全晓静 作品数:22 被引量:72 H指数:5 供职机构: 武汉大学人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖北省自然科学基金 广西壮族自治区自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
BDNF及其受体TrkB在慢性应激大鼠结肠动力紊乱中的调节作用及其机制 被引量:3 2015年 目的 观察脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸激酶B(TrkB)在慢性应激大鼠结肠动力紊乱中的作用及其机制.方法 将20只Wistar雄性大鼠称重后按完全随机方法分成两组,避水应激组(WAS组)和假避水应激组(SWAS组),每组10只.记录两组在慢性避水应激模型造模期间粪便粒数;酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时定量PCR、Western印迹和免疫组化法检测BDNF和TrkB在大鼠血清及结肠肌层的表达.分别用河豚毒素(TTX)、BDNF和TrkB抑制剂K252a、BDNF孵育各组近端结肠肌条,记录近端结肠环形肌条肌张力的变化.结果 WAS组大鼠造模期间粪便粒数明显多于SWAS组(P<0.05).WAS组大鼠血清BNDF水平高于SWAS组[(158.30±9.82)比(84.68 ±7.80) pg/ml]、结肠肌层TrkB蛋白表达水平高于SWAS组(0.44±0.03比0.30±0.02)(均P<0.05),而肌层BDNF mRNA表达两组差异无统计学意义(P>0.05).TrkB主要在肌层神经元的细胞核表达,且WAS组表达明显强.WAS组近端结肠环形肌条收缩幅度明显高于SWAS组[(0.35±0.02)比(0.22±0.03)g,P<0.05];加入TTX阻断肠神经作用后,WAS组环形肌条收缩幅度仍大于SWAS组[(0.89±0.07)比(0.53 ±0.06)g,P<0.05];用BDNF孵育肌条,记录不同时间点的标准化率(R值),其中孵育6、12 min时两组肌条R值差异有统计学意义(均P<0.05),BDNF能诱导收缩波峰;用K252a孵育环形肌条30 min后加入BDNF,导致BDNF引起的峰值延后且降低.结论 BDNF通过作用于TrkB受体在慢性应激大鼠结肠动力紊乱中发挥一定的调节作用. 樊菡 罗和生 全晓静 唐勤彩 余光关键词:脑源性神经营养因子 P物质对大鼠结肠平滑肌细胞钾钙电流的影响 被引量:5 2015年 目的 研究P物质(SP)对大鼠近端结肠平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流(IBKCa)和L型钙通道电流(ICaL)的影响,探讨其促结肠动力的作用机制.方法 选取健康雄性Wistar大鼠24只,采用RM6240生理信号采集处理系统记录SP对大鼠近端结肠平滑肌肌条收缩的影响;采用全细胞膜片钳技术检测SP对近端结肠平滑肌细胞IBKCa和ICaL的影响.结果 10-7~10-6 mol/L的SP能促进大鼠离体结肠平滑肌纵行肌肌条的自发性紧张性收缩;10-8~10-6mol/L的SP能促进环行肌肌条的自发性收缩(均P <0.05).SP(10-6 mol/L)减低IBKCa,在+60 mV刺激电压下,施加SP干预后,IBKCa电流密度为(11.71±1.65) pA/pF,较对照组的(14.42 ±2.89) pA/pF明显降低(P<0.05);SP(10-mol/L)还增大ICaL,在0 mV刺激电压下,施加SP干预后,ICaL电流密度为(-5.04±0.67)pA/pF,较对照组的(-4.25±0.46)pA/pF明显增大(P<0.01).结论 SP能够促进大鼠离体结肠平滑肌肌条的自发性收缩,且呈浓度依赖性.SP减低IBKCa,增大ICaL.可能是SP促胃肠动力的机制之一. 唐勤彩 罗和生 全晓静 樊菡 余光关键词:P物质 结肠 钙通道 钾通道 吴茱萸碱对大鼠结肠运动的影响 被引量:9 2017年 目的:初步探讨吴茱萸碱对大鼠结肠运动的影响及其可能机制。方法:SD大鼠随机分为对照组和给药组,给药组给予腹腔注射吴茱萸碱2mg/kg,对照组腹腔注射等体积溶剂。