代智
- 作品数：73 被引量：289H指数：10
- 供职机构：复旦大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学航空宇航科学技术更多>>
- 血清蛋白质组分析技术筛选肝癌自发抗体被引量：17
- 2005年
- 目的采用血清蛋白质组分析技术(SERPA)筛选、鉴定肝癌自发抗体。方法双向电泳分离肝癌细胞系HCCLM3的总蛋白后将其转膜,肝癌、肝炎和正常组血清各8份与膜免疫印迹,图像分析确定不同血清免疫印迹图谱间的差异点及其与双向电泳图谱的对应关系,最后用基质辅助激光解吸飞行时间质谱进行鉴定。结果建立了高重复性HCCLM3的双向电泳图谱及其肝癌、肝炎及正常组血清的免疫印迹图谱,图谱均点数分别为603、70.75±24.25、68.50±23.44和41.38±15.05,肝癌、肝炎组图谱点数明显多于正常组,但肝癌与肝炎组差异无统计学意义。质谱鉴定确定了核蛋白、细胞骨架、代谢酶及热休克蛋白等五类肝癌自发抗体。结论SERPA是一种高通量筛选、鉴定肿瘤自发抗体的新技术,大量肝癌自发抗体的发现为肝癌进一步的免疫诊断及治疗奠定了基础。
- 冯钜涛刘银坤代智周海军宋海燕钦伦秀金红陆豪杰汤钊猷
- 关键词：肝细胞自身抗体蛋白质组肝癌细胞系蛋白质组分析高通量筛选抗体
- 肝癌肝移植术后肿瘤复发相关蛋白的鉴定及生物信息学分析被引量：3
- 2011年
- 目的 鉴定肝癌肝移植术后肿瘤复发相关蛋白并进行相关生物信息学分析.方法 取肝癌肝移植术后3年患者原发瘤标本,根据肿瘤复发情况,分为复发组（10例）和未复发组（10例）.用双向电泳对两组总蛋白进行分离,质谱鉴定差异蛋白；用Gene Ontology和MetaCore软件进行生物信息学分析；用蛋白印迹法测定核纤层蛋白A/C（lamin A/C）的表达.结果 共鉴定出37个差异蛋白,相对于未复发组,复发组中表达上调2倍以上的蛋白16个,表达下调2倍以上的蛋白21个.按Gene Ontology进行分类发现它们主要分布于细胞浆（27％）和细胞器（24％）；主要参与体内催化反应（38％）和结合反应（24％）等生物学功能.MetaCore数据库分析,发现多种蛋白参与细胞凋亡、细胞死亡、细胞发育过程的信号调控网络.我们应用蛋白免疫印迹对lamin A/C在两组间的差异表达情况进行了再验证,验证结果与质谱结果吻合.结论 肝癌肝移植术后转移复发与多种蛋白表达改变相关,lamin A/C可能为移植后肿瘤转移复发的潜在分子靶点.
- 代智樊嘉周俭刘银坤柏斗胜杨国欢於雷
- 关键词：肝细胞肝移植复发生物信息学
- 肝细胞癌中CD74的表达与预后分析被引量：2
- 2012年
- 目的 研究分析白细胞分化抗原74（duster of differentiation 74,CD74）分子在肝癌组织及肝癌细胞系中的表达水平与肝癌预后的关系.方法 用免疫印迹法（ Western blot,WB）检测高转移潜能肝癌细胞系（ MHCC-LM3、MHCC-97H）、低转移潜能肝癌细胞系（MHCC-97L）及无转移潜能肝癌细胞系（Hep-G2）中CD74的表达；将320例行根治性肝癌切除术患者的肝癌及癌旁组织与5份正常移植供体肝的石蜡包埋标本做成高密度组织芯片,对其用免疫组织化学法检测癌内、癌旁及正常肝组织中CD74的表达水平.Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Logrank法比较组间生存差异,并用Cox比例风险回归模型进行预后影响因素的单因素及多因素分析.