(3.762、1.881、0.941g.kg-1.d-1)和解表清里抗流感方药高、中、低剂量(4.368、2.184、1.092 g.kg-1.d-1);均每日1次,每次0.2mL,连用4d。用高、中、低剂量的两种方药灌胃治疗后,观察小鼠的肺指数、肺组织切片病理形态变化。结果:疏风宣肺抗流感方和解表清里抗流感方中、低剂量组能较明显地降低肺指数,与模型组比较有统计学差异(P<0.05),能减轻肺组织病变。结论:疏风宣肺抗流感方和解表清里抗流感方能改善流感病毒感染小鼠的肺组织病理损伤,有抗流感病毒的作用。
- 刘琪顾立刚周旭澎卢娜娜吴珺邱泽计李根茂葛东宇张洪春晁恩祥
- 关键词：流感病毒肺损伤
- 疏风宣肺方和解表清里方体外干预甲型流感病毒H1N1诱导炎性细胞因子分泌作用的研究被引量：6
- 2015年
- 目的研究疏风宣肺方和解表清里方对甲型流感病毒H1N1感染的人肺腺癌上皮细胞(A549)中炎性细胞因子的影响。方法培养A549,甲型流感病毒H1N1感染A549后,分为细胞对照组、H1V1感染组、奥司他韦对照组、疏风宣肺组及解表清里组。采用实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blotting法检测各组细胞中炎症相关的白细胞介素(IL)1、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、IL-10、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、调节活化正常T细胞表达和分泌的趋化因子(RANTES)的mRNA及蛋白表达的变化。结果基因芯片结果提示,与细胞对照组比较,H1N1感染组差异表达基因Il1β、Thf、Ccl5、Il10、Il6、Ccl2明显上调。与H1N1感染组比较,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组差异基因Thf、Il1β、Ccl5、Il10、Il6、Ccl2表达显著下调。RT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组IL-1、TNF-α、IL-6、IL-10、MCP-1、RANTES的mRNA表达均显著升高(P<0.01)。与H1N1感染组比较,疏风宣肺组IL-1、TNF-α、IL-6、IL-10、MCP-1的mRNA表达均明显降低(P<0.01,P<0.05),解表清里组IL-1、TNF-α、IL-6、MCP-1的mRNA表达均明显降低(P<0.01,P<0.05)。Western blotting结果显示,H1N1感染组IL-1、TNF-α、IL-6、IL-10、MCP-1、RANTES蛋白表达较细胞对照组显著升高(P<0.05);与H1N1感染组比较,疏风宣肺组及解表清里组IL-1、TNF-α、IL-6、IL-10、MCP-1、RANTES蛋白表达均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论疏风宣肺方和解表清里方均可抑制流感病毒感染后炎性细胞因子IL-1、TNF-α、IL-6、MCP-1的mRNA过表达及蛋白分泌,减轻炎症反应,并恢复机体免疫功能的稳定和平衡。
- 葛世杰刘晓婷张沂卢娜娜顾立刚吴珺邱泽计张洪春晁恩祥
- 关键词：H1N1亚型抗病毒药(中药)炎症趋化因子类病毒
- 不同治法方药对流感病毒性肺炎小鼠MMPs和TIMPs表达影响的研究被引量：8
- 2014年
- 目的:探讨不同治法方药对流感病毒性肺炎小鼠基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)表达的作用。方法:制备小鼠甲型流感病毒性肺炎模型,随机分为正常组(N),模型组(M),达菲组(C),疏风宣肺方大、中、小剂量组(SL、SM和SS),解表清里方大、中、小剂量组(JL、JM和JS)。采用基因芯片筛选MMPs和TIMPs的差异基因;荧光定量PCR对部分差异基因进行验证。结果:与N组相比,M组差异基因MMP-9、TIMP-1、MMP-3、MMP-14、MMP-19明显上调及MMP-2、TIMP-2明显下调。与M组相比,SM、SS和JM组对MMP-9、MMP-3、MMP-14、MMP-19基因具有显著的下调作用,显著上调TIMP-2的基因表达;荧光定量PCR显示,SM、SS和JM、JS组对MMP-9、MMP-1表达有显著抑制(P<0.05,P<0.01)。结论:疏风宣肺方调节甲型流感病毒性肺炎小鼠MMPs和TIMPs表达,抑制流感病毒感染后的肺组织炎症损伤,且治疗作用优于解表清里方。
- 卢娜娜刘琪顾立刚周旭澎吴珺邱泽计张洪春晁恩祥张沂
- 关键词：基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶组织抑制剂
- 疏风宣肺方和解表清里方干预流感病毒性肺炎小鼠细胞凋亡的研究被引量：18
- 2013年
