刘庆慧 作品数:100 被引量:436 H指数:12 供职机构: 中国水产科学研究院黄海水产研究所 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 医药卫生 更多>>
甲鱼王罐头的工艺研究 2002年 王彩理 滕瑜 刘庆慧 朱伯清关键词:鳖甲 日本鲟肌动球蛋白热变性和冷冻变性 被引量:8 1999年 研究了日本鲟肌动球蛋白经变性和冷冻后ATPase活性、总流基数和不饱和巯基数及蛋白质浓度的变化。结果表明,热变性后肌动球蛋白Ca2+—ATPase和Mg2+—ATPase活性下降,且Ca2+—ATPase活性有明显转折。低温热变性后对总流基数影响较小,温度增高时,流基数逐渐下降,而不饱和流基数在30℃之前,呈动态变化,之后又逐渐减少。热变性后,肌动球蛋白浓度也降低。冷冻变性后,肌动球蛋白ATPase活性和总巯基数随冷藏时间而明显下降,冷藏温度越低,ATPase活性下降越慢。 刘庆慧 孙耀 王采理 殷丽关键词:肌动球蛋白 热变性 冷冻变性 对虾白斑综合征病毒VP12的原核表达及其与VP24和VP26的相互作用 被引量:2 2013年 根据GenBank上对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白基因VP12(wsv 432)的序列,设计并合成引物,PCR扩增得到VP12基因,构建重组表达载体pBAD/gⅢ–VP12并转化大肠埃希菌Top 10感受态细胞。基因工程菌株在37℃用L-阿拉伯糖诱导,表达产物经Western blot和SDS-PAGE检测显示有与预期大小19ku相符合的目的蛋白。以Co2+亲和层析方法,获得纯化VP12蛋白。采用Far-Western blot结合ELISA方法,分析VP12与WSSV结构蛋白的作用。结果表明,VP12与囊膜蛋白VP24、VP26具有相互作用,该研究对于揭示WSSV分子组装机制,阐明其致病机理具有重要意义。 马方方 刘庆慧 刘庆慧关键词:对虾白斑综合征病毒 原核表达 相互作用 2014年中国不同地区对虾白斑综合征病毒ORF14/15和ORF23/24缺失区序列比较 被引量:4 2016年 对虾养殖面临诸多病害威胁,对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是养殖对虾主要病原之一,WSSV不同地理株的变异可能导致WSSV毒力的变化。为了解2014年中国大部分地区WSSV ORF14/15和ORF23/24的变异情况,本研究选择2014年1月–8月期间采集的48份WSSV阳性样本,用特异引物扩增ORF14/15和ORF23/24片段,连接于T载体,转化至Top10中,筛选阳性克隆,测序分析不同样本之间的缺失差异。结果显示,能够扩增ORF14/15和ORF23/24样品的比例分别为43.75%和33.33%。在ORF14/15扩增中,分别扩增出1260 bp、1270 bp、1892 bp和2662 bp片段,与TH-96-Ⅱ比对共有4种缺失情况,即缺失6540 bp、6530 bp、5908 bp和5138 bp。而在ORF23/24扩增中,分别扩增出1140 bp和1146 bp片段,与中国台湾株(TW)比对有两种缺失情况,即缺失12070 bp和12064 bp。研究结果表明,WSSV在中国大部分地区存在一定程度的变异,而不同毒株之间在ORF14/15可变区差异比较明显,在ORF23/24可变区差异不大,但均具有大片段缺失。 孙新颖 刘庆慧 万晓媛 黄倢关键词:WSSV 中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)coat-ε基因全长cDNA克隆及组织分布 被引量:2 2016年 coat-ε基因表达的蛋白是组成COPⅠ的coatomer复合体的一个亚基,为获得中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)coat-ε基因全长序列,采用cDNA末端快速扩增(Rapid amplification of cDNA end,RACE)技术,扩增出coat-ε基因的3端和5端,测序结果经DNAMAN比对拼接得出coat-ε基因全长,基因全长1402 bp,5非编码区(UTR)84 bp,3'非编码区(UTR)310 bp,开放阅读框1008 bp,预测编码335个氨基酸,其中,第230–300的氨基酸属于TPR超家族,Signal P 3.0 Server预测氨基酸序列没有信号肽,TMHMM Server v.2.0分析此氨基酸不存在跨膜结构,PSORTⅡPrediction预测该蛋白位于线粒体、细胞质、内质网中,属胞内蛋白。