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气相色谱质谱法筛查先天性代谢缺陷方法及诊断标准的建立被引量：13: 2015年; 目的建立快速简便、准确可靠、拥有中国人种特异性的独立诊断标准的先天性代谢缺陷(inborn errors of metabolism,IEM)筛查方法。方法建立包含有机酸、氨基酸、糖类、多醇、嘌呤、嘧啶等168种化合物的尿特征代谢物气相质谱筛查谱库,利用尿素酶预处理-气相色谱-质谱法对1 200例IEM高危儿和357例代谢无异常患儿尿液样本中的筛查谱内化合物进行定性、定量检测,依据357例代谢正常患儿尿样本检测结果建立筛查谱内各化合物的基准值,以诊断IEM及非遗传性代谢异常。结果与基准值比较,1 200例高危儿中无代谢异常576例(48.0%),代谢异常624例(52.0%),其中诊断IEM 61例(5.1%),包括甲基丙二酸尿症47例,苯丙酮尿症4例,尿素循环障碍3例,丙酸血症2例,多种羧化酶缺乏2例,枫糖尿症、β-酮硫解酶缺乏症、焦谷氨酸尿症各1例;疑似IEM患儿19例;诊断为继发性代谢异常544例(45.3%)。结论尿素酶预处理-气相色谱-质谱技术方法和本研究建立的代谢性疾病诊断判读体系是协助诊断IEM和非遗传性代谢异常的有效方法。; 张万巧彭薇杨尧刘海洪闫磊陈洪清封志纯; 关键词：先天性代谢缺陷气相色谱质谱尿液分析

737例高胆红素血症足月新生儿的LC-MS/MS氨基酸谱和酰基肉碱谱分析: 目的新生儿高胆红素血症是新生儿常见症状之一,本研究通过分析足月高胆红素血症新生儿的血液氨基酸和酰基肉碱水平与正常足月新生儿的差异,探究其在高胆红素血症发病机制中的作用.方法选择2009年2月至2010年2月入住新生儿...; 刘海洪陈洪清王春枝何玺玉; 关键词：高胆红素血症新生儿串联质谱; 文献传递

慢病毒介导TGF-β1 siRNA对高体积分数氧致新生小鼠肺损伤的影响被引量：6: 2009年; 目的:探讨以慢病毒介导的小分子干扰RNA技术(siRNA)沉默转化生长因子β1(TGF-β1)基因对高体积分数氧致新生小鼠肺损伤的影响.方法:将100只新生昆明小鼠随机分为高氧组、干扰组、阴性干扰组、空气组4组,每组动物25只.分别构建含TGF-β1短发卡RNA(shRNA)及阴性对照序列的PRNAT-u6.2载体,慢病毒包装.于小鼠出生后3d时将两类慢病毒载体以鼻腔吸入法分别导入干扰组和阴性干扰组小鼠肺内.出生后4～14d时将高氧组、干扰组、阴性干扰组小鼠置于含600mL/LO2的氧箱内饲养.空气组仅置空气下饲养.出生后4,7,14,21,28d时分别随机杀取各组5只动物并取左上肺制作石蜡切片,进行组织形态学变化观察,测定放射状肺泡计数(RAC)和肺泡平均截距(MLI).右肺组织以RT-PCR,Western Blot法分别检测TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平.结果:经测序和双酶切鉴定,表达TGF-β1 shRNA的慢病毒载体构建成功;干扰组肺组织TGF-β1 mRNA水平在小鼠出生后4d即明显低于其他3组(P<0.05);出生后7,14,21,28d时干扰组TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平均低于高氧组和阴性干扰组,但高于空气组(P均<0.05).出生后7,14,21,28d干扰组MLI低于高氧组和阴性干扰组而高于空气组(P均<0.05).RAC高于高氧组和阴性干扰组而低于空气组,差异均具有统计学意义(P<0.05).高氧组与阴性干扰组在各时间点上述各项指标的差异无统计学意义.结论:慢病毒载体介导的TGF-β1小分子干扰RNA对高体积分数氧吸入所致新生小鼠肺损伤具有保护作用.; 段江陈洪清李然尹晓娟封志纯北京军区总医院附属八一儿童医院; 关键词：转化生长因子Β1 小分子干扰RNA 高体积分数氧支气管肺发育不良小鼠

胎鼠肺泡Ⅱ型细胞的原代培养及鉴定被引量：6: 2008年; 实验于2007-10/12在北京军区总医院附属八一儿童医院实验室完成。取孕19dSD大鼠胎鼠肺组织进行原代培养,通过IgG包被瓶培养进行筛选纯化。分别于培养24,48,72h后检测细胞的活力;利用共聚焦显微镜及电镜对肺泡Ⅱ型上皮细胞进行鉴定。各时间点Ⅱ型细胞活力均在90%以上,细胞纯度在91%以上,电镜下细胞胞浆内含有丰富的板层小体,细胞表面有微绒毛;共聚焦显微镜下细胞浆中有呈绿色荧光的SP-C阳性表达。胰蛋白酶加胶原酶消化,IgG包被瓶进行筛选所得肺泡Ⅱ型细胞活力及纯度均较高,可以作为肺泡Ⅱ型细胞的原代培养的常规方法;电镜和免疫荧光均可达到鉴定目的。; 刘秀香杨志军陈洪清封志纯; 关键词：原代培养

