黄昌力
- 作品数：12 被引量：16H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
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- Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因串联表达载体的构建
- 2011年
- 为了构建Ⅰ型鸭肝炎病毒双拷贝VP1基因的原核表达质粒,试验采用RT-PCR技术扩增鸭肝炎病毒VP1基因,将其连接到克隆载体pGEM-T Easy中得到重组克隆质粒pGEM-T-VP1,阳性克隆质粒经鉴定正确后,分别用BamHⅠ、XholⅠ、BglⅡ进行酶切,重组后得到pGEM-T-2VP1,然后将双拷贝VP1基因亚克隆入原核表达载体pET-30a(+)中,得到重组质粒pET-30a(+)-2VP1。结果表明:得到了含有目的基因的阳性克隆。说明Ⅰ型鸭肝炎病毒双拷贝VP1基因原核表达质粒构建成功。
- 李日顺于淼黄昌力曹宗喜王文华张超佚张桂红
- 关键词：I型鸭肝炎病毒
- 鸭肝炎病毒GD株的分离与RT-PCR鉴定分析
- 对一株鸭肝炎病毒(DHV)的分离及其分型进行了研究。取广东某鸭场疑似DHV致死8日龄雏鸭肝脏，肝脏组织经处理后经鸭胚接种分离纯化病毒。分离毒经过动物回归试验、ELD50测定、中和试验等确定分离毒为血清1型DHV，同时通过...
- 黄昌力魏春娅张超轶袁镜乐刘志彬张桂红
- 关键词：鸭肝炎病毒病毒分离逆转录聚合酶链式反应
- 鸭肝炎病毒GD株的分离与RT-PCR鉴定分析被引量：2
- 2012年
- 本研究分离了1株鸭肝炎病毒(duck hepatitis virus,DHV),并对其进行了分型研究。取广东某鸭场疑似DHV致死8日龄雏鸭肝脏,肝脏组织处理后经鸭胚接种分离纯化病毒。分离毒株经动物回归试验、ELD50测定、中和试验等确定为血清Ⅰ型DHV,同时通过RT-PCR检测及序列分析,从基因分型角度也验证分离毒株为DHV-Ⅰ,并将该分离毒命名为GD株。
- 黄昌力魏春娅张超轶袁镜乐刘志彬张桂红
- 关键词：鸭肝炎病毒RT-PCR
- 两株猪繁殖与呼吸征病毒的分离鉴定及遗传变异分析被引量：2
- 2012年
- 从广东省发病猪场采集的组织和血清中分离到两株PRRSV,病料经RT-PCR检测为阳性,通过Marc-145细胞进行传代,可产生明显细胞病变,通过间接免疫荧光可检测到荧光信号,两株病毒分别命名为ZH-GD株和ZS-GD株。对两株病毒的ORF5和Nsp2高变区进行序列测定和分析,结果表明,PRRSV ZH-GD株和ZS-GD株的核苷酸序列与欧洲型代表株LV株间的相似性相对较远,与美洲株经典毒株VR-2332间的相似性分别为88.6%和88.1%,与中国经典美洲毒株CH-1a间的相似性分别为94.4%和93.0%。在Nsp2上有30个氨基酸的缺失,与JXA1、XH-GD等高致病性变异株的Nsp2缺失位置一致。分离的两株PRRSV均属于美洲型的变异株PRRSV。
- 张超轶吴欣伟闫明菲张亮权郭泗虎黄昌力黄震张民泽赵付荣张桂红
- 关键词：PRRSV
- 一株1型鸭肝炎病毒的分离与RT-PCR鉴定
- 对广东某鸭场发生的一例疑似雏鸭病毒性肝炎的病例，进行病鸭肝脏病毒的分离及RT-PCR鉴定，以期为临床检测起到一定得指导意义。雏鸭回归试验表明，分离毒在很大程度上复制出了DHV的流行特点，可鉴定为鸭肝炎病毒。血清中和试验表...