采用蛋白印迹法和免疫组织化学方法分别对胆囊收缩素1受体(CCK1R)在结肠的表达进行定量和定位分析,使用生物机能实验系统记录两组肌条自发性收缩活性。结果:给药组大鼠8,12,24h排便量、结肠肌条收缩幅度均低于对照组(P<0.001),而4h排便量两组间的差异无统计学意义(P>0.05);免疫组织化学结果显示,CCK1R在结肠全层皆有弥散表达,但肌层表达最多,且给药组表达较对照组明显;蛋白印迹实验结果表明,与对照组相比,给药组大鼠结肠CCK1R表达上调(P<0.05)。结论:吴茱萸碱可抑制结肠运动,并可诱导结肠CCK1R的表达,为进一步开展治疗肠道动力紊乱的相关药物研究提供一定的理论基础。 操寄望 余光 罗和生 全晓静关键词:吴茱萸碱 结肠动力 内源性硫化氢对慢性应激结肠高动力的影响 被引量:6 2015年 本文旨在探讨内源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)与慢性应激大鼠结肠高动力的关系。大鼠随机分为慢性避水应激(water avoidance stress,WAS)组和假避水应激(sham water avoidance stress,SWAS)组,记录大鼠每日1 h应激期间大便粒数,连续10 d;分别制作结肠平滑肌条,使用生物机能实验系统记录两组肌条自发性收缩活性以及SWAS组H2S合成酶抑制剂预处理后收缩活性;测定结肠内源性H2S的产生浓度;采用免疫组化和Western blot等方法观察结肠内源性H2S合成酶分布及表达。结果显示,WAS组大鼠应激期间大便粒数、结肠肌条收缩的曲线下面积(area under the curve,AUC)均高于SWAS组(P<0.05);WAS组结肠内源性H2S产生量明显低于SWAS组(P<0.001);H2S合成酶胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)在纵行肌条和环形肌条细胞浆、肌间神经元细胞核中强表达,胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)主要表达于肌间神经元胞浆;与SWAS组相比,WAS组大鼠结肠(去除粘膜及粘膜下层后)CBS和CSE的表达下调(P<0.001);H2S合成酶抑制剂明显增加SWAS组肌条收缩的AUC(P<0.001)。以上结果表明,内源性H2S合成酶表达下调、H2S合成减少是慢性应激结肠高动力的原因之一。 刘颖 梁成柏 全晓静 夏虹 罗和生关键词:慢性应激 硫化氢 一氧化氮和硫化氢对大鼠结肠平滑肌钙钾电流影响的比较 被引量:5 2015年 目的比较一氧化氮(NO)与硫化氢(H2S)对大鼠结肠平滑肌细胞钙钾电流的影响,并探讨其抑制结肠动力的机制。方法采用酶消化法分离近端结肠平滑肌细胞,运用全细胞膜片钳技术记录NO供体硝普钠(SNP,200μmol/L)和H2S供体硫氢化钠(NaHS,300μmol/L)对平滑肌细胞L型钙通道电流(ICa,L)和大电导钙激活钾电流(IBK。)的影响。结果膜电位0mV处,SNP和NaHS均显著抑制ICa,L峰值,SNP使峰电流密度由[(-3.76±0.66)pA/pF]降低至[(~2.67±0.42)pA/pF](P〈0.01);NailS使峰电流密度由[(-4.13±0.29)pA/pF]降低至[(-2.73±0.76)pA/pF](P〈0.01);SNP明显抑制L型钙通道I—V曲线,但不影响其电压依赖特性;而NaHS使L型钙通道I~V曲线右移;SNP不影响L型钙通道的激活和失活特性;NariS使L型钙通道的激活曲线和失活曲线均显著右移(P〈0.05);SNP促进IBKc。,使电流密度由[(12.7±1.9)pA/pF]增加至[(14.7±2.1)pA/pF](P〈0.05);NaHS抑制IBKca,电流密度由[(15.5±2.4)pA/pF]降低至[(12.4±2.9)pA/pF](P〈0.05)。结论NO和H2S均抑制大鼠结肠平滑肌细胞(SMCs)收缩,但两者作用机制不同,NO通过抑制L型钙通道,激活BKCa通道抑制平滑肌收缩,而H2S则通过抑制L型钙通道抑制平滑肌收缩,但同时也抑制BKCa通道,其可能参与平滑肌钙稳态的调节。 