刘梅
- 作品数：92 被引量：85H指数：5
- 供职机构：南通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 干扰Kinesin-12表达对星形胶质细胞周期和凋亡的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 :比较驱动蛋白家族成员Kinesin-12和Kinesin-5对星形胶质细胞周期和凋亡的影响差异,探讨Kinesin-12在细胞增殖中的作用机制。方法 :采用si RNA方法干扰Kinesin-12、Kinesin-5基因表达,通过实时定量PCR、Western Blot检测干扰表达效率;Hoechst33342染色观察细胞凋亡;经AnnexinⅤ/PI双染色检测细胞凋亡率;流式细胞术检测细胞周期变化;细胞免疫化学染色观察Kinesin-12失功能后MyosinⅡB的分布改变。结果:Kinesin-12和Kinesin-5蛋白表达下调达65%以上;Hoechst33342染色和AnnexinⅤ/PI双染色法发现干扰Kinesin-12和Kinesin-5表达后细胞凋亡率显著增加(P<0.05);流式细胞术检测发现Kinesin-12 si RNA处理后细胞周期被阻滞在G1期,而Kinesin-5si RNA处理后,细胞周期被阻滞在G2/M期。细胞免疫化学染色发现,抑制Kinesin-12表达后MyosinⅡB(即Myh 10)的分布发生改变。结论:抑制Kinesin-12或Kinesin-5表达,均可明显阻滞细胞分裂并诱导细胞凋亡,但作用机制与Kinesin-5不同,推测Kinesin-12可能与MyosinⅡB相互作用形成异源聚合体作用于微管微丝骨架重构。
- 冯杰花娟胡遵鲁严莹莹巫荣华刘梅
- 关键词：星形胶质细胞凋亡细胞周期
- 壁虎胚胎大脑皮层神经元和胶质细胞的分离、培养及纯化被引量：2
- 2007年
- 目的建立多疣壁虎胚胎大脑皮层神经元和胶质细胞的分离、培养及纯化方法。方法分离孵化15d的多疣壁虎胚胎的大脑皮层,经胰酶消化,细胞计数后接种于培养瓶。采用差速贴壁及反复传代相结合的纯化培养方法培养胶质细胞;采用添加B27的神经元培养基培养神经元,并用免疫细胞化学方法鉴定。结果获得体外培养的壁虎GFAP阳性表达胶质细胞,4代后纯度达95%以上;采用神经元培养基,神经元生长良好,NF、MAPⅡ表达阳性,第10d纯度达95%以上。结论建立了壁虎细胞的培养方法,并获得高纯度的胶质细胞和神经元,为进一步对神经系统的深入研究提供细胞模型。
- 顾芸刘梅刘炎顾晓松
- 关键词：皮层神经元胶质细胞细胞培养多疣壁虎
- 中药神经生长液对自然衰老小鼠脑SOD活性和MDA含量的影响被引量：3
- 2004年
- 马振祥周鸣鸣刘梅
- 关键词：神经生长液自然衰老小鼠抗氧化
- 人胰高血糖素样肽-1突变体基因原核表达质粒的构建
- 2008年
- 目的:对人胰高血糖素样肽-1(hGLP-1)进行基因突变,构建GST融合蛋白原核表达质粒pGEX-4T/(Val8)hGLP-1,并在大肠杆菌中诱导表达。方法:选择大肠杆菌偏爱密码子,将hGLP-1(7～37)第2位的丙氨酸(Ala8)定点突变为缬氨酸(Val8),直接生物合成4个寡聚核苷酸片段并进行基因拼接,形成完整的hGLP-1突变体基因(Val8)hGLP-1,并连接到载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21,BamH I与Xho I双酶切电泳鉴定与序列测定,然后诱导表达其融合蛋白。结果:经酶切电泳鉴定与测序分析,证实所合成的突变体基因(Val8)hGLP-1已克隆到pGEX-4T-1中,经SDS-PAGE分析可以诱导表达出融合蛋白。结论:成功地构建了GST融合蛋白原核表达质粒pGEX-4T/(Val8)hGLP-1,为进一步获得重组hGLP-1蛋白奠定基础,为产业化规模制备hGLP-1突变体提供实验依据。
- 朱清顾云陆伟刘梅
- 关键词：融合蛋白基因突变克隆糖尿病
- D-Ala<Sup>2</Sup>-GIP在制备促进血管再生产品中的应用
- 本发明公开了D‑Ala<Sup>2</Sup>‑GIP在制备促进血管再生产品中的应用。本发明通过实验充分证明作为葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)的长效类似物，D‑Ala<Sup>2</Sup>‑GIP静脉注射或损伤处局...
