任宪刚 作品数:27 被引量:116 H指数:7 供职机构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 更多>> 发文基金: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 黑龙江省普通高校骨干教师创新能力资助计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 天文地球 更多>>
二元轮回杂交牛育肥效果比较 被引量:3 2005年 引进肉牛品种杂交改良黄牛,提高其肉用生产性能,是我国牛肉生产的主要途径之一.目前,在我国应用的杂交组合大多是用西门塔尔、利木赞、安格斯、夏洛来、皮埃蒙特和比利时蓝等与本地黄牛杂交,并且改良牛在育肥过程中都表现出了良好的肉用价值,但是哪个杂交品种在屠宰性能和牛肉品质上更具有改良优势,更能适应黑龙江垦区肉牛业的发展形势?为此进行了不同品种杂交改良二代以上的优良公牛育肥效果试验. 刘立成 苗树君 任宪刚 李祥辉关键词:屠宰性能 牛肉品质 育肥方法 牛呼吸道合胞体病毒G蛋白的截短表达与鉴定 被引量:11 2008年 将牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)G基因截短成2个片段G1和G2,然后以人工合成的牛呼吸道合胞体病毒G基因为模板,利用PCR分别扩增G1和G2基因片段,其大小分别为570 bp和308 bp。将目的片段定向克隆到pET30a表达载体,酶切及测序鉴定均正确后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导后G1和G2基因片段均获得了表达,且为可溶性表达。利用Ni柱亲和层析法在非变性条件下纯化重组蛋白,经免疫印迹试验鉴定证明纯化的重组蛋白G1具有良好的抗原性和特异性,而重组蛋白G2无反应性。应用纯化的重组蛋白G1进行的间接ELISA与免疫印迹试验在国内牛血清中检测到了BRSV血清抗体。对建立BRSVG蛋白的血清学诊断方法和为开展BRSVG蛋白生物学功能的研究奠定了基础。 冯军科 薛飞 李娇 祖立闯 朱远茂 任宪刚关键词:牛呼吸道合胞体病毒 G基因 克隆 表达O型口蹄疫病毒VP1基因的重组病毒BHV-1的构建与鉴定 被引量:4 2009年 【目的】为了构建表达口蹄疫病毒(O/China/99)VP1基因的牛疱疹病毒1型,将人工合成的口蹄疫病毒VP1基因插入到巨细胞病毒(CMV)启动子之下构建gE基因缺失转移载体。【方法】利用磷酸钙介导转染法将该转移载体与亲本病毒BHV-1/gE-/LacZ+的基因组DNA共转染牛鼻甲细胞后收获增殖的病毒。通过筛选白色病毒蚀斑,得到重组病毒BHV-1/gE-/VP1。【结果】PCR检测结果表明VP1基因已经插入到了重组病毒BHV-1/gE-的基因组中,间接免疫荧光试验和Western blot证实了BHV-1/gE-/VP1中的VP1基因在感染的细胞中获得了表达。【结论】本研究成功地构建了表达口蹄疫病毒VP1基因的重组病毒BHV-1/gE-/VP1,为研制口蹄疫及其他重要牛传染病的BHV-1病毒载体疫苗奠定了基础。 任宪刚 薛飞 朱远茂 童光志 王延辉 冯军科 祖立闯 李娇 史鸿飞 高欲燃关键词:口蹄疫病毒 VP1基因 不同凝固酶基因型牛源金黄色葡萄球菌主要致病因子的检测及分析 被引量:3 2008年 采用PCR的方法对不同凝固酶基因型的30株奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的主要致病因子进行检测,包括α溶血素(α-hemolysin)、β溶血素(β-hemolysin)、白细胞毒素F(LukF)、白细胞毒素S(LukS),结果显示:在28株分离株中检测到LukF和LukS;在8株和3株分离株中检测到β、和α溶血素,其分别占分离株的93%、26.7%和10%。这些致病因子在各基因型菌株间的分布并不表现出相关性,而是广泛的分布在各个基因型菌株间。 任宪刚 朱战波 崔莉 宋佰芬 谭磊 崔玉东 朴范泽关键词:奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 致病因子 凝固酶 草鱼呼肠孤病毒RT-LAMP检测方法的建立 被引量:5 2012年 根据草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的VP6基因序列设计一套RT-LAMP引物,以样品的cDNA为模板,在63℃恒温条件下进行扩增,扩增后加入SYBRGreenI染料染料,可通过肉眼直接观察到颜色变化来判定扩增结果。该方法操作简便,不需要特殊仪器,适用于水产养殖临床上对草鱼呼肠孤病毒的快速诊断。 李玉平 任宪刚 毛洪顺 张宏伟关键词:草鱼呼肠孤病毒 RT-LAMP 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的多克隆抗体制备及鉴定 被引量:6 2011年 为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白的兔源多克隆抗体,本研究利用表达BVDV E2蛋白的重组质粒pET30a-E2转化E.coli BL21(DE3),经诱导表达获得重组E2蛋白。