于学薇
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
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- 抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体的表达及初步活性检测被引量：5
- 2011年
- 目的:构建和表达抗血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)/抗CD3双特异单链抗体(bscVEGFR2×CD3),及亲和活性测定。方法:设计抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体基因序列,由公司合成并亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,脂质体法转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),筛选高效分泌表达bscVEGFR2×CD3的克隆株。表达产物经Ni-NTA柱纯化,120 g/L SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定。应用流式细胞术(FCM)检测生物学活性。结果:bscVEGFR2×CD3重组表达载体测序证实序列正确。bscVEGFR2×CD3能够在CHO细胞中进行分泌表达,筛选出6株高表达克隆株。120 g/L SDS-PAGE显示相对分子质量(Mr)约56 000有1条带,与预期相符,Western blot证明anti-His抗体能与这条蛋白条带发生特异性结合。FCM检测bscVEGFR2×CD3能与CD3+jurkat细胞和VEGFR2+A375细胞特异性结合。结论:成功构建和表达抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体,该抗体具有与VEGFR2、CD3特异性结合的免疫学活性。
- 戴丽娟鄢成伟李淑珍陈莉李新禹单瑞辉于学薇唐晓波
- 关键词：CD3VEGFR2
- Kv1.5抗血清制备及Cystatin B原核表达载体构建
- 目的：制备电压门控型钾通道蛋白Kv1.5的多克隆抗体并对其进行特性鉴定。
方法：利用生物信息学方法分析大鼠的Kv1.5蛋白的序列，根据它的亲水性结构、柔韧区、抗原指数及表面概率结构等指标选择一段8个氨基酸序列，据此...
- 于学薇
- 关键词：合成肽多克隆抗体抗血清制备
- 电压门控型钾通道蛋白Kv 1.5抗血清的制备及特性鉴定
- 2010年
- 目的制备电压门控型钾通道蛋白Kv 1.5的多克隆抗体,对其特性进行鉴定。方法利用生物信息学方法分析Kv 1.5蛋白的序列,根据亲水性结构、柔韧区、抗原指数及表面概率结构等指标选择一段8个氨基酸序列,据此合成Kv 1.5多肽片段,并将其与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)偶联作为免疫抗原,免疫新西兰白兔制备抗Kv 1.5抗血清。辛酸-硫酸铵法纯化抗血清,对纯化后的抗血清进行ELISA、Western blot鉴定。结果成功获得抗Kv 1.5合成肽的抗血清,该抗血清效价为1:64 000,可与Kv 1.5合成肽及天然Kv 1.5蛋白出现特异性反应,该抗血清识别的相应抗原的相对分子质量(Mr)为59 kD。同时,Western blot结果显示,所制备的抗血清能识别大鼠心脏天然Kv 1.5蛋白。结论合成的多肽-KLH复合物具有免疫原性,可用于制备相应的抗血清,并且制备的抗血清经ELISA、Western blot鉴定后特异性较好。
- 于学薇李淑珍鄢成伟唐晓波
- 关键词：KV1.5合成肽多克隆抗体