结果 肝癌细胞系（ MHCC-LM3、MHCC-97H、MHCC-97L、Hep-G2）中CD74的平均相对表达量分别为0.622±0.078、0.732±0.083、1.224±0.014、1.374±0.006,高转移潜能肝癌细胞系（MHCC-LM3、MHCC-97H）与低转移潜能肝癌细胞系（MHCC-97L）及无转移潜能肝癌细胞系（Hep-G2）各指标间及各组间CD74表达差异均有统计学意义（t值分别为- 13.308、- 16.849、- 10.177、- 13.436、- 17.057,P均＜0.01）,CD74的表达量随肝癌细胞系转移潜能的递减而递增；320份肝癌患者标本中,CD74在癌内组织中阳性表达221份,阴性表达99份,癌旁组织中仅微量表达,5份正常肝组织中均不表达；肝癌患者癌内CD74的表达在不同性别组间差异有统计学意义（x2=3.954,P＜0.05）,而在按年龄、乙型肝炎表面抗原、肝硬化、甲胎蛋白、肿瘤数目与大小、肿瘤包膜、血管侵犯、Edmondson分级及肿瘤、结节、转移分类（tumor、nodes、metastasis classification,TNM）分期等临床病理特征分组的分布差异均无统计学意义（x2值分别为0.053、0.141、1.200、0.000、0.277、1.975、0.263、1.044、0.000、0.433,P均＞0.05）；Kaplan-Meier生存曲线及Logrank分析显示癌内CD74表达阳性者预后较好（x
- 傅修涛代智赵一鸣周正君周俭樊嘉
- 关键词：肝细胞肝肿瘤抗原B淋巴细胞预后
- 热休克蛋白27在转移潜能不同人肝癌细胞系中的表达及机制研究被引量：12
- 2007年
- 利用不同转移潜能肝癌细胞系探讨热休克蛋白27(HSP27)参与肝癌细胞转移潜能形成的可能分子机制.细胞免疫荧光技术、RT-PCR和免疫印迹技术显示,HSP27在转移潜能不同的肝癌细胞Hep3B、MHCC97L和MHCC97H中定位于细胞浆,亦可见于细胞核,HSP27 mRNA和蛋白质的表达水平与肝癌细胞转移潜能呈正相关.高转移潜能肝癌细胞系MHCC97H的HSP27 RNA干扰试验结果显示,HSP27 RNA干扰后MHCC97H的侵袭(MHCC97H组:21.36±2.92;对照RNAi组:19.88±2.23;RNAi组:11.40±2.05)、运动能力(MHCC97H组:26.35±3.29;对照RNAi组:24.43±3.17;RNAi组:10.92±2.27)明显减弱,细胞凋亡显著增加(MHCC97H组:15.12%;对照RNAi组:17.56%;RNAi组:27.64%).同时进行信号转导基因芯片检测发现,HSP27干扰后核因子κB(NF-κB)通路抑制,并且免疫印迹显示细胞核内活化的NF-κBp65减少,细胞内磷酸化IκBα降低.另外,免疫共沉淀检测发现,在肝癌细胞内HSP27可与IKKβ、IκBα共沉淀,且在HSP27RNA干扰后IKKβ与IKKα结合能力下降.这些结果提示,HSP27可能通过参与细胞内NF-κB通路的激活,影响细胞凋亡和细胞运动,在肝癌细胞侵袭转移过程中发挥作用.
- 郭坤刘银坤周海君代智陈洁孙瑞霞孙强玲卢雯静康晓楠
- 关键词：热休克蛋白27信号转导RNA干扰
- 双向电泳-质谱技术筛选肝癌血清标记物被引量：28
- 2005年
- 采用双向电泳-质谱技术筛选肝癌特异的血清蛋白标记物,以利于肝癌的早期诊断和治疗.肝癌、肝炎和正常三组各20例血清先采用超声、高丰度蛋白去除、脱盐预处理以优化双向电泳,图像分析三组血清图谱寻找差异点,基质辅助激光解吸飞行时间质谱对差异点进行鉴定.结果显示,通过样品预处理,血清上样体积平均增加3～4倍,参考胶点数由218个增至332个,白蛋白和免疫球蛋白明显减弱,水平条带明显减少.图谱比较所得37个差异点,经鉴定为7种蛋白.与正常组比较,转铁蛋白、甲状腺素运载蛋白在肝炎和肝癌组低表达,α-1抗胰蛋白酶、凝聚素、铜蓝蛋白、触珠蛋白在肝炎和肝癌组均高表达.α-1抗胰蛋白酶在肝癌组较肝炎组高表达,而热休克蛋白27只在肝癌组表达.上述结果提示,双向电泳-质谱技术可发现肝癌发生发展过程中血清蛋白表达谱质或量的变化,从而为肝癌的早期诊断及治疗奠定基础.
