鲍文蕾
- 作品数：13 被引量：10H指数：2
- 供职机构：内蒙古大学更多>>
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- 内蒙古白绒山羊翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因克隆及组织表达特性分析被引量：1
- 2014年
- 旨在克隆内蒙古白绒山羊翻译控制肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)基因并分析其表达模式。采用RT-PCR技术扩增TCTP基因编码区cDNA序列,将得到的基因cDNA序列及其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析,利用定量RT-PCR方法检测TCTP基因在绒山羊不同组织中的表达特异性。获得的内蒙古白绒山羊TCTP基因编码区cDNA序列全长519 bp,包含了完整的ORF,编码172个氨基酸残基组成的蛋白质。核苷酸序列与绵羊、牛、猪、人、猴及大鼠的同源性在99%-95%之间。生物信息学分析表明,编码的蛋白质理论分子质量19.6 kD,等电点(pI)4.673,含有一个N端糖基化位点,一个蛋白激酶C磷酸化位点,3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,定位于细胞质中。定量RT-PCR方法检测表明,TCTP基因在绒山羊肾脏、肌肉、胰腺、肝脏、睾丸和脑组织中均有表达,其中在肝脏中的表达量较高,在脑中表达量较低。
- 杨立敏姚睿原郭志新朝格图其布日郑旭鲍文蕾王志钢
- 关键词：基因克隆
- 内蒙古白绒山羊IGF-IR基因cDNA克隆及组织表达特异性分析
- 2012年
- 旨在克隆内蒙古白绒山羊IGF-IR基因并分析其基本表达模式。采用RT-PCR克隆基因,将得到的IGF-IR基因cDNA片段的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。半定量RT-PCR进行组织特异性表达检测。获得了内蒙古白绒山羊IGF-IR基因3'端编码区2 118 bp的cDNA序列(JN200823),编码705个氨基酸残基。核苷酸序列与牛的IGF-IR(XM606794.3)基因同源性为98%,相应的氨基酸序列同源性为99%。SMART分析表明,推导出的编码蛋白具有跨膜域,酪氨酸激酶催化域。半定量RT-PCR检测表明,IGF-IR基因在绒山羊脑、胰腺、肝、肾组织中均有表达。
- 宝梅英赵荷雅杨娇馥鲍文蕾李彬杨军侯鑫王志钢
- 关键词：IGF-IR组织特异性表达
- 构建LEF1基因毛囊特异表达载体并稳定转染胎儿成纤维细胞
- 2011年
- 旨在构建内蒙古白绒山羊(Capra hircus)淋巴样增强因子-1(Lymphoid enhancer factor,LEF1)基因真核表达载体并转染胎儿成纤维细胞,获得稳定表达红色荧光蛋白及毛囊特异性表达LEF1的转基因细胞克隆。以pCDsRed2载体为基本骨架将LEF1基因亚克隆到KAP6-1启动子下游,连接红色荧光蛋白表达元件,构建LEF1基因毛囊特异表达载体pCDsRed-KL。外源表达载体以lipofectamineTM2000介导转染胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得稳定转染的细胞克隆。PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合。测序显示构建的表达载体pCDsRed-KL序列中,LEF1基因正确连接在KAP6-1启动子下游,顺序连接CMV启动子和红色荧光蛋白基因,载体构建正确。脂质体介导的稳定转染效率约为14.0%,经G418筛选得到高效表达红色荧光蛋白转基因细胞克隆。PCR检测显示外源KAP6-1启动子和LEF1基因整合到胎儿成纤维细胞基因组中。
- 李彬鲍文蕾张涛侯鑫郭旭东王潇王志钢刘东军
- 关键词：稳定转染
- 内蒙古白绒山羊LEF1基因皮肤特异性表达载体的构建及转基因细胞系的筛选
- 本研究以皮肤特异性小鼠超高硫启动子(UHS启动子)为前导区,构建了LEFI的皮肤特异性表达载体pCDsRed-UL,筛选稳定转染的细胞系作为核供体,为即将通过核移植和克隆技术获得高产绒量的转基因绒山羊打下基础.
- 李彬鲍文蕾张涛郭旭东王潇侯鑫王志钢刘东军
- mTORC1在鞭毛蛋白诱导炎性细胞因子表达中的调控作用与机制
- 鞭毛蛋白是细菌鞭毛的主要组成成分，是模式识别受体Toll样受体5(toll like receptor5，TLR5)的配体，与TLR5结合导致TLR5胞内TIR结构域结合并激活MyD88(myeloid differen...
