刘绍坤
- 作品数：30 被引量：93H指数：6
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省医药卫生科研计划课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Tumstatin185～191逆转肺腺癌化疗耐药的机制探讨
- 2009年
- 目的观察Tumstatin185～191单药及联合顺铂（DDP）对肺腺癌耐药细胞株A549一DDP增殖和凋亡的影响，并探讨其联合作用的机制。方法以不同浓度的Tumstatin185—191单药、DDP单药及Tumstatin185～191联合DDP干预A549-DDP细胞，采用四甲基偶氮唑蓝（MIT）法测定细胞的增殖情况，流式细胞术检测细胞凋亡的变化，Westernblot法检测A549-DDP细胞内p-Akt和p-ERK蛋白的表达水平。结果Tumstatin185～191对A549-DDP细胞的增殖具有抑制作用，其半数抑制浓度（IC50）为80．25μmol／L。DDP单药对A549一DDP的Ic50为77．16μmol／L，当DDP与20μmol／L的Tumstatin185～191联合使用时，DDP对A549-DDP细胞的IC50为57．97μmol／L，耐药逆转指数为1．33；当DDP与40μmol／L的Tumstatin185—191联合使用时，DDP对A549-DDP细胞的IC50为26．40μmol／L，耐药逆转指数为2．92。两药联合使用时，A549-DDP细胞的早期凋亡率为19．5％±1．1％，较DDP单药（13．3％±1．5％）和Tumstatin185—191单药使用时的早期凋亡率（10．2％±2．0％）显著增加（F=4．09，P〈0．05）。Tumstatin185—191能显著抑制A549-DDP细胞内P—Akt和P—ERK蛋白的表达，但如与DDP联合使用，并不能增加Tumstatin185～191对p-ERK和p—Akt蛋白表达的抑制效应。结论Tumstatin185～191能抑制肺腺癌耐药细胞株A549-DDP的增殖、促进凋亡，并部分逆转A549-DDP细胞对DDP的化疗耐药；其作用机制可能与Tumstatin185～191能下调A549-DDP细胞内P—Akt和P—ERK蛋白的嘉扶右姜。
- 王伟陈平李军利裴艳芳双庆翠刘彩虹蔡珊刘绍坤诸兰艳周锐
- 关键词：TUMSTATINAKTERK
- 白介素23受体在支气管哮喘小鼠脾源性CD4^+T细胞中的表达及意义被引量：1
- 2010年
- 目的探讨急性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠CD4+T细胞表面白介素23受体(IL-23R)的表达及在哮喘发病中的作用。方法建立急性哮喘小鼠模型,免疫磁珠分离小鼠脾源性CD4+T细胞,培养24h后,检测CD4+T细胞表面IL-23R的表达、Th17细胞的阳性率及细胞培养上清液中的IL-17水平。结果哮喘小鼠脾脏CD4+T细胞表面IL-23R的表达明显高于正常组(P<0.01);哮喘小鼠脾脏CD4+T细胞中Th17细胞的阳性率明显高于正常组(P<0.01);哮喘小鼠脾脏CD4+T细胞分泌IL-17浓度明显高于正常组(P<0.01);小鼠脾脏CD4+T细胞表面IL-23R的表达与Th17细胞的阳性率和IL-17的浓度呈正相关。结论 IL-23R在急性哮喘的发病机制中可能起重要作用。
- 杨沫毅李金秀刘绍坤刘毅王谷宜朱岳Binaya Wasti向旭东
- 关键词：哮喘CD4+T细胞
- 肺表面活性物质相关蛋白质-D在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中的表达被引量：8
- 2010年
- COPD发病机制未完全明了,越来越多的研究结果表明,细胞凋亡参与COPD的形成过程.肺表面活性物质相关蛋白质-D（pulmonary surfactant associated protein,SP-D）缺失可诱导鼠自发形成肺气肿,提示SP-D在COPD的发病机制中起重要作用.本研究旨在研究肺泡间隔细胞凋亡是否与SP-D的表达有关.
