何仕武
- 作品数：12 被引量：19H指数：2
- 供职机构：昆明理工大学更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究基金国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 一种真菌总蛋白的提取方法
- 本发明提供了一种真菌总蛋白的提取方法，本发明采用简单易行的方法，克服了真菌细胞壁厚而坚韧，胞内蛋白释放困难的特点，成功提取到质量较高的真菌蛋白质组。提取液成分简单，其中提取液Ⅰ包含7~8M尿素、2~2.5M硫脲、1~2m...
- 张琦胡彬彬何仕武魏云林林连兵季秀玲
- 文献传递
- 一种Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶基因及其重组表达载体
- 本发明公开了一种从黏红酵母YM25079中分离的编码Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶的核苷酸序列，其核苷酸序列如SEQIDNO：1所示，该基因编码的氨基酸序列如SEQIDNO：2所示，通过构建重组载体并在酿酒酵...
- 张琦胡彬彬何仕武魏云林林连兵季秀玲
- 文献传递
- 多不饱和脂肪酸与红冬孢酵母低温适应性的关系研究被引量：5
- 2014年
- 以一株产油酵母——红冬孢酵母(Rhodosporidium kratochvilovae)YM25235作为出发菌株,分析其低温生长适应性与细胞膜流动性、膜脂脂肪酸含量的变化和多不饱和脂肪酸合成关键基因——Δ12-脂肪酸脱氢酶基因mRNA表达水平的关系.结果显示,YM25235在5～35℃温度条件下均能生长,最适生长温度为30℃.低温条件下细胞膜流动性明显降低,但是多不饱和脂肪酸质量分数由从30℃时的24.35%增加到15℃时的40.32%,而且15℃时Δ12-脂肪酸脱氢酶基因mRNA水平提高了3.4倍.结果说明低温条件下细胞膜流动性下降,导致多不饱和脂肪酸合成相关基因表达水平提高,使得细胞膜脂中多不饱和脂肪酸含量增加,促进了菌株低温生长适应性.
- 何仕武杨昭杰林连兵季秀玲魏云林张琦
- 关键词：多不饱和脂肪酸
- 一种Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶基因及其应用
- 本发明公开了一种从深黄被孢霉M6-22中分离的Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶基因，其核苷酸序列如SEQIDNO：1所示，编码如SEQIDNO：2所示的氨基酸序列；通过构建重组载体并在酿酒酵母中表达，表达产物具...
- 张琦李凌彦何仕武胡彬彬魏云林林连兵季秀玲
- 文献传递
- mRNA差异显示技术研究低温条件下深黄被孢霉基因的表达差异被引量：2
- 2015年
- mRNA差异显示技术已经广泛应用于研究植物、动物和微生物在各种环境条件下基因的差异表达研究.研究以15℃和30℃培养的深黄被孢霉M6-22菌体为材料,利用mRNA差异显示技术研究两种培养条件下基因的表达差异.经实时荧光定量PCR验证,共获得7条差异片段,相似性搜索结果表明它们是6-磷酸葡萄糖异构酶、单糖核苷酸转运蛋白、Ras1鸟苷酸转移因子、依赖于NAD的苹果酸脱氢酶、Δ12-脂肪酸脱氢酶、CLK4关联的丝氨酸/精氨酸丰富蛋白和假定蛋白,涉及糖酵解、蛋白质修饰、信号传导、脂肪酸合成和mRNA加工等生命过程,表明深黄被孢霉M6-22低温适应性是多种途径协同调控的结果.
- 杨晓霞何仕武赵汝丽魏云林林连兵季秀玲张琦
- 关键词：深黄被孢霉MRNA差异显示技术荧光定量PCR基因表达差异
- 一种Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶基因及其重组表达载体
- 本发明公开了一种从圆红冬孢酵母YM25235中分离的编码Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶的核苷酸序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，通过构建重组载...
- 张琦何仕武李凌彦魏云林林连兵季秀玲
- 一种Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶基因及其重组表达载体
- 本发明公开了一种从圆红冬孢酵母YM25235中分离的编码Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶的核苷酸序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，通过构建重组载...
- 张琦杨晓霞何仕武李凌彦魏云林林连兵季秀玲
- 文献传递
- 一种Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶基因及其重组表达载体
- 本发明公开了一种从黏红酵母YM25079中分离的编码Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶的核苷酸序列，其核苷酸序列如SEQIDNO：1所示，该基因编码的氨基酸序列如SEQIDNO：2所示，通过构建重组载体并在酿酒酵...
- 张琦胡彬彬何仕武魏云林林连兵季秀玲
- 文献传递
- mRNA差异显示技术研究低温条件下深黄被孢霉M6-22基因的表达差异
- 被孢霉属是毛霉目中具有重要经济价值的丝状真菌,它们可以产生一系列多不饱和脂肪酸,包括深黄被孢霉在内的一些种已作为利用微生物法生产多不饱和脂肪酸的主要生产菌。前期的研究表明,深黄被孢霉M6-22具有低温生长适应性,因此本研...
- 何仕武
- 关键词：MRNA差异显示荧光定量PCR功能分析
- 文献传递
- 粘红酵母△^(12)-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和表达被引量：1
- 2015年
- Δ12-脂肪酸脱氢酶一般特异性催化在油酸的Δ12位引入双键转变成亚油酸.为了从粘红酵母YM25079中克隆全长Δ12-脂肪酸脱氢酶基因序列,参考已知的Δ12-脂肪酸脱氢酶基因序列设计基因特异性引物,通过PCR扩增获得到全长为1 353 bp的cDNA序列,序列分析结果表明该序列具有一个编码450个氨基酸的完整开放阅读框,所编码蛋白质的大小为50.9×103.与报道的Δ12-脂肪酸脱氢酶一样,推测的氨基酸序列具有膜整合脂肪酸脱氢酶特异性的3个组氨酸保守区,表明该序列为一个新的编码Δ12-脂肪酸脱氢酶的基因.为了验证其功能,把开放阅读框序列亚克隆到表达载体pYES3/CT,构建重组表达载体pYRGD12,并转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl进行表达.脂肪酸气相色谱(GC)分析表明,该序列所编码的蛋白质具有Δ12-脂肪酸脱氢酶活性,能将油酸转化为亚油酸,亚油酸的含量占酵母总脂肪酸的4.31%.以上结果表明,PCR所获得序列是新的Δ12-脂肪酸脱氢酶基因.
- 杨晓霞何仕武魏云林林连兵季秀玲张琦
- 关键词：粘红酵母亚油酸
