黄轶
- 作品数：31 被引量：39H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- Egr-1基因与新血管生成的关系
- 2005年
- Egr-1基因调节多种基因的转录和正常细胞(包括血管内皮细胞)的增殖、分化,能被各种细胞外信号或组织损伤快速激活,与一些刺激因素(如生长因子、机械力等)相互作用促进新血管的生成。它对组织损伤的修复有潜在的治疗价值。肿瘤生长依赖新血管生成,抑制新血管生成的Egr-1DNA酶、EGR-1辅阻遏物NAB2的应用尤其值得更深入地研究。
- 黄轶曾昭淳
- 关键词：EGR-1新血管生成血管内皮细胞肿瘤
- 应用酵母双杂交方法筛选与鉴定组蛋白乙酰基转移酶hTIP60β相互作用蛋白被引量：1
- 2010年
- 目的克隆人组蛋白乙酰基转移酶TIP60β基因,应用酵母双杂交技术研究筛选与TIP60β发生相互作用的蛋白。方法运用RT-PCR方法从人脑组织克隆TIP60β cDNA,构建酵母双杂交BD诱饵载体pGBKT7-TIP60β,以其为诱饵从成人肝cDNA文库中筛选与之相互作用的阳性克隆,并对阳性克隆进行序列测定和相关生物学分析。结果诱饵载体pGBKT7-TIP60β经双酶切可释放出1443bp DNA片段,与理论值大小一致,测序比对分析表明序列正确。以其为诱饵经酵母双杂交筛选共获得32个克隆,进一步验证与测序分析,最终确认HDAC7A、DMD2、CREB1、BD73、PHF17、AR等9个克隆基因。结论以TIP60β为诱饵利用酵母双杂交系统获得9个基因编码的蛋白,它们很可能与TIP60β转录活性调节功能有关。
- 黄轶曾昭淳
- 关键词：组蛋白乙酰基转移酶酵母双杂交
- pSiRNA-Notch1逆转录病毒载体的构建及对恶性脑胶质瘤细胞的作用被引量：6
- 2007年
- 目的建立逆转录病毒介导的人Notch1基因RNA干扰体外表达体系并观察对恶性脑胶质瘤细胞的作用。方法将人Notch1基因RNAi双链转录DNA片段重组到逆转录病毒质粒Psilencer5.1-H1Retro中,构建成携带人Notch1基因RNAi逆转录病毒载体pSiRNA-Notch1,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染U251和CHG-5恶性脑胶质瘤细胞,用WST-8、RT-PCR和Western blot分别检测对转染细胞活性、人Notch1 mRNA和蛋白表达的影响。结果重组pSiRNA-Notch1质粒经测序鉴定正确。重组逆转录病毒滴度可达224×104cfu/ml,感染U251和CHG-5恶细胞后3d能明显抑制细胞生长,RT-PCR和Western blot检测人Notch1 mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组。结论携带人Notch1基因RNAi双链转录DNA片段的逆转录病毒有明显的抑制恶性脑胶质瘤细胞生长作用,为下一步开展基因治疗恶性脑胶质瘤奠定了基础。
- 尹昌林吕胜青黄轶李光辉唐莉杨辉
- 关键词：恶性脑胶质瘤基因治疗
- 核仁素蛋白调节嗅觉介导素4mRNA表达的研究
- 2014年
- 目的:探讨核仁素(nucleolin,NCL或C23)蛋白与嗅觉介导素4(olfaetomedin 4,OLFM4)mRNA之间是否存在相互作用,以及NCL对OLFM4转录水平的调控。方法:本研究利用RNA染色质免疫共沉淀(RNA chromatin immunoprecipitation assay,RNA chip)结合RT-PCR确定NCL是否能与OLFM4 mRNA相互作用,以及双荧光素酶报告基因试验检测NCL对OLFM4报告基因的影响。结果:在SGC-7901细胞内,NCL能与OLFM4 mRNA结合,且过表达NCL质粒的相对荧光素酶活性约为对照质粒的1.15倍,敲低NCL质粒的相对荧光素酶活性约为对照质粒的0.8倍,NCL对OLFM4具正向调节作用。结论:NCL与OLFM4mRNA可以相互结合,且NCL可以通过增加OLFM4转录水平和延长OLFM4 mRNA的半衰期来增加OLFM4 mRNA的稳定性。
- 安娜吴莉雅宋利华黄轶蒋雪刘先俊
- 关键词：核仁素
- F3-PE40基因的克隆、表达及纯化被引量：1
- 2010年
- 通过质粒提取、PCR扩增构建F3-PE40表达载体转化大肠杆菌,然后进行表达纯化。以pEKH-F3质粒为模板,PCR扩增F3片段,将F3插入克隆质粒PQE80L,转化大肠杆菌,筛选获得含有F3的PQE80L重组载体。提取绿脓杆菌菌株染色体DNA为模板,PCR扩增绿脓杆菌外毒素A催化区(PE40)。然后将PQE80-F3和PE40重组,得到表达PQE80L-F3-PE40载体。转化至大肠杆菌DH5a,BL21,表达融合蛋白F3-PE40。大肠杆菌表达了融合蛋白F3-PE40,表达的融合蛋白量占菌体总体蛋白量的20%。成功地表达了融合蛋白F3-PE40,为进一步大规模表达、纯化F3-PE40功能奠定了基础。
- 朱海兵黄轶曾昭淳
- 关键词：融合基因克隆
- 视频脑电图与发作期SPECT对痫灶定位的对比研究被引量：5
- 2010年
- 目的 探讨视频脑电图（VEEG）、发作期SPECT在术前痫灶定位中的作用.方法 回顾性对比分析48例难治性癫痫患者术前所行长程VEEG与发作期SPECT定位的情况,比较两者定位的一致性.结果 发作期SPECT定位阳性率为94%,VEEG为96%.两者完全一致占46%,部分一致占29%,完全不一致占25%.阳性率及定侧率差异无统计学意义（P＞0.05）,局灶定位差异有统计学意义（P＜0.01）.随访结果显示48例患者中Engel Ⅰ级27例,Ⅱ级10例,Ⅲ级8例,Ⅳ级3例;其中EngelⅠ～Ⅱ级的37例中33例来自两者定位一致的患者.结论 发作期SPECT与VEEG检查有较高的一致性,两者联合应用优势互补,可提高定位准确性,获得良好的手术疗效.