- 黄昌力魏春娅张桂红
- 关键词：肝炎病毒RT-PCR鉴定流行病学
- H3亚型猪流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：6
- 2012年
- 为建立一种快捷、可行的检测H3亚型猪流感病毒(SIV)的方法,本研究根据GenBank中登录的H3亚型SIV HA基因的保守序列,设计合成一对特异性引物,建立了一种检测H3亚型SIV的SYBR GreenⅠ荧光定量检测方法,并进行灵敏度、稳定性和特异性试验,与普通PCR进行比较。研究结果表明,标准曲线的循环阈值与模板浓度呈现良好的线性关系,R2为0.994,CV在0.17%～1.41%之间,具有良好稳定性。除H3亚型SIV外,对H1、H4、H6、H9亚型SIV以及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒和猪圆环病毒2型的检测均为阴性,与普通PCR相比更灵敏。该方法特异性好,准确率高,适于临床分离鉴别H3亚型SIV。
- 郭泗虎王文华张亮权齐海涛曹楠闫明菲黄昌力张超轶张桂红
- 关键词：猪流感H3亚型
- 鸭肝炎病毒GD株的全基因组序列测定与分析
- 2012年
- 为了给在分子水平上研究鸭肝炎病毒(DHV)的致病机理奠定基础,进一步丰富DHV的遗传变异和进化信息,试验采用RT-PCR方法分段克隆获得DHV-1 GD株的全基因组序列并进行序列分析。结果表明:GD株的基因组全长7 690 nt[不含Poly(A)尾],5'端和3'端非编码区长度分别为626 nt和314 nt,单一开放阅读框架(ORF)为627～7 376 nt,编码2 249个氨基酸;GD株与DHV-1参考株比较,其核苷酸和氨基酸同源性分别为94.8%～99.7%和97.7%～99.6%;与中国台湾和韩国新型DHV(DHV-N)相比同源性分别为72.7%～73.2%和81.8%～83.4%;GD株与DHV-1参考株遗传进化关系较密切,处于同一分支,而与DHV-N遗传关系较远,处于不同分支。
- 黄昌力魏春娅黄震张桂红
- 关键词：基因组
- 鸭肝炎病毒A、H株的分离鉴定与全基因组序列分析
- 为了给研究鸭肝炎病毒(DHV)分子水平的致病机理奠定基础，进一步丰富DHV的遗传变异和进化信息。采用RT-PCR方法分段克隆获得DHAV-1 A、H株的全基因组序列并进行序列分析。结果显示，647 nt(不含poly(A...
- 魏春娅黄震黄昌力徐廷川张桂红
- 关键词：鸭肝炎病毒全基因组
- 一株Ⅰ型鸭肝炎病毒全基因组序列分析被引量：1
- 2011年
- 为了研究Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)遗传变异情况,试验采用全基因组序列测定的方法对广东省佛山地区分离到的1株Ⅰ型鸭肝炎病毒进行分析研究。结果表明:不含poly(A)尾的DHV-Ⅰ基因组全长7 690 bp,只含有1个开放阅读框(ORF),编码2 249个氨基酸;将此病毒株与GenBank公布的其他DHV全基因序列进行序列分析,VP1蛋白变异最大,180～220位为高变区,与DHV-Ⅰ参考毒株核苷酸序列同源性在94.0%～97.4%之间,氨基酸序列同源性在97.5%～99.2%之间;对此病毒株进行遗传进化分析,与DHV-Ⅰ参考毒株处于同一分支,与韩国和中国台湾省新型鸭肝炎病毒处于不同分支。
- 于淼李日顺黄昌力张桂红
- 关键词：全基因组
- 2株鸭甲肝病毒的分离及其全基因组序列分析被引量：2
- 2012年
- 为深入研究鸭甲肝病毒(DHAV),本研究通过RT-PCR方法和血清中和法分离鉴定得到两株DHAV(命名为A株和H株)。采用RT-PCR方法分段克隆这两个分离株的全基因组序列。分析结果显示,A株的基因组全长为7 647 nt(不含polyA序列),5'和3'非编码区长度分别为583 nt和314 nt,单一ORF为6 759 nt,编码2 253个氨基酸;H株的基因组全长为7 648 nt(不含polyA序列),5'和3'非编码区长度分别为482 nt和314 nt,单一开ORF为6 852 nt,编码2 284个氨基酸。A和H分离株与DHAV-1参考株比较,其核苷酸同源性分别为93.4%～97%和92.7%～95.8%。遗传进化分析表明,DHAV-1型主要分为两个亚群,这两个病毒分离株分别属于不同的亚群。
- 魏春娅黄震黄昌力徐廷川张桂红
- 关键词：基因组
