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万海粟

作品数：20 被引量：113H指数：5
供职机构：天津医科大学总医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金天津市高等学校科技发展基金计划项目“十一五”国家科技攻关计划更多>>
相关领域：医药卫生化学工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 13篇期刊文章
  • 6篇会议论文
  • 1篇科技成果

领域

  • 20篇医药卫生
  • 2篇化学工程

主题

  • 12篇基因
  • 9篇肺癌
  • 6篇肿瘤
  • 3篇人肺
  • 3篇人肺癌
  • 3篇转移相关基因
  • 3篇细胞
  • 3篇相关基因
  • 3篇肺肿瘤
  • 2篇蛋白
  • 2篇多态
  • 2篇多态性
  • 2篇信号
  • 2篇信号通路
  • 2篇通路
  • 2篇突变
  • 2篇肿瘤研究
  • 2篇细胞肺癌
  • 2篇限制性内切酶
  • 2篇耐药

机构

  • 20篇天津医科大学...
  • 4篇四川大学华西...

作者

  • 20篇万海粟
  • 19篇周清华
  • 9篇刘红雨
  • 7篇陈军
  • 7篇吴志浩
  • 7篇孙丽亚
  • 5篇李永文
  • 5篇陈琛
  • 4篇徐克
  • 4篇孟凡荣
  • 3篇吴蘅
  • 3篇范羽
  • 3篇朱文
  • 2篇叶苏娟
  • 2篇朱大兴
  • 2篇郑德杰
  • 2篇蔡春季
  • 2篇冯志华
  • 2篇闫惠琴
  • 2篇滑峰

传媒

  • 12篇中国肺癌杂志
  • 1篇四川大学学报...
  • 1篇第十五届全国...

