余跃飞
- 作品数：14 被引量：20H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：江西省自然科学基金广东省教育厅自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 核基质与细胞凋亡被引量：1
- 2002年
- 阐述了凋亡过程中 ,核基质所发生的形态、生化变化及相关凋亡基因的表达 ,尤其是凋亡早期便出现核基质蛋白的降解 .核基质是细胞核最基本的组分 ,对维持细胞核形态结构和功能非常重要 ,其主要由核纤层 ,核内骨架及核孔复合体构成 ,在DNA复制、转录、RNA加工转运等事件中起支持作用 .多少年来 ,关于凋亡时细胞核形态及生化改变的分子机理一直未阐明 ,最近对核基质与细胞凋亡的研究取得了重大进展 .
- 余跃飞温博贵
- 关键词：核基质细胞凋亡核基质结合区凋亡基因
- 恙虫病东方体Karp株重组蛋白的免疫原性和免疫保护性的初步研究
- 2004年
- 对恙虫病东方体Karp株的47kDa和56kDa重组外膜蛋白、58kDa重组热休克蛋白、56kDa与47kDa(56-47)和58kDa与47kDa(58-47)双抗原融合蛋白的免疫原性和免疫保护性进行评价.……
- 余跃飞温博海牛东升陈梅玲邱玲高宁
- 恙虫病东方体Karp株56kDa与47kDa外膜蛋白基因的嵌合和嵌合基因在大肠杆菌的表达
- 2004年
- 目的 将恙虫病东方体 (Orientiatsutsugamushi,Ot)Karp株的 5 6kDa和 4 7kDa外膜蛋白基因嵌合 ,并使嵌合基因在大肠杆菌细胞内表达 ,产生双抗原融合蛋白。方法 采用PCR方法 ,从OtKarp株基因组DNA中扩增 5 6kDa蛋白基因片段 ,将该片段分别与原核表达载体pQE30及 4 7kD蛋白基因重组质粒 pQE30 / 4 7连接 ,构建 pQE30 / 5 6及pQE30 / 5 6 - 4 7重组质粒 ;用IPTG诱导转入大肠杆菌内的重组质粒的目的基因表达。结果 SDS -PAGE显示 ,pQE30 / 5 6转化的大肠杆菌产生一约 4 5kDa的融合蛋白和 pQE30 / 5 6 - 4 7转化大肠杆菌产生一约 90kDa融合蛋白 (5 6 - 4 7融合蛋白 ) ,免疫印迹分析显示两融合蛋白均与OtKarp株感染鼠血清产生特异性反应 ,5 6 - 4 7融合蛋白分别与 4 7kDa、5 6kDa重组蛋白免疫的小鼠血清产生特异性反应 ,以及 5 6 - 4 7融合蛋白免疫血清与 5 6kDa和 4 7kDa重组蛋白反应。结论 OtKarp株的 5 6kDa与 4 7kDa外膜蛋白基因嵌合后在大肠杆菌细胞内实现了表达 ,表达的融合蛋白具有 5 6kDa和 4 7kDa外膜蛋白的抗原特性。
- 余跃飞温博海温博贵牛东升陈梅玲魏文进邱玲高宁
- 关键词：恙虫病东方体外膜蛋白基因重组
- 恙虫病东方体Karp株47kDa蛋白成熟肽的克隆与表达被引量：3
- 2003年
- 目的 :克隆表达恙虫病东方体 (Orientiatsutsugamushi,Ot)Karp株 4 7kDa表面蛋白的成熟肽 ,探索其作为疫苗及诊断抗原的可能性。方法 :采用PCR方法 ,从 OtKarp株菌种基因组DNA中扩增出 4 7kDa成熟蛋白基因片段 ,将该片段克隆于原核表达载体pQE30 ,构建成重组质粒pQE30 4 7,转化大肠杆菌 (E coli) ,经IPTG诱导表达 ,SDS_PAGE和Western_blotting检测目的蛋白的表达。结果 :①获得长约 12 72bp的OtKarp株 4 7kDa外膜蛋白基因 ;②SDS_PAGE和免疫印迹显示该重组质粒转化的E coli有一相对分子量约为 4 3× 10 4 的独特蛋白带 ;③重组表达质粒序列分析结果显示pQE30 4 7中插入的基因片段的序列与已报告的OtKarp株 4 7kDa外膜蛋白基因序列基本一致 ,并与已知序列相同。结论 :获得了OtKarp 4 7kDa蛋白基因 ,并在E coli中实现了表达 。
- 余跃飞温博海牛东升温博贵魏文进邱玲高宁
- 关键词：恙虫病克隆克隆免疫原性
- 普氏立克次体120kDa表面抗原N段基因的克隆与表达被引量：3
- 2004年