- 冯钜涛刘银坤MOHAMAD RADWAN ALMOFTI代智周海君宋海燕陆豪杰汤钊猷
- 关键词：肝癌蛋白质组学急性反应蛋白热休克蛋白
- 基于液体活检和组学平台的肝癌诊断新技术和个体化治疗新策略
- 周俭樊嘉杨欣荣孙云帆胡捷黄傲周少来高强黄晓武胡博黄晓勇郭玮史颖弘代智王向
- 该项目属普通外科学(320.2710)。
肝癌高居中国癌症死亡率第三位，80％的肝癌病人确诊时已为中晚期而无法手术治疗。该团队针对肝癌早期诊断、转移复发预警和提高肝癌药效做如下贡献：
1.率先建立循环微小核糖核酸(m...
- 关键词：
- 关键词：肝癌药物治疗
- 构建和验证一种基于肿瘤组织的新型基因标签来预测HBV/HCV肝癌患者的预后
- 目的 本研究旨在筛选出HCC 切除术后患者的新型生物标志物。方法 我们从2010 年1 月至2011 年1 月回顾性收集复旦大学附属中山医院肝外科274 例肝癌患者的肝细胞癌组织标本。
- 祝桂琦代智
- 关键词：肝切除分子分类微阵列分析
- 由血浆microRNA组合成的肝癌诊断标志物及一种诊断肝癌的新方法
- 本发明涉及由血浆microRNA组合成的肝癌诊断标志物，含有该标志物的试剂盒，以及一种诊断肝癌(特别是早期肝癌)的新方法。所述的肝癌诊断标志物由多种核酸分子组成，每种核酸分子编码至少一个microRNA序列，优选由编码h...
- 樊嘉周俭代智於雷胡捷王征
- 文献传递
- 大黄素对顺铂所致人胚肺成纤维细胞毒性的作用被引量：1
- 2004年
- 目的 从细胞水平研究大黄素对顺铂引起人胚肺成纤维细胞毒性的效应。方法 采用MTT法检测细胞毒性 ,荧光法检测细胞氧化性损伤。结果 WI 3 8细胞经大黄素和顺铂同时处理 2 2h后 ,大黄素 (3 0mg L)可明显减轻顺铂引起的细胞毒性 ,其IC50 值由 (16± 3 )mg L增加至 (3 4± 6)mg/L ;可使顺铂引起的细胞内氧自由基水平和细胞内脂质过氧化物水平的升高更加明显 ,使顺铂引起的还原性谷胱甘肽含量的下降更加明显。结论 大黄素可对抗顺铂所致WI 3 8细胞毒性 ,但它不能减少顺铂对细胞的氧化性损伤作用 ,大黄素的预防作用与抗氧化机制无关。
- 代智刘银坤仲来福
- 关键词：大黄素顺铂人胚肺成纤维细胞毒性作用氧化性损伤
- 血清蛋白质组学研究中高丰度蛋白的去除被引量：2
- 2011年
- 目的建立血清蛋白质组学研究中高丰度蛋白的去除方法并观察其去除效果。方法应用Agilent公司去除人14种高丰度蛋白的多重亲和排除系统（Human 14 Multiple Affinity Removal System），去除血清中白蛋白、IgG和抗胰蛋白酶等14种高丰度蛋白，并用SDS．PAGE评价去除的效果。结果建立血清中高丰度蛋白的去除方法，可去除白蛋白等14种高丰度蛋白。SDS—PAGE图谱中去除高丰度蛋白后条带更清晰，部分低丰度蛋白得以显现。结论成功建立血清中高丰度蛋白的去除方法，可为下游的蛋白质组学技术奠定基础。
- 杨国欢於雷樊嘉邱双健代智刘盛东贺轶锋刘银坤周俭
- 关键词：血清蛋白质组学高丰度蛋白