年份

  • 1篇2015
  • 4篇2014
  • 1篇2012
  • 5篇2011
  • 5篇2010
  • 1篇2009
  • 3篇2008
共 20 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
慢病毒载体及其研究进展被引量：70
2014年
慢病毒载体(lentivirus vector,LV)是目前分子及细胞生物实验中非常有效的工具,在基因转染方面有着许多独特的优势,例如,对细胞是否处于有丝分裂期没有特别的要求,基因转染效率高,可容纳较大基因片段等。本文将就慢病毒载体的来源、分子特征及研究进展等进行综述。
孟凡荣陈琛万海粟周清华
关键词：慢病毒载体RNA干扰
nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株抑制消减cDNA文库的构建被引量：2
2008年
背景与目的已有的研究表明,nm23-H1基因是一个重要的肺癌转移抑制基因,为了筛选与该基因表达相关的差异表达基因,本研究拟构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库,为进一步筛选、克隆与nm23-H1转移相关的基因奠定基础。方法利用抑制消减杂交(suppressive subtractive hybridization,SSH)技术构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)间差异表达基因的正向和反向消减cDNA文库,经蓝白菌落筛选克隆,并PCR反应鉴定。结果成功构建了该两株细胞株差异表达基因的正向和反向消减cDNA文库。经蓝白菌落筛选,正向消减文库总共获得约300个白斑克隆,反向消减文库总共获得约400个白斑克隆,从正反向消减文库中各挑选96个克隆进行PCR扩增检测是否有插入片段,结果显示在挑选的正向文库中有84个克隆有插入片段,反向文库中有83个克隆有插入片段,其片段大小范围为(300-750)bp。结论抑制消减杂交是克隆差异表达基因的有效方法,我们应用SSH法和T/A克隆技术成功建立了nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库。nm23-H1基因在肺癌细胞中的表达可能影响某些转移相关基因的差异表达。
叶苏娟冯志华朱文蔡春季李潞孙丽亚万海粟马力周清华
关键词：肺肿瘤NM23-H1基因抑制消减杂交CDNA文库转移相关基因
应用SYBR greenI荧光PCR研究GSTM1基因多态性与肺癌遗传易感性之间的相关性被引量：9
2010年
背景与目的谷胱甘肽S转移酶M1(glutathione S-transferase M1,GSTM1)基因是参与体内多种致癌物代谢的重要的II相代谢酶,其基因多态性被认为与人肺癌遗传易感性有关。本研究旨在探讨天津地区汉族人群GSTM1基因多态性与肺癌遗传易感性之间的关系。方法采用SYBR green I实时荧光PCR熔解曲线分析方法检测天津地区265例肺癌患者和307例对照者GSTM1基因多态性,应用病例对照研究分析其与肺癌易感性及不同病理类型之间的关系。结果①GSTM1(-)基因型在肺癌组和对照组的分布频率分别为56.6%和57.0%,两组之间无统计学差别(χ2=0.831,P=0.362)。经性别、年龄、吸烟状况调整后分析,携带GSTM1(-)基因型个体未增加患肺癌危险性(OR=0.840,95%CI:0.578-1.221,P=0.362)。②按病理分层分析GSTM1基因型与肺癌各病理类型之间的关系,其中鳞癌、腺癌、小细胞肺癌与其它病理类型肺癌患者GSTM1(-)基因型分布频率分别为65.8%、48.5%、47.8%和52.2%,与对照组相比,不同病理类型患者肺癌危险性均无明显统计学差异(P>0.05)。结论在天津地区人群中GSTM1基因多态性与肺癌遗传易感性之间无相关性。
郑德杰滑峰梅朝蓉万海粟周清华
关键词：GSTM1SYBR基因多态性
“睡美人”转座子及其在肿瘤研究中的应用被引量：2
2008年
转座子,或者叫跳跃基因,最早由美国的细胞遗传学家Mc-Clintock在研究玉米时发现的[1],是指一些能够从一个染色体位置转移到另外的位置的核酸序列。
李永文姚毅冰万海粟周清华
关键词：转座子DNA介导小家鼠肿瘤研究插入突变
不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株转移相关基因的筛选和鉴定
与目的:肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤,肺癌的总治愈率仅有13％～15％,肺癌的远处转移是病人治疗失败的最主要原因.肿瘤的转移是一个多步骤、多阶段发生、多因素参与调控的极其复杂的过程.细...
郭善娴吴志浩陈军万海粟孙丽亚刘红雨徐克梁永刚周清华
关键词：大细胞肺癌
人端粒酶催化亚单位启动子调控nm23-H1基因靶向性表达抑制肺癌转移的实验研究
近年来,有研究者尝试将端粒酶催化亚单位的启动子(hTERTp)作为抗肿瘤基因治疗的调控元件,用于肿瘤的靶向基因治疗.本文以正常人血细胞基因组DNA为模板，克隆人的hTERT启动子，并插入PGL3-enhancer中，构建...
范羽万海粟吴衡尤嘉琮周清华
关键词：肺癌基因调控靶向治疗
文献传递
NM23-H1基因调控肺癌侵袭转移相关基因的研究被引量：3
2010年
目的研究与NM23-H1基因有关的肺癌侵袭转移相关基因。方法在抑制消减cDNA文库的基础上制备基因表达谱芯片。经芯片杂交、克隆测序及同源性分析得到人大细胞肺癌细胞株L9981和L9981-nm23-H1各差异表达基因的信息,再以实时荧光定量PCR技术对筛选出的差异基因作进一步的验证。结果成功制备了人大细胞肺癌细胞株L9981和L9981-nm23-H1差异表达基因的基因表达谱芯片。经测序及同源性分析发现19个差异表达基因。经荧光定量PCR验证发现转染NM23-H1后,L9981细胞中PSMA7、SBDS、ODC1、YARS、CSDA、PTP4A1、SHPRH和TOMM7 8个基因的mRNA表达上调,PKM2和GMNN基因的mRNA表达下调。结论 NM23-H1基因可能为转移相关的上游调节基因,它可通过对下游一系列基因进行调节而实现对肺癌转移潜能的抑制作用。
蔡春季叶苏娟朱文孙丽亚万海粟冯志华马力李璐
关键词：肺癌NM23-H1基因差异表达基因
FLJ20420在人肺癌中表达及其功能研究
与目的：肺癌是临床上常见的恶性肿瘤,占恶性肿瘤的死亡原因的首位,以周清华、陈军教授为首的课题组在研究BAG-1的功能和肺癌的关系及调控BAG-1的基因时,应用BAG-1启动子功能最强的-353---28区的片段为探针,应...
刘宝兴周清华陈军刘红雨郭善娴吴志浩万海粟孙两亚徐克梁永刚
关键词：肺癌蛋白表达功能分析
MicroRNAs与OCT4基因之间的相互作用被引量：8
2015年
OCT4基因是POU转录因子家族中的一员,它能与含八聚体基序(ATGCAAAT)的DNA结合。OCT4是一个关键的转录因子,在未分化胚胎干细胞中参与维持多能性和自我更新性,在许多种癌症包括肺癌、生殖细胞肿瘤、乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌、胃癌、肝癌和卵巢癌中过表达。Micro RNAs(mi RNAs)是一种小的非编码RNA,通过和靶基因m RNA碱基配对来调控m RNA表达,降解m RNA或阻碍蛋白合成。一些mi RNAs被证实在癌细胞中调控干细胞因子如OCT4、NANOG、SOX2和KLF4,进而调控癌细胞的增殖、凋亡、分化、抗药性和免疫性。
陈琛孟凡荣万海粟周清华
关键词：MICRORNASOCT4肿瘤胚胎干细胞多能性
在长载体中引入定点突变的方法
2014年
背景与目的体外基因定点突变是分子生物学实验的常用方法。然而,虽然目前已经报道了多种基因突变的方法,但对于在长的载体序列中引入突变,一般的方法并不太容易实现。方法本研究在我们前期报告的基因突变方法的基础上,描述了一种简单易操作的可在长序列中引入定点突变的方法。这个方法的基本实验程序是:①确定待突变区域,合成一对均含有Type IIs类限制性内切酶位点载体引物,并合成一对互补的突变单链;②在突变区域之外的合适位置上,选择一个桥点,并合成一对均含有Type IIs类的限制性内切酶位点的桥点引物;③利用载体引物序列和桥点引物序列做PCR反应,以扩增载体序列中突变区域外的序列;④利用相应的Type IIs类的限制性内切酶,对以上扩增产物进行酶切;⑤将酶切产物和两个突变单链复性成的突变双链连接,形成突变载体,并转化进受体菌作克隆鉴定。结果为证明我们所报告的方法的有效性,我们在长的载体中进行了测试,结果显示,不但实验操作简单易行,而且突变效率可达到90%以上。结论我们提供了一种有效的在长载体中进行定点突变的方法。
孟凡荣陈琛万海粟周清华
关键词：定点突变TYPE
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