雷洪恩
- 作品数：15 被引量：51H指数：4
- 供职机构：北京大学第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生一般工业技术自动化与计算机技术电气工程更多>>
- 淫羊藿次苷Ⅱ通过miR-155/eNOS改善人阴茎海绵体血管内皮细胞功能的研究被引量：7
- 2016年
- 目的探讨淫羊藿次苷Ⅱ(ICAⅡ)通过mi R-155/内皮型一氧化氮合酶(e NOS)通路改善糖尿病性人阴茎海绵体血管内皮细胞(HCECs)功能障碍的作用机制。方法经原代分离培养HCECs,随机分为三组:正常+BSA对照组(NC组),Age-BSA联合高糖糖尿病组(DM组),ICAⅡ治疗组(DM+ICAⅡ组,ICAⅡ0.1、1、10μmol/L)。Western blot检测e NOS、晚期糖基化终产物受体(RAGE)蛋白的表达;实时定量PCR检测e NOS及其潜在上游mi RNAs(mi R-155、mi R-543、mi R-31、mi R-429、mi R-200c、mi R-200b)的表达;DAF-FM DA荧光探针法和硝酸盐/亚硝酸盐还原法检测细胞一氧化氮含量;进一步mi R-155过表达慢病毒感染,观察ICAⅡ对HCECs中mi R-155、e NOS和一氧化氮表达的影响。结果 Age-BSA联合高糖刺激下,HCECs中e NOS和RAGE蛋白表达水平分别显著下调和上调;而不同浓度的ICAⅡ可逆转e NOS和RAGE蛋白的表达(P<0.05);且随着ICAⅡ浓度的提高其作用逐渐增强。当HCECs发生糖尿病性功能障碍时,可调控e NOS表达的潜在上游mi RNAs中mi R-155的表达变化最为明显(P<0.05)。且在ICAⅡ干预下,发现糖尿病性功能障碍HCECs中e NOS和一氧化氮的表达恢复上调与mi R-155表达受到抑制有关。进一步利用mi R-155过表达慢病毒感染HCECs后,发现mi R-155表达显著升高,而ICAⅡ可明显抑制其表达(P<0.05);相应地,HCECs过表达mi R-155后,观察到其下游e NOS及一氧化氮表达明显降低,而ICAⅡ干预可显著恢复其表达(P<0.05)。结论 mi R-155/e NOS通路可能在糖尿病性HCECs功能障碍的发生中发挥重要作用,而ICAⅡ可能通过调控mi R-155/e NOS信号通路而发挥改善糖尿病性内皮细胞功能的作用。
- 关瑞礼雷洪恩杨璧铖李辉喜王林郭应禄辛钟成
- 关键词：勃起功能障碍MIR-155一氧化氮合酶内皮细胞功能障碍
- CKJ-Ⅱ(QLX-Ⅱ)型高场强旋磁治疗仪对前列腺癌细胞(PC-3)及前列腺增生细胞(BPH-1)的作用效果及机制
- 目的:应用北京旋磁医疗设备有限公司CKJ-Ⅱ(QLX-Ⅱ)型高场强旋磁治疗仪,通过细胞增殖、流式细胞术试验及蛋白印迹试验等分子生物学手段,评估旋磁治疗仪在防治前列腺癌及前列腺增生的潜在效果及作用机制.方法:分别培养前列腺...