- 杨梅华黄轶杨华安刘仕勇杨辉安宁黄婷刘立红石先俊蔡方成张琴
- 关键词：癫痫脑电描记术单光子发射计算机断层扫描
- 细胞死亡调控基因GRIM19重组腺病毒的构建及在恶性胶质瘤CHG-5细胞中的表达被引量：2
- 2008年
- 目的构建细胞死亡调控基因GRIM19(genes associated with retinoid-IFN-induced mortality 19)重组腺病毒载体,观察GRIM19对病毒包装细胞是否具有细胞毒作用,并验证其对脑胶质瘤CHG-5细胞的感染效率。方法采用PCR方法分别将GRIM19以及EGFP基因亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV,在BJ5183(pAdeasy)菌内同源重组,筛选阳性克隆,酶切测序鉴定,线性化后转染293T细胞进行包装、扩增、纯化,PCR检测病毒上清,TCID50法测定病毒滴度并感染CHG-5细胞后Western免疫印迹法验证GRIM19蛋白表达。结果连接重组后经酶切和测序法筛选出pAd-GRIM19;转染293T包装细胞,观察到绿色荧光蛋白(GFP)明显表达,细胞生长状态良好,未见明显细胞毒作用。Ad-GRIM19及Ad-EGFP初纯病毒经氯化铯梯度离心纯化最终获得约5×1010U/ml与8×1010U/ml滴度的重组病毒;将其体外感染胶质瘤CHG-5细胞,均能达到90%左右的感染率,Western免疫印迹法表明Ad-GRIM19感染组GRIM19蛋白表达明显升高。结论成功构建了携带GRIM19基因的重组腺病毒,为体内外进一步研究GRIM19对脑胶质瘤的作用奠定了基础。
- 姚声涛黄轶曾昭淳唐文渊
- 关键词：腺病毒胶质瘤细胞CHG-5
- 重庆地区儿童地中海贫血的基因突变类型分析
- 袁召建何晓燕王兴斌黄轶邹琳
- 两例伴有发育迟缓和智力障碍的Prader-Willi/Angelman综合征的中国患者染色体15q11q13四倍体和五倍体的研究
- 目的 文献报道15号染色体末端易发生非平衡易位导致基因重组.虽然15q11q13复制常见于发育迟缓和智力障碍患者,但目前15号染色体长臂末端q11q13发生4倍体现象较罕见,至今还未见关于15q11q13四倍体报道.迄今...
- 杨静杨永臣黄轶胡燕陈希孙恒娟包黎明邹琳
- 关键词：发育迟缓染色体检查拷贝数变异
- 文献传递
- 结节性硬化症伴顽固性癫痫脑电图分析及术前定位被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨结节性硬化伴顽固性癫痫的脑电图特点及术前痫灶定位.方法:回顾性分析了37例(其中30例行手术治疗)结节硬化所致顽固性癫痫的多导多形式脑电图特点并结合临床、影像学及发作期ECT等综合定位.结果:局灶性放电(单灶)4例,一侧双灶7例,一侧多灶或双侧改变以一侧优势的17例,双侧镜灶1例,双侧双灶3例,双侧弥散性放电5例.28例患者可定侧,并与影像学检查、临床发作相一致.术中行皮质及深部电图探测,证实了术前定位.本组随访1～6年,平均3.5年.30例患者中有16例获得Ⅰ级(Engel分级),7例获得Ⅱ级,5例为Ⅲ级,2例Ⅳ级.平均智商(IQ)从术前的55.4分提高到64.1分.结论:结节硬化伴顽固性癫痫EEG放电广泛,双灶或多灶性改变为主,大部分可通过多形式多导联脑电图定位,找出痫灶放电优势侧,并结合临床表现、影像学改变及发作期ECT等,找出原发痫灶并予以手术切除,可获得良好的治疗效果.
- 杨梅华黄轶刘仕勇杨华安杨辉安宁石先俊张琴蔡方成
- 关键词：结节性硬化症EEG痫灶定位