- 罗曼陈平刘绍坤李军利
- 关键词：肺表面活性物质大鼠肺组织相关蛋白质慢性阻塞性肺疾病PROTEINCOPD
- E-选择素和巨噬细胞炎症蛋白2在慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症中的作用被引量：13
- 2008年
- 目的探讨E-选择素和巨噬细胞炎症蛋白2(MIP-2)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道炎症中的作用。方法24只健康雄性SD大鼠随机分为COPD组和正常对照组,每组12只。COPD组大鼠采用单纯烟熏法制备COPD模型。采用免疫组织化学方法检测COPD组和对照组大鼠支气管肺组织中E-选择素的表达,ELISA方法检测血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)、肺组织匀浆中MIP-2的含量。结果所建大鼠模型的病理及肺功能测定基本符合人类COPD的特点。COPD组大鼠模型中E-选择素在支气管肺组织血管内皮细胞的表达明显高于对照组(P<0.05),与BALF中的中性粒细胞数呈正相关(r=0.809,P<0.01);MIP-2在BALF及肺组织匀浆含量显著高于对照组(P均<0.05),且均与BALF中的中性粒细胞数呈正相关(r值分别为0.893和0.716,P值分别<0.01和<0.05)。结论E-选择素和MIP-2可能参与了COPD气道炎症过程。
- 罗曼陈平蔡珊张程邓建华刘绍坤陈剑波吴杰
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病E-选择素
- AP-2α在烟雾暴露所致慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中的表达及与肺间隔细胞凋亡的关系被引量：2
- 2009年
- 目的探讨熏烟所致慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）大鼠肺组织中AP-2α表达与肺间隔细胞凋亡的关系。方法采用被动吸烟80d来复制大鼠COPD模型，采用TUNEL法检测肺组织细胞凋亡、Western blot法检测肺组织中活化的半胱天冬酶类3（Caspase-3）、免疫组织化学及Western blot法检测胞核中AP-2α蛋白的表达。结果采用熏烟法成功复制了大鼠COPD模型。与对照组相比，COPD组大鼠肺组织中活化的Caspase-3增加，肺间隔细胞凋亡增多；肺组织中AP-2α的阳性率增加，胞核中AP-2α蛋白水平增加（P〈0．05）。结论AP-2α可能参与了烟雾暴露所致的大鼠肺间隔细胞凋亡及COPD的发生。
- 李军利陈平蔡珊张程裴艳芳王伟刘绍坤
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病凋亡AP-2Α
- 急性哮喘患者外周血中Th17细胞的变化及其意义被引量：19
- 2010年
- 目的:探讨哮喘急性发作期患者外周血中Th17细胞的变化及其与哮喘严重程度的关系。方法:选取轻度急性哮喘患者、重度急性哮喘患者和健康对照者各10名。从血清单个核细胞中分离T淋巴细胞,流式细胞仪检测阳性Th17细胞率,分析其与哮喘严重程度的关系。结果:轻度急性哮喘组和重度急性哮喘组外周血阳性Th17细胞均较健康对照组增高(P<0.05),而重度哮喘组高于轻度哮喘组(P<0.05)。重度哮喘组外周血IL-17水平明显高于轻度哮喘组和健康对照组(P<0.05)。外周血中Th17阳性细胞数与急性哮喘严重程度呈正相关(r=0.869,P<0.05)。结论:急性哮喘患者外周血Th17细胞表达增加,且与其病情的严重程度呈正相关。
- 李建民向旭东李金秀李文朴刘绍坤
- 关键词：哮喘TH17细胞白细胞介素-17气道炎症
- 慢性阻塞性肺疾病肺血管内皮细胞和肺泡上皮细胞凋亡的实验研究被引量：10
- 2008年