- 目的病毒感染宿主细胞后,细胞凋亡天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白(caspase)途径激活限制病毒复制,但甲型流感病毒感染引起的细胞凋亡的分子机制尚不完全清楚。探讨流感病毒性肺炎小鼠肺组织细胞凋亡相关的基因及2种不同抗流感病毒方药的治疗作用。方法制备甲型流感病毒性肺炎小鼠模型,随机分为空白组、肺炎模型组、奥司他韦对照组、疏风宣肺方高、中、低剂量组,解表清里方高、中、低剂量组。提取各组小鼠肺组织总RNA,采用基因组芯片筛选出与凋亡密切相关的差异表达基因,并用荧光定量PCR对天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白基因进行验证。结果肺炎模型组肺组织中差异表达基因casp-3、casp-8、casp-9、Fas、FasL、TNF、TNFrasf1a、Tradd、IL1a、IL1b、IL1r1、IL1r2、casp-7明显上调,与空白组比较差异有统计学意义。疏风宣肺方中剂量组差异表达基因casp-8、casp-7、Fas、FasL、TNF、TNFrasf1a、Tradd、IL1a、IL1b、IL1r1、IL1r2明显下调。疏风宣肺方低剂量组下调上述基因的作用强于解表清里方低剂量组,疏风宣肺方中剂量组治疗效果优于解表清里方中剂量组。疏风宣肺方低剂量组与解表清里方中剂量组对casp-3、-8、-9表达有显著抑制,差异有统计学意义(P<0.01)。不同剂量疏风宣肺方的治疗效果与解表清里方比较如下:疏风宣肺方低剂量组>疏风宣肺方中剂量组>解表清里方中剂量组>解表清里方低剂量组。结论疏风宣肺方对细胞凋亡调控基因的调控作用强于解表清里方,上调casp-3、-8、-9表达,对抗流感病毒感染后的细胞凋亡较强,对甲型流感病毒性肺炎小鼠治疗作用优于解表清里方。
- 卢娜娜刘琪顾立刚周旭澎吴珺邱泽计张洪春晁恩祥
- 关键词：细胞凋亡
- 流感病毒性肺炎小鼠肺组织炎性细胞因子表达及疏风宣肺方和解表清里方的调控作用
- 目的 研究流感病毒性肺炎小鼠肺组织炎性细胞因子表达及疏风宣肺方和解表清里方的调控作用.方法 制备甲型流感病毒性肺炎小鼠模型,随机分为空白组(N)、肺炎模型组(M)、奥司他韦对照组(C)、疏风宣肺方大、中、小剂量组(SL、...
- 卢娜娜刘琪顾立刚吴珺邱泽计张洪春晁恩祥张沂于卓男
- 关键词：肺炎流感病毒炎症
- 疏风宣肺方、解表清里方药对流感病毒小鼠TLR7、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的观察疏风宣肺和解表清里方药对流感病毒亚甲型肺适应株(FM1)感染小鼠肺组织细胞Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、激活核因子Kappa B(nuclear factor-kappaB,NF-κB)mRNA及蛋白表达的影响。方法选择108只小鼠,随机分为9组:正常组,模型组,磷酸奥司他韦胶囊组[西药组,2.5g/(mL·d)],疏风宣肺方(中药1)高、中、低剂量组[3.762、1.881、0.941g/(kg·d)],解表清里方(中药2)高、中、低剂量组[4.368、2.184、1.092g/(kg·d)],每组12只。将各组小鼠用乙醚轻度麻醉,正常组以0.05mL生理盐水滴鼻,其余各组以0.05mL4LD50流感病毒FM1稀释液滴鼻感染小鼠。造模成功率100%。感染后2h灌胃给药。正常组、模型组灌胃蒸馏水,0.2mL/次,1次/d,连续干预4天。采用RT-PCR反应测定肺组织TLR7、MyD88、NF-κB mRNA表达,采用Western blot法测定肺组织TLR7、MyD88、NF-κB蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组TLR7、MyD88、NF-κB mRNA表达升高(P<0.01);与模型组比较,西药组,中药1高、中、低剂量组TLR7、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),中药2高、中剂量组TLR7、NF-κB mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),中药2高、中剂量组MyD88mRNA表达降低(P<0.05),中药2中剂量组MyD88蛋白表达降低(P<0.05),中药2低剂量组TLR7、NF-κB蛋白表达降低(P<0.05)。与西药组比较,中药1低剂量组MyD88蛋白表达降低(P<0.05),中药1中、低剂量组NF-κB蛋白表达降低(P<0.01);中药2高、中、低剂量组TLR7mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),MyD88蛋白表达降低(P<0.01),中药2低剂量组NF-κB mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论疏风宣肺方各剂量和解表清里中剂量能通过调节MyD88依赖的TLR信号传导通路下调NF-κB活性,发挥抗流感病毒的作用。疏风宣肺方效果优于解表清里方。
- 刘琪顾立刚卢娜娜周旭澎吴珺邱泽计张洪春晁恩祥
- 关键词：流感病毒TOLL样受体7
- 流感病毒性肺炎小鼠NK细胞毒性相关信号传导通路差异基因表达及两种不同治法方药的调控作用研究
- 目的 探讨流感病毒性肺炎小鼠NK细胞毒性相关信号传导通路差异基因表达及两种不同治法方药的调控作用研究。方法 制备甲型流感病毒性肺炎小鼠模型,随机分为空白组(N)、肺炎模型组(M)、奥司他韦对照组(Control)、疏风宣...
- 卢娜娜刘琪顾立刚周旭澎吴珺邱泽计张洪春晁恩祥
