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兰家暖: 作品数：20 被引量：87H指数：5; 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>; 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西科技计划项目广西壮族自治区科技攻关计划更多>>; 相关领域：农业科学更多>>

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猪胞内劳森氏菌16SrRNA基因的克隆及序列分析: 胞内劳森氏菌(Lawsonia intracellularis,LI)是猪增生性肠炎的病原,能严重降低饲料报酬率,极大威胁养猪业.国内对该病的报道较少,更未见针对该病原基因的序列分析.本研究设计3条引物,采用半巢式PCR...; 谢丽华肖爱欢兰家暖张宁秦毅斌李茂宁韦英益黄伟坚; 关键词：胞内劳森氏菌; 文献传递

广西猪星状病毒分子流行病学调查被引量：9: 2012年; 为了解猪星状病毒(PAstV)在广西猪群中的流行情况,本研究采用RT-套式PCR(RT-nPCR)方法,对采自广西7个市县29个不同规模化猪场共315份猪腹泻粪便样品进行PAstV检测,并将其中46个PAstV扩增产物进行测序,与PAstV参考株序列进行比对及基因型分析。结果显示,PAstV感染猪场阳性率达82.8%;检测样品阳性率达40.3%;1日龄～30日龄仔猪感染率最高,达44.9%;四季中,春季(2月～4月)感染率最高,为54.3%。另外,遗传进化分析显示本研究克隆获得的46个PAstV序列均属于PAstVⅠ型,其中又可以分为5个亚群。调查结果表明广西猪群普遍存在PAstV感染。; 兰家暖刘磊郭旋张民秀卢冰霞黄福标覃熊慧张宁黄伟坚; 关键词：分子流行病学基因型分析

广西马流感的诊断被引量：5: 2010年; 蒙振亩张民秀侯韶毅覃勇卢桂娟兰家暖廖承球黄伟坚; 关键词：马流感病毒接触性传染病马属动物细菌性疾病

猪星状病毒的分离鉴定及其致病性研究被引量：3: 2012年; 猪星状病毒(porcine astrovirus,PAstV)感染猪后可引起腹泻、呕吐、脱水和生长迟缓等临床症状,对断奶前仔猪侵害尤为严重,对养猪业造成一定的经济损失。本研究对猪星状病毒广西流行株用PK-15细胞进行分离,用RT-nPCR、间接免疫荧光、电镜和免疫印迹分析进行鉴定并进行致病性试验,结果分离到2株具有细胞病变和致病性的猪星状病毒,为进一步研究猪星状病分子生物学、致病机制及构建发病动物模型等奠定了基础。; 兰家暖郭旋刘磊张民秀卢冰霞廖承球黄福标黄伟坚; 关键词：动物试验

广西猪增生性肠炎的PCR诊断被引量：2: 2009年; 兰家暖肖爱欢谢丽华侯韶毅陈云霞黄伟坚; 关键词：猪增生性肠炎 PCR诊断接触性传染病顽固性腹泻猪回肠炎饲料报酬

广西部分猪场猪传染性胃肠炎、流行性腹泻、轮状病毒感染的流行病学调查: 本研究利用多重RT—PCR方法，对从2011年2月至2011年5月年广西南宁、柳州、玉林、贵港4个市、11个规模化猪场发生腹泻的10日龄内的仔猪采集的39份肠内容物样品及采自5头母猪的5份乳样进行传染性胃肠炎病毒(TGE...; 刘芳黄桂群蹇慧黄伟坚兰家暖; 关键词：病毒检测疾病预防; 文献传递

广西猪圆环病毒2型ORF2基因的克隆与序列分析及基因分型分析: PCV是一种小的、二十面体对称、无囊膜、共价闭合、单股环状DNA病毒。病毒粒子直径为17nm,是目前发现的最小的动物病毒。根据PCV的致病性、抗原性及核酸序列,将PCV分为PCV1和PCV2两个血清型,将无致病性的PCV...; 何苹萍秦毅斌兰家暖陈云霞黄伟坚刘芳韦英益; 文献传递