Western blot检测显示纯化蛋白能够与BVDV参考阳性血清反应。以纯化的重组E2蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,病毒中和试验测定其中和效价为1:2048,间接免疫荧光和western blot试验表明其具有良好的反应性和特异性。本研究制备的BVDV重组E2蛋白兔源多克隆抗体可应用于BVDV的检测,同时为进一步建立检测BVDV E2蛋白的ELISA方法奠定基础。 高欲燃 朱远茂 康健 史鸿飞 李娇 任宪刚 冯军科 于作 薛飞关键词:牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白 多克隆抗体 Genomic Sequencing and Molecular Characteristics of A Very Virulent Strain of Infectious Bursal Disease Virus Isolated in China 被引量:3 2011年 [Objective] The paper was to determine the genomic sequence of a very virulent strain of infectious bursal disease virus(IBDV),and study its molecular characteristics.[Method] A very virulent strain(vvIBDV)(HLJ-0504) of infectious bursal disease virus(IBDV) with special characters was isolated in China and its genome was sequenced.[Result] Sequence analysis showed that segment A of HLJ-0504 was derived from vvIBDV,while segment B was from a distinct ancestor.The morbidity and mortality of HLJ-0504 was 100% and 86.7%to SPF chickens,respectively.[Conclusion] vvIBDV with distinct segment B were still circulating and the evolution of IBDV was diversified in China.Besides,it is hard to imagine that the virulence of IBDV is determined solely by segment A or B. 祁小乐 高立 秦立廷 邓小芸 吴关 张礼洲 余飞 任宪刚 高玉龙 高宏雷 王永强 王笑梅关键词:GENOME EVOLUTION VIRULENCE 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌凝固酶基因分型研究 奶牛乳房炎是奶牛最常见的疾病之一,奶牛乳房炎因可以引起产奶量的下降,以及治疗费用的增加等因素而对奶业造成了巨大的损失,尽管多种病原微生物可以引起奶牛乳房炎,但在临床和亚临床的感染中,金黄色葡萄球菌的感染最为广泛,并且治疗... 任宪刚关键词:金黄色葡萄球菌 基因分型 奶牛乳房炎 致病因子 PCR方法 文献传递 牛病毒性腹泻病毒RNA 5'端非编码区的检测与遗传分析研究 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)可引起以牛发热、粘膜糜烂溃疡、白细胞减少、腹泻、咳嗽及怀孕母牛流产或产出畸形胎儿为主要特征的一种传染病,呈世界性分布。目前BVDV是我国养牛业面临的一个 任宪刚 薛飞 李娇 朱远茂 祖立闯 冯军科文献传递 牛传染性鼻气管炎病毒重组gD蛋白间接ELISA方法的建立及应用 被引量:18 2008年 用大肠杆菌表达的牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)重组gD蛋白纯化后作为包被抗原,建立了检测牛传染性鼻气管炎病毒抗体的间接ELISA方法。交叉反应试验表明,该重组抗原与其它常见的5种牛病阳性血清不发生交叉反应;阻断反应试验表明,IBRV病毒悬液能在很大程度上阻断重组抗原与阳性血清的反应,而对阴性血清没有明显影响。在重复性试验中,批内重复的变异系数小于5%,批间重复的变异系数小于15%。与中和试验相比较,符合率、敏感性和特异性分别为84.1%、85.0%和83.4%。应用该诊断方法和本实验室已建立的以IBRV全病毒作为包被抗原的ELISA诊断方法,同时检测了采集于国内11个省份的2012份血清样本,IBRVgD-ELISA检测的平均阳性率为46.0%(926/2012),而且相对于IBRV全病毒ELISA诊断方法的符合率、敏感性和特异性分别为91.9%、94.2%和90.2%。本研究所建立的IBRVgD-ELISA具有良好的敏感性和特异性,为国内IBR流行病学调查提供了一种快速、简便的血清学诊断方法。 祖立闯 朱远茂 王延辉 辛九庆 李娇 任宪刚 冯军科 薛飞关键词:牛传染性鼻气管炎 间接ELISA