- 目的 克隆和表达普氏立克次体 (Rickettsiaprowazekii) 12 0kDa外膜蛋白N段基因。 方法 采用PCR方法 ,从普氏立克次体基因组中扩增其 12 0kDa表面抗原N段基因片段 ,将其与原核表达载体 pQE30连接 ,构建重组质粒 pQE30 /2 6kDa,将重组质粒转入大肠杆菌 ,用IPTG诱导大肠杆菌内的目的基因表达。结果 获得长为 717bp的PCR片段 ,序列分析结果与已知普氏立克次体 12 0kDa表面抗原基因一致 ;SDS -PAGE检测表达产物 ,在相对分子量 2 6 .3kDa处有一表达带 ;免疫印迹分析证明它能与普氏立克次体免疫兔血清反应 ;经双波长薄层扫描分析 ,目的蛋白占全菌体蛋白的 2 0 % ;提取表达菌体包涵体检查 ,证明目的蛋白主要存在于包涵体中。结论 普氏立克次体 12 0kDa表面抗原N段基因在大肠杆菌中获得了高效表达 ,该重组蛋白具有良好的免疫反应性。
- 高宁温博海魏文进牛东升邱玲余跃飞陈梅玲
- 关键词：普氏立克次体克隆
- 核基质与肿瘤病毒被引量：1
- 2002年
- 核基质对维持细胞核形态结构和功能非常重要 ,在DNA复制、转录 ,RNA加工转运等过程中起支持作用。细胞恶变以及肿瘤细胞由低度变成高度恶性的过程中 ,都会发生恶性转化。多少年来 ,关于恶性转化时细胞核形态及生化改变的分子机理一直未阐明 ,最近这方面的研究取得了显著进展。现就恶性转化过程中 ,核基质与肿瘤病毒的关系 ,以及它自身所发生的生化变化作一阐述 ,这对探讨细胞恶性转化的分子机制有着重要的生物学意义。
- 余跃飞温博贵
- 关键词：核基质细胞恶性转化肿瘤病毒肿瘤病理学
- 恙虫病东方体58kDa热休克蛋白与47kDa外膜蛋白的基因嵌合及58-47嵌合基因在大肠杆菌中的表达
- 2004年
- 采用PCR方法 ,从恙虫病东方体Karp株基因组DNA中扩增 5 8kDa热休克蛋白的基因 ,将该基因分别与原核表达载体pQE30及 4 7kDa外膜蛋白的基因重组质粒 (pQE30 4 7)连接 ,构建pQE30 5 8及pQE30 5 8 4 7重组质粒 ,用重组质粒转化大肠杆菌。SDS PAGE显示 ,pQE30 5 8和pQE30 5 8 4 7转化的大肠杆菌分别产生一 5 8kDa重组蛋白和一 90kDa的双抗原 (5 8- 4 7)融合蛋白。免疫印迹分析显示Karp株免疫血清能特异识别 5 8kDa重组蛋白和 90kDa融合蛋白 ,90kDa融合蛋白既与 4 7kDa重组蛋白也与 5 8kDa重组蛋白的免疫血清特异反应 ,5 8kDa与 4 7kDa重组蛋白也被 90kDa融合蛋白免疫血清所识别。研究结果证明 5 8 4 7融合蛋白具有恙虫病东方体Karp株 4 7kDa外膜蛋白和 5
- 余跃飞温博海牛东升陈梅玲邱玲
- 关键词：恙虫病东方体热休克蛋白免疫血清外膜蛋白大肠杆菌
- 复宫宁诱导异位子宫内膜细胞凋亡的超微病理学研究被引量：7
- 2001年
- 目的 从超微病理水平探讨中药制剂复宫宁治疗子宫内膜异位症的作用机理 ,观察其是否能诱导异位子宫内膜细胞发生凋亡。方法 用手术移植法复制子宫内膜异位症的大白鼠模型 ,将其分组灌胃给药 4周后 ,再通过透射电子显微镜观察异位子宫内膜细胞是否有凋亡出现。结果 ①肉眼观察 ,用药组的移植物体积明显小于对照组 (P <0 .0 5 ) ,其异位病灶生长受抑制。②电镜下观察各用药组的异位子宫内膜细胞可见凋亡特有的形态学变化。③复宫宁组血清E2 值显著低于对照组 (P <0 .0 5 )。
- 余跃飞肖纯黄桂林温博贵陈云生
- 关键词：丹那唑异位子宫内膜细胞凋亡子宫内膜异位症病理学
- 恙虫病分子疫苗的初步研究
- 恙虫病又称丛林斑疹伤寒(Scrub typhus),是通过恙螨叮咬而传播,临床上主要以突然高热、浅表淋巴结肿大、虫咬处溃疡焦痂和皮疹为特征,其病原体为恙虫病东方体(Orientiatsutsugamushi)。尽管该病可...
- 余跃飞
- 关键词：外膜蛋白免疫原性抗原表位
- 立氏立克次体外膜蛋白B基因片段的克隆与表达
- 2004年
- 目的立氏立克次体(Rickettsia rickettsii)外膜蛋白B(OmpB)基因(ompB)片段的克隆与表达.方法采用PCR方法,从立氏立克次体基因组中扩增其ompB基因片段,将该基因片段与原核表达载体pQE30连接,构建重组原核表达质粒pQE30/ompB;将pQE30/ompB转入大肠杆菌细胞内,用IPTG诱导转化大肠杆菌表达目的基因.结果获得长为1188bp的ompB基因片段,SDS-PAGE分析发现pQE30/ompB转化菌表达了一44kDa蛋白,该蛋白与立氏立克次体免疫兔血清在免疫印迹分析中呈阳性反应,与其它立克次体免疫血清反应呈阴性,用该重组蛋白免疫血清做间接免疫荧光,检测立氏立克次体结果为阳性,而检测贝氏柯克斯体、恙虫病立克次体和普氏立克次体的结果为阴性.结论 pQE30/ompB转化的大肠杆菌表达了ompB基因片段,所产生的重组蛋白具有立氏立克次体抗原特异性和良好的免疫反应性.
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