全晓静 罗和生 陈炜 崔凝 夏虹 余光关键词:一氧化氮 硫化氢 结肠动力 膜片钳术 哨兵息肉与近端结肠癌的相关性及其临床特点分析 被引量:1 2015年 目的 探讨哨兵息肉(即直肠息肉并发近端结肠癌)患者的临床特点及哨兵息肉与近端结肠癌的相关性.方法 回顾性分析2003年1月至2013年12月963例因直肠息肉住院患者的病例资料.按是否并发近端结肠癌将患者分为哨兵息肉组(108例)和单纯直肠息肉组(855例),观察两组内镜下特点、临床病理学特征、治疗与转归情况等,组间差异采用卡方检验进行比较.结果 963例患者总住院时间为4∽33 d,平均年龄为(49.7±9.4)岁,以男性(610例,63.3%)居多.785例患者(81.5%)有排便次数/习惯改变、便血、腹痛、腹胀等非特异性下腹部症状.78例(8.1%)患者有三代血缘内的亲属确诊患肿瘤,亦有部分患者亲属确诊为家族性腺瘤性息肉病(2.2%,21/963).哨兵息肉组的肿瘤标志物阳性率(69.4%,75/108)较单纯息肉组高(6.8%,58/855;χ2=316.285,P<0.01).哨兵息肉患者内镜下近端结肠癌多表现为新生物样环绕管腔生长,但在发现远端直肠息肉直到进镜至近端结肠癌间的肠管并无特殊表现.哨兵息肉组与单纯直肠息肉组相比,哨兵息肉组最大径>l cm的息肉、多发性息肉(息肉数>5枚)、腺瘤性息肉多见[61.1%(66/108)比46.9%(401/855),38.9%(42/108)比11.8%(101/855),83.3%(90/108)比35.6%(304/855),χ2=7.752、55.595、90.544,P均<0.01].哨兵息肉伴发的近端结肠癌以乳头状腺癌和管状腺癌多见,共占75.9%(82/108),亦可见黏液癌及印戒细胞癌等.59.3%(64/108)的伴发结肠恶性肿瘤未穿透浆膜层(即Duke A期和B期),已有远处脏器转移者(即Duke D期)较少(19/108,17.6%).95.6%(817/855)的单纯直肠息肉患者接受了内镜治疗,均痊愈出院;哨兵息肉组中41.7%(45/108)接受外科根治手术,19.4%(21/108)接受内镜黏膜下剥离术.结论 结肠镜检查发现直肠多发的、最大径>1 cm和腺瘤性息肉时,应警� 崔凝 罗和生 刘军 陈炜 全晓静关键词:直肠息肉 结肠肿瘤 结肠镜 结直肠癌患者部分凝血指标变化的临床意义 被引量:1 2015年 目的进一步了解结直肠癌患者部分凝血指标的变化及临床意义。方法选取我院2011年1月-2013年10月收治的结直肠癌患者132例(结直肠癌组),其中有转移的患者为A组(32例),无转移患者为B组(100例);另选取结直肠息肉患者89例(结直肠息肉组)。采用CA7000全自动血凝分析仪测定各组血浆凝血酶原时间(盯)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)和D-二聚体(D—D)。结果结直肠癌组患者血浆PT、TT、FIB、D—D水平较结直肠息肉组有明显增高,差异有统计学意义(P〈0.05),有转移患者与无转移或侵犯患者的TT、FIB、D—D明显增高,且差异有统计学意义(P〈0.05),有转移患者与无转移患者的PT、APTT比较有增高倾向,但差异无统计学意义(P〉0.05)。结论结直肠癌患者血浆FIB与D—D水平增高,提爪患者体内血液处于高凝状态,而PT及TT时间延长提示结直肠癌患者可能有出血倾向,表明凝血功能异常与肿瘤的发生、发展密切相关。 赵宇 罗和生 谭韡 全晓静关键词:结直肠癌 凝血酶原时间 活化部分凝血活酶时间 凝血酶时间 纤维蛋白原 外源性硫化氢及K_(ATP)通道对大鼠慢性应激结肠高动力的调节 被引量:2 2015年 目的:研究外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)及ATP敏感性钾通道(ATP-sensitive potassium channels,KATP)在慢性应激结肠高动力中的作用。方法:制作慢性避水应激(water avoidance stress,WAS)和假避水应激(sham water avoidance stress,SWAS)大鼠模型,观察2组大鼠结肠肌条的收缩活性以及硫氢化钠(Na HS)和格列本脲预处理后对2组大鼠结肠肌条收缩影响并计算Na HS的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50),使用免疫荧光及Western blotting法观察KATP通道各亚基在结肠中的分布及表达。