- 目的研究COPD患者及烟雾暴露COPD大鼠肺血管内皮细胞和肺泡上皮细胞凋亡的相互关系及其与肺功能和肺气肿的相关性。方法采用烟雾暴露法建立COPD大鼠模型。分别采集COPD患者（13例）和对照患者（12例）及烟雾暴露80d大鼠（11只）和对照大鼠（12只）的肺组织标本，用HE染色评估肺部病理改变，用平均内衬间隔（MH）与平均肺泡数（MAN）评估大鼠肺气肿程度；用原位末端标记法对肺血管内皮细胞和肺泡上皮细胞凋亡进行定量检测，分析这两种细胞凋亡的相关性，及其与肺功能和肺气肿指标的相关性。正态分布的计量资料以x±s表示，采用两独立样本的t检验进行分析；非正态分布的计量资料以中位数（四分位间距）表示，采用两个独立样本比较的Wilcoxon秩和检验；采用Spearman秩相关进行相关分析。结果COPD患者和大鼠均出现明显肺气肿病理改变。COPD患者肺血管内皮细胞和肺泡上皮细胞凋亡指数[（13．2±2．6）％和（28．9±3．1）％]明显高于对照患者[（5．6±1．5）％和（5．8±1．2）％]。COPD患者肺泡上皮细胞凋亡指数[（28．9±3．1）％]明显高于肺血管内皮细胞凋亡指数[（13．2±2．6）％]，二者间呈正相关（r=0．60，P〈0．05）；COPD患者肺血管内皮细胞和肺泡上皮细胞的凋亡指数与FEV，占预计值％呈负相关（r值分别为-0．83和-0．69，均P〈0．05），与FEV1／FVC呈负相关（r值分别为-0．95和-0．71，均P〈0．05），与残气容积／肺总量呈正相关（r值分别为0．93和0．70，均P〈0．05）。COPD大鼠肺血管内皮细胞和肺泡上皮细胞凋亡指数[（4．1±0．4）％和（10．0±1．0）％]明显高于对照大鼠[（0．2±0．1）％和（2．1±0．4）％]，COPD大鼠肺组织MH与肺泡上皮细胞凋亡指数呈正相关（r=0．59，P〈0．05），MAN与肺泡上皮细胞凋亡指数呈负相关（r=-0．81，P〈0．05）
- 刘绍坤陈平陈剑波向旭东蔡珊邓建华
- 关键词：内皮细胞上皮细胞细胞凋亡
- β-arrestin2对急性支气管哮喘小鼠模型脾CD4＋T细胞T-bet表达的影响
- 2011年
- 目的探讨G-arrestin 2在急性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠模型脾CD4^＋T细胞中的表达及对Tbet表达的影响。方法建立急性哮喘小鼠模型，免疫磁珠分离小鼠脾源性CD4^＋T细胞，RNA干扰β-arrestin 2的表达后，检测CD4^＋T细胞β-arrestin 2、T-bet mRNA和蛋白的表达。结果siRNA-β-arrestin 2-1123沉默效果最佳，相对于未转染siRNA的哮喘组及其他siRNA-β-arrestin2转染组，β-arrestin 2 mRNA明显降低（P〈O．01）；哮喘小鼠模型脾CD4^＋T细胞β-arrestin 2蛋白的表达明显高于正常组（P〈O．01）；β-arrestin 2沉默后，哮喘小鼠脾CD4’T细胞T-bet mRNA和蛋白的表达明显升高（P〈O．05）。结论β-arrestin2可能通过抑制小鼠CD4^＋T细胞T-bet的表达参与哮喘的发病。
- 王谷宜刘毅张莉刘绍坤李坑龚素波向旭东陈平
- 关键词：哮喘CD4^+T细胞ARRESTIN
- 内皮祖细胞移植在慢性阻塞性肺疾病小鼠体内分布被引量：2
- 2010年
- 目的:观察经气管移植内皮祖细胞(EPCs)在烟雾暴露所致慢性阻塞性肺疾病模型小鼠中的分布及分化。方法:体外分离小鼠骨髓单个核细胞于EGM-2MV培养基中培养并鉴定。24只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、COPD+PBS干预组及COPD+EPCs干预组;香烟烟雾暴露90d建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠模型;烟雾暴露结束后,COPD+PBS干预组及COPD+EPCs干预组分别经气管注入30μLPBS和30μL细胞悬液(含1×105个CM-DiI标记EPCs)。移植后观察30d处死小鼠,通过荧光显微镜观察移植细胞在肺内的分布及通过免疫荧光检测广谱细胞角蛋白的表达水平。结果:EPCs移植后30d可见EPCs分布于肺血管及气道,部分细胞表达上皮特异标志广谱细胞角蛋白。结论:EPCs移植后可定植COPD模型小鼠肺血管及气道,且可能转化为支气管及肺泡上皮细胞。
- 曹君陈平杨悦彭红刘绍坤
- 关键词：内皮祖细胞慢性阻塞性肺疾病支气管上皮细胞肺泡上皮细胞
- RORγt对急性哮喘小鼠脾源性CD4+T细胞亚群Th17细胞的影响
- 支气管哮喘是由多种细胞(嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞和中性粒细胞等)和细胞组分参与的慢性气道炎症性疾病。其病因目前仍不清楚,许多炎性细胞及释放的细胞因子和炎症介质涉及此过程。Th1/Th2之间的平衡成为研究Th1介...
- 刘绍坤向旭东杨沫毅王谷宜刘毅陈平
- 文献传递