- 雷洪恩许永德关瑞礼高喆珠辛钟成
- miR-155、miR-15a和miR-181c在糖尿病环境下对人阴茎海绵体血管内皮细胞功能障碍的影响
- 关瑞礼雷洪恩许永德杨璧铖李辉喜王林辛钟成
- miR-155、miR-15a和miR-181c在糖尿病环境下对人阴茎海绵体血管内皮细胞功能的影响
- 2015年
- 目的：晚期糖基化终产物AGEs联合高糖（AGE-BSA＋高糖）刺激人阴茎海绵体血管内皮细胞（HCECs）诱导糖尿病环境，观察其对内皮功能相关的miR-155、miR-15a和miR-181c及其靶基因的表达变化影响。方法利用人阴茎海绵体分离鉴定的HCECs，随机分为两组：正常＋BSA组（NC组）、AGE-BSA＋高糖（DM组）。采用蛋白印迹实验检测RAGE蛋白表达确定诱导体外糖尿病环境；采用实时定量PCR来检测miR-155、miR-15a和miR-181c及对应靶基因eNOS、TXNIP、VEGFA、IRS1和KLF6的mRNA表达变化；采用蛋白印迹实验验证靶基因的蛋白表达变化。结果与NC组相比，DM组在AGE-BSA＋高糖刺激下，RAGE基因的mRNA水平和蛋白水平均明显升高；同时观察到miR-155表达明显升高而miR-15a和miR-181c的表达明显降低。miR-155对应的靶基因eNOS的mRNA水平和蛋白水平明显降低；miR-15a对应的靶基因TXNIP的mRNA水平和蛋白水平明显升高，靶基因IRS1的mRNA水平明显升高但蛋白水平变化不明显，靶基因VEGFA的mRNA水平没有显著变化；miR-181c对应的靶基因KLF6的mRNA水平和蛋白表达水平明显升高，而靶基因IRS1的mRNA水平明显升高但蛋白水平变化不明显。结论 HCECs在AGE-BSA＋高糖刺激的糖尿病环境下，miR-155、miR-15a和miR-181c均有显著的表达差异，并负调控它们对应的靶基因eNOS、TXNIP及KLF6发生不同程度的表达变化。结果提示糖尿病环境下的HCECs中多种miRNAs可能参与了糖尿病内皮功能障碍的发生发展过程，其具体的机制有待进一步深入研究。
- 关瑞礼雷洪恩许永德杨璧铖李辉喜王林辛钟成
- 关键词：微RNAS糖基化终产物糖尿病勃起功能障碍
- 褪黑素对糖尿病性勃起功能障碍大鼠的神经保护作用及可能的机制研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨褪黑素(melatonin,MT)对糖尿病性勃起功能障碍大鼠的神经保护作用及可能机制。方法 28只SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,8周后,糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠随机分为DM组和MT组,分别每天腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)和MT。另外12只正常大鼠为N组,每天腹腔注射PBS。治疗4周后,检测各组大鼠阴茎海绵体内压、平均动脉压、阴茎背神经(dorsal penile nerve,DPN)和盆神经节(major pelvic ganglion,MPG)病变情况。对阴茎海绵体纤维化情况、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、p38和p-p38水平也进行了测定。结果 DM组糖尿病大鼠勃起功能明显下降,DPN和MPG发生了明显的神经退行性病变,同时阴茎海绵体内胶原蛋白沉积增多,氧化应激和p-p38蛋白水平升高。褪黑素治疗显著提高了糖尿病大鼠的勃起功能,改善DPN和MPG神经病变,减少胶原纤维沉积并且降低了氧化应激与p-p38蛋白水平。结论 MT治疗可以有效提高糖尿病大鼠的勃起功能,改善阴茎背神经、盆神经节病变,减轻阴茎纤维化情况。其机制可能是通过降低糖尿病大鼠阴茎内氧化应激水平以及抑制p38MAPK信号通路。
- 惠宇周峰雷洪恩杨璧铖辛钟成侯建全
- 关键词：勃起功能障碍糖尿病褪黑素神经保护作用抗氧化P-P38
- 裸鼠肾被膜下阴茎海绵体组织和盆神经节移植的可行性
- 2016年
- 目的:基于组织异体移植技术,研究将正常SD(Sprague-Dawley)大鼠阴茎海绵体组织和盆神经节移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下的可行性。方法:无菌条件下获取SD大鼠阴茎组织和盆神经节,在手术显微镜下将上述组织移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下,分别于移植后1周和4周检测移植物的组织病理学变化及移植物内部细胞增殖情况。结果:移植1周后,移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下的阴茎海绵体组织与正常阴茎海绵体组织形态一致,在阴茎海绵体窦内充满血液;移植4周后,靠近肾的阴茎海绵体组织接近正常组织形态,而远离肾的阴茎海绵体组织表现为纤维化,仍可在阴茎海绵体窦观察到血液。