猪胞内劳森氏菌GXNN株4个抗原性候选基因抗原性分析被引量：3: 2010年; 参考GenBank上已发表的胞内劳森氏菌相关蛋白序列,设计了4对引物,分别扩增了4个抗原性候选基因(3个外膜蛋白基因和1个表面脂蛋白基因),并将4个抗原性候选基因构建好原核表达载体后进行原核表达、SDS-PAGE电泳和Western blotting分析。SDS-PAGE电泳检测初步确定重组融合蛋白pET32a-LI0902、pET32a-LI1022能够进行表达,分别得到53、37kDa的条带;Western blotting分析则初步确定pET32a-LI1022具有抗原性。研究结果首次验证胞内劳森氏菌外膜蛋白基因是否具有抗原性,为诊断试剂盒及基因工程疫苗的研制提供理论基础。; 肖爱欢谢丽华廖承球兰家暖李茂宁侯韶毅陆仕勇黄伟坚; 关键词：胞内劳森氏菌抗原性候选基因 SDS-PAGE电泳 BLOTTING

猪圆环病毒2型广西流行株序列比较分析被引量：1: 2009年; 参考GenBank发表的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)全基因组序列,设计引物,通过反向PCR技术,从广西部分市区疑似"高热病"病猪的组织中,扩增9株PCV-2流行株的全基因,并进行了序列测定分析。结果表明,9个PCV-2分离株基因组全长为1767bp或1768bp。同源性比较发现,9个分离株之间的核苷酸同源性为94.6%～99.9%,与GenBank上已发表的国外分离株比较,同源性为94.4%～100%;9个分离株ORF2之间的核苷酸及其所推导的氨基酸序列同源性分别为93.7%～99.4%和93.6%～99.1%;系统发育树显示,其中7个分离株与法国株、新西兰株关系较近,与美国株和加拿大株关系较远;另外2个分离株与澳大利亚株、美国株亲缘关系较近。; 张宁谢丽华何苹萍秦毅斌陈云霞兰家暖廖承球黄伟坚; 关键词：猪圆环病毒2型基因克隆

猪圆环病毒2型ORF2截短基因片段真核表达载体的构建及其DNA疫苗的免疫效果被引量：2: 2009年; 为研究猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2截短基因片段核酸疫苗的免疫效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,用PCR方法扩增出ORF2基因及其截短基因共8个片段[A(ORF2)、B(51～100 aa)、C(101～150 aa)、D(181～235 aa)、E(151～200 aa)、F(51～150 aa)、G(101～235 aa)、H(51～235 aa)],将其插入pcD-NA3.0载体中,成功构建了pcDNA-A、pcDNA-B、pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E、pcDNA-F、pcDNA-G、pcDNA-H。将纯化后的真核表达质粒转染PK-15细胞后,用间接免疫荧光试验检测各个质粒在细胞中的瞬时表达情况。分别用单独免疫和组合免疫的方法免疫小鼠,每只0.15 mg,用ELISA试剂盒检测小鼠血清中的抗体效价,并分析这两种方法的免疫效果。结果显示,6个片段较短的重组质粒(pcDNA-B、pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E、pcDNA-F、pcDNA-G)转染的细胞中均有明显且较亮的荧光出现,而2个片段较长的重组质粒(pcDNA-A、pcDNA-H)及空载体pcDNA3.0转染的细胞中没有荧光出现。在单独免疫组中,这8个片段的真核表达质粒都能刺激机体产生特异性抗体,其中片段较短的pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E的免疫效果比较理想;在组合免疫中,除pcDNA-C-F外,各个真核表达质粒都能产生较高水平且稳定的抗体,其中pcDNA-D-H、pcDNA-B-F的免疫效果最好。表明组合免疫要比单独免疫的效果好。; 张宁李茂宁侯韶毅兰家暖谢丽华黄伟坚冯励韦英益刘芳李军; 关键词：猪圆环病毒2型真核表达重组质粒免疫效果

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