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口蹄疫病毒灭活疫苗中VP1基因RNA抽提方法的建立被引量：5: 2009年; 本试验提取疫苗种毒、BEI灭活病毒和白油乳化灭活疫苗病毒中的RNA,并就VP1基因进行了RT-PCR扩增、核酸序列测定和序列比对分析。结果显示,3种来源的VP1基因片段长度均为813 bp,与预期的目标相符,核苷酸序列显示3种方法处理的病毒VP1同源性为100%。说明灭活剂BEI和乳化工艺没有全部破坏口蹄疫病毒VP1基因核酸,为检测疫苗毒株的核酸序列建立了一种方法。; 赵毅雷震王玉红刘宏马文戈黄炯符子华易中薛英; 关键词：口蹄疫病毒灭活疫苗 VP1基因

山羊痘病毒非必需基因区gp024基因的鉴定: 2009年; 为筛选山羊痘病毒(GTPV)的外源基因插入区,本研究以GTPV Pellor株为模板,设计2对引物,PCR扩增AV41株GTPV_gp024基因相邻上下游长度约1.1kb的同源重组片段,分别插入质粒pGPT-EGFP中。插入部位在痘病毒双向启动子p11～p7.5启动的报告基因EGFP-GPT上下游,构建转移载体pEG024,并转染已感染GTPV AV41病毒的LT细胞,经GPT加压筛选7代后得到重组病毒。结果显示,重组病毒稳定表达报告基因EGFP,从而表明GTPV_gp024基因能够作为外源基因的插入区。; 雷震王芳马文戈黄炯符子华于力冉多良; 关键词：山羊痘病毒重组病毒

细粒棘球绦虫成虫表膜抗原特异性基因的筛选及克隆被引量：3: 2009年; 为筛选细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus,Eg）表膜抗原基因或具有诊断性的特异性基因,提取Eg成虫表膜抗原,经ELISA、Western blot对该抗原的免疫学特性进行初步研究。以Eg成虫表膜抗原高免鼠血清为探针,筛选Eg成虫cDNA文库,将阳性噬菌斑的PCR产物和pGEM-T载体连接,转染到DH5α,对得到的重组子进行测序,并进行同源性分析。ELISA检测显示,表膜抗原免疫鼠诱导产生了特异性抗体,Western blot鉴定该抗体能识别Eg成虫表膜抗原、原头蚴、Eg发育不成熟、Eg发育成熟抗原。筛选出6个阳性克隆,DNA片段大小在1~2kb之间。对阳性克隆进行同源性分析,结果与EgP-29mRNA同源性为99%,与Eg14-3-3蛋白mRNA同源性80%-99%。筛选Eg成虫cDNA文库所获得的基因,证明了Eg虫体表膜抗原的存在,有望成为犬细粒棘球绦虫的诊断抗原以及犬抗细粒棘球绦虫的候选基因。; 古努尔.吐尔逊米晓云张壮志雷震石保新巫剑赵莉易忠吐尔洪.依米提张文宝; 关键词：细粒棘球绦虫免疫筛选

山羊痘病毒p32基因原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立被引量：9: 2009年; 为了建立山羊痘病毒(GPV)抗体快速检测方法,本研究通过人工合成密码子优化的GPVp32基因,并在大肠杆菌中进行截短表达(p32-opti)。表达的重组p32-opti蛋白主要以包涵体形式存在,Western blot分析表明,p32-opti与GPV标准阳性血清具有良好的抗原性。以纯化的重组p32-opti蛋白作为ELISA包被抗原,建立间接ELISA抗体检测方法。该方法检测小反刍兽疫、蓝舌病和口蹄疫阳性血清均无交叉反应;与中和试验(VNT)比较,两者的符合率为95.7%;ELISA批内和批间重复性试验显示,OD值的变异系数小于10%。上述结果表明,该ELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性。对来自黑龙江、内蒙古和新疆自治区的390份山羊和绵羊血清进行检测,抗体阳性率为80.2%,表明这些地区的山羊和绵羊群普遍存在羊痘病毒抗体。本研究建立的间接ELISA方法可用于GPV感染的流行病学调查以及疫苗接种动物的抗体水平监测。; 王芳雷震于力; 关键词：GPV P32基因大肠杆菌表达 ELISA

山羊痘病毒“GTPV/_gp024”基因区插入外源基因的表达研究: 山羊痘病毒活载体疫苗是目前山羊痘病毒/(GTPV/)新型疫苗的研究方向。基于山羊痘病毒基因组庞大,复制非必需区多,且具有感染特异性,可以在山羊痘病毒上插入多种免疫原基因,成为活载体疫苗的首选病毒载体。当前对插入位点的研究...; 雷震; 关键词：基因克隆转染重组病毒; 文献传递

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雷震