- 鲍文蕾
- 关键词：鞭毛蛋白细胞因子炎症反应
- Rheb和FKBP38之间具有相互作用关系的新证据
- mTOR信号通路被认为是细胞生长的中心协调器,它控制着细胞的增值、分化、自噬、凋亡及代谢等多种生理过程。Rheb作为mTOR信号通路的上游调节因子,它激活mTOR的具体机制一直是各国生物学者的关注焦点。Rheb是Ras超...
- 王志钢郑旭王彦凤鲍文蕾刘明涛
- 关键词：信号通路MTORRHEB
- 文献传递
- 内蒙古白绒山羊VEGF164基因cDNA克隆及组织表达特异性分析被引量：4
- 2011年
- 旨在克隆内蒙古白绒山羊血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF164)基因并分析其基本表达模式。采用RT-PCR技术克隆基因,将得到的基因cDNA序列及其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。利用半定量RT-PCR方法进行组织表达检测。获得了内蒙古白绒山羊VEGF164基因编码区cDNA全长序列,扩增片段全长573 bp,包含了完整的ORF,编码190个氨基酸残基。核苷酸序列与绵羊的VEGF164(EU857623.1)基因同源性为99%,相应的氨基酸序列同源性为99%。SMART程序分析表明,ORF编码的蛋白质具有信号肽序列及血小板衍生和血管内皮生长因子家族(PDGF,VEGF)结构域。Psite程序分析表明,有1个蛋白激酶C磷酸化位点,4个酪蛋白激酶磷酸化位点。ProtComp Version 9.0程序分析将其定位于细胞外。RT-PCR检测表明,VEGF164基因在绒山羊脑、心脏、睾丸、胰腺、脾、肾和肺组织中均有表达。
- 鲍文蕾杨娇馥李彬刘俊娥王潇郭旭东王志钢侯鑫刘东军
- 关键词：血管内皮生长因子基因克隆
- 内蒙古白绒山羊转VEGF基因细胞系的建立与VEGF基因新剪接变体(VEGF138)的发现
- 目的：克隆内蒙古白绒山羊 VEGF基因,构建毛囊特异性表达载体pCDsRed2-KV,稳定转染绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选获得稳定表达红色荧光蛋白和毛囊特异表达VEGF的转基因的细胞克隆。检测VEGF基因在皮肤细胞中的表达...
- 鲍文蕾
- 关键词：白绒山羊VEGF基因细胞克隆基因表达
- 文献传递
- 内蒙古白绒山羊FGF5基因克隆及其靶向shRNA表达载体的构建和鉴定被引量：1
- 2014年
- 旨在构建内蒙古白绒山羊成纤维细胞生长因子Ⅴ(Fibroblast growth factor 5,FGF5)基因shRNA真核表达载体(pRNAT-shRNA)。以内蒙古白绒山羊胎儿成纤维细胞总RNA为模板,PCR扩增FGF5基因。设计并合成3条FGF5基因的靶向shRNA序列,分别插入pRNAT-U6.1/Neo载体中,构建重组干扰质粒载体pRNATshRNA1、pRNAT-shRNA2和pRNAT-shRNA3,用脂质体LipofectamineTM2000将各重组干扰质粒转染内蒙古白绒山羊胎儿成纤维细胞,Real time PCR检测FGF5mRNA表达量。结果表明:克隆获得813bp的目的基因,包含了完整的ORF,编码270个氨基酸。核苷酸序列及推导的氨基酸序列与绵羊FGF5基因(NM_001246263.1)及氨基酸序列同源性均为99%。FGF5基因shRNA重组质粒经测序鉴定证明构建成功。重组表达质粒转染绒山羊胎儿成纤维细胞48h后可见绿色荧光表达;pRNAT-shRNA1组、pRNAT-shRNA2组和pRNAT-shRNA3组FGF5的mRNA表达水平均低于干扰空载体对照组(P<0.01),pRNAT-shRNA2对FGF5的表达具有最佳的抑制效应。综上表明,成功构建pRNAT-U6.1/Neo-FGF5表达载体,为探讨FGF5在毛囊生长中的作用奠定了基础。
- 鲍文蕾其布日姚睿原郭志新朝格图王彦凤王志钢
- 关键词：短发夹RNA荧光定量PCR
- Rheb和FKBP38之间具有相互作用关系的新证据
- mTOR信号通路被认为是细胞生长的中心协调器,它控制着细胞的增值、分化、自噬、凋亡及代谢等多种生理过程.Rheb作为mTOR信号通路的上游调节因子,它激活mTOR的具体机制一直是各国生物学者的关注焦点.Rheb是Ras超...
- 王志钢郑旭王彦凤鲍文蕾刘明涛
- 关键词：信号通路MTORRHEB