- 管徒晨刘炎刘梅徐曼巫荣华
- miR-141-5P在制备促进神经干细胞增殖的药物中的应用
- 本发明公开了miR‑141‑5P在制备促进神经干细胞增殖的药物中的应用。本发明首先通过对E14天孕鼠大脑皮层的神经干细胞进行体外培养发现miR‑141‑5P在神经干细胞成熟过程中呈现显著降低的趋势；之后采用miR‑141...
- 巫荣华郭隆雨刘炎刘梅
- 序贯式糖尿病教育对社区糖尿病患者血糖代谢影响的研究
- 目的：探讨序贯式糖尿病教育对社区糖尿病患者血糖代谢的影响.方法：采用空白对照和自身对照研究，将68例糖尿病患者分为实验组和对照组，对照组给予常规糖尿病教育；实验组给予序贯式糖尿病教育.通过比较2组患者在教育前和教育后6个...
- 赵正清刘洋宋艳丽于德纯刘梅
- Tropic1808在PC12细胞中的表达被引量：2
- 2005年
- 目的构建稳定表达tropic1808基因的PC12细胞株,并通过观察稳定株中高分子量神经丝蛋白(NF-H)的表达以初步观察该基因的作用。方法构建重组真核表达载体pcDNA-HA-tropic1808,转染PC12细胞,经G418筛选、Westernblot鉴定。采用RT-PCR,实时PCR,Westernblot和细胞组织化学方法观察tropic1808稳定株中NF-H的表达。结果Westernblot检测表明,tropic1808基因稳定表达,RT-PCR,实时PCR,Westernblot和细胞组织化学方法均观察到NF-H在tropic1808稳定株中的表达高于空载体对照。结论Tropic1808基因可以在PC12稳定表达且NF-H在tropic1808稳定株中表达上升。
- 刘梅张琦刘炎丁斐
- 关键词：PCI2真核表达WESTERNBLOT实时PCR
- 坐骨神经夹伤与心脏毒素注射导致腓肠肌功能损伤中Calpains和FoxOs的差异表达及相关性分析被引量：1
- 2012年
- 背景:钙蛋白酶家族和FoxO转录因子在肌萎缩过程中发挥着重要的作用。目的:观察钙蛋白酶家族成员及FoxO转录因子(FoxO1和FoxO3a)在心脏毒素注射与坐骨神经夹伤致腓肠肌失功能损伤中表达的变化。方法:分别采用坐骨神经夹伤和心脏毒素注射建立大鼠腓肠肌功能损伤模型,于造模后的第3,7,14,21天取大鼠腓肠肌进行实时荧光定量PCR检测,并采用线性回归法进行相关性分析。结果与结论:结果显示,腓肠肌组织中的钙蛋白酶Ⅰ、钙蛋白酶Ⅱ和FoxO3amRNA在坐骨神经夹伤7d达到高峰,随后下降;钙蛋白酶Ⅲ和FoxO1mRNA在坐骨神经夹伤后14d达到高峰,随后下降。钙蛋白酶Ⅰ、钙蛋白酶Ⅱ、FoxO3amRNA在心脏毒素注射后第3天达高峰,随后逐渐下降;FoxO1mRNA在心脏毒素注射后7d时达最高;而钙蛋白酶ⅢmRNA在心脏毒素注射后3d时表达显著下降,随后逐渐恢复至正常水平。线性回归分析结果显示,在失神经肌损伤过程中钙蛋白酶Ⅲ的表达与FoxO1呈正相关(r=0.9015);在心脏毒素注射肌损伤过程中钙蛋白酶Ⅰ(r=0.8987)和钙蛋白酶Ⅱ(r=0.9374)表达趋势与FoxO3a呈正相关。可见,在不同的肌损伤模型中,钙蛋白酶Ⅰ和钙蛋白酶Ⅱ的表达趋势相似,而钙蛋白酶Ⅲ的表达不同。
- 巫荣华徐曼赵攀峰刘梅
- 关键词：心脏毒素肌萎缩FOXO1FOXO3A
- 一种融合有VEGF的丝素蛋白移植物及其制备方法
- 本发明涉及生物医学材料技术领域，尤其涉及一种融合有VEGF的丝素蛋白移植物及其制备方法，步骤包括：合成包含有丝素蛋白轻链以及VEGF的基因片段，连接至pET‑30表达载体，将得到的重组表达载体转入BL21大肠杆菌，得到融...
- 刘炎刘梅顾晓松管徒晨
- 文献传递