737例高胆红素血症足月新生儿的LC-MS/MS氨基酸谱和酰基肉碱谱分析: 目的应用串联质谱技术对足月新生儿高胆红素血症患儿的氨基酸和酰基肉碱进行分析，探究氨基酸和酰基肉碱在高胆红素血症发病机制中的作用.方法选择2009年2月至2010年2月本院新生儿科的737例诊断为高胆红素血症的足月新生...; 刘海洪陈洪清王春枝何玺玉; 关键词：高胆红素血症新生儿串联质谱; 文献传递

肌酸激酶同工酶对围产期窒息程度和短期预后的预测价值被引量：2: 2012年; 目的评估血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)的变化与围产期窒息程度及短期预后的相关性。方法采用前瞻性序贯试验研究方案,随机选择245例足月新生儿为研究对象,比较142例窒息新生儿和103例正常新生儿血清CK-MB水平差异,评估CK-MB与围产期窒息严重度指标1min Apgar评分、脐动脉血pH及其短期预后的相关性。结果窒息组CK-MB水平显著高于正常对照组,差异比较有统计学意义(P<0.001)。CK-MB与围产期窒息严重度指标1min Ap-gar评分和脐动脉血pH呈负相关(P<0.001),与围产期窒息短期不利预后呈正相关(P<0.001)。结论血清CK-MB有助于早期预测围产期窒息程度和短期预后。; 谢露陈洪清杨尧郑天尹晓娟; 关键词：围产期窒息缺氧缺血性脑病肌酸激酶同工酶预后

737例高胆红素血症足月新生儿LC-MS/MS氨基酸谱和酰基肉碱谱分析被引量：7: 2013年; 目的分析足月高胆红素血症新生儿的血液氨基酸和酰基肉碱水平与正常足月新生儿的差异,探讨其在高胆红素血症发病机制中的作用。方法选择2009年2月至2010年2月,737例足月高胆红素血症新生儿以及306例正常足月新生儿为研究对象,采集干血滤纸片样品进行串联质谱分析。结果足月高胆红素血症新生儿和正常新生儿血液中9种氨基酸、游离肉碱和11种酰基肉碱水平差异有统计学意义(P<0.01)。结论高胆红素血症新生儿的氨基酸谱和酰基肉碱谱存在某些变化,可能为其病因诊断和治疗提供进一步的依据和线索。; 刘海洪陈洪清王春枝何玺玉; 关键词：高胆红素血症串联质谱新生儿

利用串联质谱法对新生儿ICU及北京周边地区汉族高危儿进行遗传代谢病筛查的结果分析: 利用液相色谱联用串联质谱法(LC-MS／MS)对新生儿ICU的汉族新生儿和北京及其周边地区的汉族高危儿的干血滤纸片，进行氨基酸谱和脂酰肉碱谱的检测，以筛查和诊断先天性遗传代谢病。分析了解中国北京及其周边地区遗传代谢病的发...; 张万巧刘海洪陈洪清闫磊何玺玉; 关键词：新生儿串联质谱法甲基丙二酸血症

有核红细胞预测围产期窒息严重度和短期预后的价值被引量：11: 2011年; 目的评估脐血有核红细胞(NRBC)的变化与围产期窒息严重度及短期预后的相关性。方法采用前瞻性序贯试验研究方案,随机选择245例足月新生儿为研究对象,比较病例组(142例窒息新生儿)和对照组(103例健康新生儿)脐血NRBC水平差异,评估NRBC与围产期窒息严重度指标1 min Apgar评分、脐动脉血pH及其短期预后的相关性。结果窒息组NRBC百分数和绝对数[(15.98±9.68)/100 WBC,(3.28±1.34)×109/L]显著高于正常对照组[(3.47±2.32)/100 WBC,(0.60±0.39)×109/L],差异比较有统计学意义(P均<0.001)。窒息新生儿1 min Apgar评分越低,酸中毒越重,则NRBC水平越高,提示缺氧缺血性脑病越重,围产期窒息短期预后越差(P<0.001)。结论脐血NRBC计数有助于早期预测围产期窒息严重度和短期预后。; 谢露陈洪清杨尧郑天尹晓娟; 关键词：预后有核红细胞

737例高胆红素血症足月新生儿的LC-MS/MS氨基酸谱和酰基肉碱谱分析: 目的新生儿高胆红素血症是新生儿常见症状之一,本研究通过分析足月高胆红素血症新生儿的血液氨基酸和酰基肉碱水平与正常足月新生儿的差异,探究其在高胆红素血症发病机制中的作用.; 刘海洪陈洪清王春枝何玺玉

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陈洪清

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