盆神经节移植后1周,移植物内部组织结构与正常盆神经节相近,可见多个"细胞团"样结构存在,在靠近肾的部位有新生血管样结构形成;移植后4周,在远离肾的盆神经节组织内观察到血管存在,"细胞团"样结构仍较明显。此外,移植后4周,移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下的海绵体组织和盆神经节中可见ki67阳性的细胞存在,提示移植物内部分细胞仍存在增殖活性。结论:将正常SD大鼠阴茎海绵体组织和盆神经节移植到裸鼠肾被膜下后,至少可以存活4周,移植物内部组织结构与正常SD大鼠阴茎海绵体和盆神经节组织结构基本一致,可能与肾被膜下提供了移植物所需的局部微环境及移植物内部逐渐形成血液循环有关。
- 许永德关瑞礼吴元翼雷洪恩杨璧铖李辉喜王林郭应禄辛钟成
- 关键词：阴茎海绵体盆神经节
- 淫羊藿次苷Ⅱ对糖尿病环境下人阴茎海绵体血管内皮细胞中miR-181c及其靶基因KLF6、KLF9、KLF10和KLF15的表达影响研究被引量：4
- 2016年
- 目的检测淫羊藿次苷Ⅱ(ICAⅡ)对糖尿病环境下人阴茎海绵体血管内皮细胞(HCECs)中mi R-181c及其靶基因KLF6、KLF9、KLF10和KLF15的表达影响。方法经分离鉴定的原代HCECs,随机分为三组:正常+BSA组(NC组)、AGE-BSA+高糖组(DM组),ICAⅡ治疗组(DM+ICAⅡ组)。蛋白印迹实验检测e NOS和RAGE蛋白水平;实时定量PCR检测mi R-181c在模型中的表达差异;生物学信息网站预测mi R-181c的靶基因;实时定量PCR检测对应靶基因在模型中的变化;蛋白印迹实验验证靶基因KLF6、KLF9及KLF6下游TXNIP蛋白表达水平差异。结果与NC组相比,蛋白印迹实验的DM组在AGE-BSA联合高糖刺激下,e NOS蛋白表达水平明显降低,而RAGE蛋白表达水平明显升高,表明成功构建用于模拟体内的糖尿病模型;而ICAⅡ干预后能够有效恢复e NOS和RAGE蛋白表达(P<0.05)。与NC组相比,实时定量PCR检测结果发现糖尿病环境下mi R-181c表达水平明显降低,而ICAⅡ治疗后可显著提高其表达水平(P<0.05);mi R-181c的靶基因KLF6和KLF9在DM组明显升高(P<0.05),而KLF10和KLF15的m RNA水平无显著差异(P>0.05);ICAⅡ干预后有效降低其KLF6和KLF9的m RNA表达水平(P<0.05)。蛋白印迹实验结果进一步验证了KLF6和KLF9的蛋白水平变化,与上述的KLF6和KLF9的m RNA表达变化结果一致。另外,KLF6作用的下游TXNIP蛋白水平变化在模型下呈现和其一样的变化趋势。结论 AGE-BSA联合高糖刺激下mi R-181c及其靶基因的显著表达差异揭示其参与内皮细胞损伤的发生发展,而ICAⅡ能够有效逆转上述变化,为进一步研究ICAⅡ与mi R-181c信号通路具体的作用机制提供前期依据。
- 关瑞礼雷洪恩唐渊方冬郑卫辛钟成
- 关键词：内皮细胞功能障碍晚期糖基化终产物
- 融合医学在防治勃起功能障碍治疗中的应用前景被引量：4
- 2015年
- 勃起功能障碍（erectile dysfunction，ED）发病率占成年男性50％，其中接近50％的患者为器质性ED，而且这些患者病理变化的轻重程度与疾病轻重程度密切相关。
- 辛钟成雷洪恩
- 关键词：勃起功能障碍
- 旋磁在人前列腺增生BPH-1细胞增殖和凋亡中的作用与机制探讨被引量：2
- 2015年
- 目的 研究旋转磁场在人前列腺增生BPH-1细胞增殖和凋亡中的作用,并就其影响机制作相关探讨.方法 设置空白对照（NC）组和旋转磁场处理（MF）组,不同时间剂量MF组使用CKJ-Ⅱ （QLX-Ⅱ）型高场强旋磁治疗仪分别处理1 min、5 min、10 min和20 min.然后利用CCK-8实验、细胞划痕及免疫荧光染色检测其对细胞增殖迁移影响,利用Annexin V-PE/7-AAD双染流式细胞术法检测其对细胞凋亡影响,利用蛋白印迹实验和免疫荧光检测其对细胞凋亡相关信号通路蛋白表达的影响.结果 与NC组相比,MF组BPH-1细胞经旋转磁场处理后,细胞增殖计数和细胞迁移距离明显降低,细胞增殖核抗原Ki67表达明显降低,细胞凋亡比例明显增加,并且与细胞内p38 MAPK磷酸化水平明显增加及Caspase-3活化蛋白明显增加有关.结论 旋转磁场可使BPH-1细胞发生增殖迁移减弱和凋亡增加,可能与细胞中细胞增殖相关的核抗原Ki67表达减少和细胞凋亡相关的p38 MAPK/Caspase-3凋亡分子信号通路激活有关.
- 雷洪恩许永德关瑞礼杨璧铖李猛惠宇高喆珠辛钟成
- 关键词：前列腺增生旋转磁场细胞增殖细胞凋亡
- HRM-非标记探针法检测CCL2-2518T>C突变方法的建立
- 目的:建立一种高分辨率熔解曲线(HRM)-非标记探针的方法用于检测CCL2-2518 T＞C的单核苷酸多态性(SNP).方法 针对CCL2-2518 T＞C,分别设计出针对野生型和突变型的两个非标记探针,采用HRM-非标...
- 雷洪恩高喆珠许永德辛钟成郭应禄关瑞礼