系统进化树显示,中国明对虾的coat-ε基因与节肢动物门的动物亲缘关系相近。采用实时荧光定量方法分析该基因在鳃、上皮、胃、肌肉、肝胰腺等不同组织中的相对表达,结果显示,coat-ε在肌肉中的相对转录表达量最高,在鳃和附肢的表达次之。本研究获得的中国明对虾coat-ε全长序列,可为该基因功能研究提供基础。 王修芳 刘庆慧 吴垠 黄倢关键词:中国明对虾 基因克隆 1种可用于检测WSSV蛋白酶的微量酶活测定技术 被引量:1 2002年 以酪蛋白为底物 ,对常规蛋白酶检测方法进行改进并与偶氮酪蛋白法进行比较 ,建立适应病毒微量蛋白酶的快速检测方法。结果表明 ,改进的微量蛋白酶检测方法具有微量、快速、灵敏度高的特点 ,适于病毒微量蛋白酶的检测。蛋白酶的最低检出量可达ng级。 刘庆慧 黄倢 宋晓玲 刘莉关键词:蛋白酶 酶活性 对虾白斑综合症病毒 控制对虾病毒感染的受体阻断剂的筛选方法 一种控制对虾病毒感染的受体阻断剂的筛选方法,它是用病毒与对虾细胞膜蛋白之间的结合分析技术进行病毒受体结合阻断剂的筛选过程,通过比较待筛选物处理对病毒与对虾细胞膜蛋白的结合作用的影响完成筛选。筛选到三种物质对白斑综合症病毒... 黄倢 陆春玲 梁艳 宋晓玲 解飞霞 易志刚 刘庆慧 杨冰 刘莉文献传递 动物胶原的研究进展 被引量:13 2002年 胶原是结缔组织主要成分之一 ,近年来随胶原提制技术的发展和对其性质、结构等方面的深入研究 ,进一步促进了胶原应用的研究。本文就胶原提制技术及其特性。 刘庆慧 李勃生对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)PCR检测方法的建立 被引量:19 2005年 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)病是国际兽疫局(OIE)划定的甲壳类其他重要疾病之一,它分布较广,危害严重,对世界对虾养殖业发展影响重大。本文根据Genbank登录的IHHNV基因序列(AF218266),设计了1对特异性引物,从纯化的IHHNV DNA和感染IHHNV凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)组织DNA中成功地扩增出产物大小为703bp的DNA片段,该对引物对IHHNV DNA的检测灵敏度为19. 85fg(8. 83×103 病毒拷贝),与健康对虾组织DNA、对虾白斑综合征病毒(WSSV) DNA及对虾肝胰腺细小病毒(HPV) DNA无交叉反应。本方法可快速、灵敏、特异地检测出对虾感染和携带IHHNV状况,为对虾健康养殖、无特定病原(SPF)种群选育及流行病调查提供了有效的检测手段。 杨冰 宋晓玲 黄倢 史成银 刘莉 刘庆慧 宋微波WSSV3个编码蛋白的基因密码子偏爱性分析 被引量:20 2005年 运用EMBOSS(TheEuropeanMolecularBiologyOpenSoftwareSuite)的CHIPS(Condon HeterozygosityinaProteinCodingSequence)和CUSP(Createacondonusagetable)程序对WSSV3个编码蛋白的基因密码子偏爱性分析,分析结果与大肠杆菌、酵母及人的密码子偏爱性进行比较。结果显示,WSSV vp37、WSSV vp39及WSSV vp19的Nc(Effectivenumberofcondons)值为49.897、48.640、46.868。3种蛋白的编码密码子使用频率有较大的差异,其在大肠杆菌、酵母及人的密码子偏爱性也有不同,分析结果表明,WSSV vp37和WSSV vp39的密码子与原核生物及人的相差较大,其表达系统选择在酵母较为合适,而WSSV vp19的密码子与原核和真核生物酵母相差较大。 刘庆慧 黄倢 韩文君关键词:WSSV 密码子