结果:WAS组结肠肌条收缩活性明显高于SWAS组;Na HS浓度依赖性抑制2组大鼠纵行肌(longitudinal muscle,LM)和环形肌(circular muscle,CM)的收缩;WAS组LM和CM的Na HS IC50分别为0.2033 mmol/L和0.1438 mmol/L,均明显低于SWAS组(P<0.01);格列本脲明显增加2组大鼠肌条Na HS IC50(P<0.01);Kir6.1、Kir6.2和SUR-2B在2组大鼠结肠固有肌细胞膜均有分布;WAS组(去除黏膜及黏膜下层后)Kir6.1和SUR2B蛋白表达高于SWAS组(P<0.01)。结论:H2S外源性供体Na HS对慢性应激结肠高动力具有潜在的治疗作用。KATP通道亚基Kir6.1/SUR2B表达增加可能是慢性应激结肠动力紊乱的一种适应性反应。 刘颖 全晓静 夏虹 罗和生关键词:慢性应激 硫化氢 ATP敏感性钾通道 Ca^(2+)/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ在PDGF诱导肝星状细胞胶原合成中的作用 被引量:2 2013年 目的观察Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)对PDGF诱导下人肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)colla-genα1(Ⅰ)合成的影响。方法 CaMKⅡαsiRNA转染对HSC内CaMKⅡα进行干扰,real-time PCR法检测HSC collagenα1(Ⅰ)及TIMP-1 mRNA的表达,Western blot法检测collagenα1(Ⅰ)及MMP-2、TIMP-1表达的变化,ELISA法检测HSC collagenα1(Ⅰ)分泌的变化。结果 CaMKⅡαsiRNA可显著抑制PDGF诱导下HSC collagenα1(Ⅰ)及MMP-2、TIMP-1的转录、蛋白表达以及collagenα1(Ⅰ)的分泌,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CaMKⅡα信号参与了PDGF诱导下HSC collagenα1(Ⅰ)的产生与分泌,同时通过抑制MMP-2、促进TIMP-1的表达而阻止胶原的降解,是肝纤维化发展过程中PDGF信号的重要调控分子和肝纤维化的潜在治疗靶点。 安萍 刘亚玲 全晓静 刘璐 罗和生关键词:CA^2+ 肝星状细胞 血小板源性生长因子 胶原 基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 白介素6通过阻断L型钙离子通道活性抑制急性胰腺炎大鼠结肠纵行肌条收缩 被引量:3 2019年 本文旨在探讨白介素6 (interleukin 6, IL-6)对急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)大鼠结肠纵行肌条收缩的作用及其机制。用雨蛙肽和脂多糖联合诱导法制备AP大鼠模型,用生物机能实验系统观察IL-6对大鼠结肠纵行平滑肌条自发性收缩的影响,用ELISA检测血清IL-6的水平,用免疫组织化学染色法观察IL-6在结肠的表达分布,用全细胞膜片钳技术观察IL-6对结肠平滑肌细胞L型钙离子通道的影响。结果显示,与对照组相比,AP组大鼠结肠平滑肌条收缩幅度显著减小(P <0.05),收缩周期延长(P <0.05);IL-6可延长大鼠结肠平滑肌条收缩周期,但对肌条的自发性收缩幅度无影响。AP组大鼠血清IL-6浓度明显高于对照组,差异具有显著性(P <0.01);对照组大鼠结肠中IL-6表达较弥散,而在AP组结肠腺体、黏膜及黏膜下层中IL-6表达明显增强。IL-6可显著降低大鼠结肠平滑肌细胞L型钙离子通道的峰电流密度。以上结果提示,AP大鼠结肠运动减弱,其机制可能是表达上调的IL-6阻断结肠平滑肌细胞L型钙离子通道活性,进而抑制结肠纵行平滑肌收缩。 唐亚 梁世伟 全晓静 罗和生 刘颖关键词:急性胰腺炎 白介素6 L型钙离子通道 膜片钳