陈丽丽 作品数:87 被引量:228 H指数:8 供职机构: 南华大学公共卫生学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省自然科学基金 湖南省教育厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 轻工技术与工程 生物学 更多>>
10种预测的鹦鹉热衣原体Ⅲ型分泌系统效应蛋白的定位分析 2020年 旨在分析预测的10种鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)Ⅲ型分泌系统效应蛋白在细胞内的定位,为下一步研究其结构与功能奠定基础。本研究利用计算机辅助的生物信息学方法(Effective T3和BPBAac tool)预测Cps T 3SS效应蛋白。利用分子克隆技术构建重组质粒pGEX-6P-1/目的基因,诱导表达、纯化相应重组蛋白。皮下免疫BALB/c小鼠,制备各重组蛋白的多克隆抗体,ELISA测定其效价。以制备的多克隆抗体为一抗,应用间接免疫荧光法检测假定的效应蛋白在感染细胞中的定位。本研究通过应用Effective T3、BPBAac tool交叉验证,预测了14个Cps T 3SS效应蛋白编码基因:CPSIT_0357、CPSIT_0429、CPSIT_0461、CPSIT_0463、CPSIT_0490、CPSIT_0594、CPSIT_0785、CPSIT_0844、CPSIT_0846、CPSIT_0019、CPSIT_0020、CPSIT_0968、CPSIT_0969、CPSIT_0942,并进行分析。构建了14个靶基因的重组质粒,经IPTG诱导,除CPSIT_0357、CPSIT_0429、CPSIT_0968、CPSIT_0969外,其他10个重组菌分别表达了相对分子质量(M r)与预测M r相近的可溶性蛋白。经GST树脂纯化后,将重组蛋白免疫雌性BALB/c小鼠,血清抗体效价为(1∶32000)^(1∶64000)。IFA细胞内定位观察,发现CPSIT_0844和CPSIT_0846位于包涵体膜,而CPSIT_0461、CPSIT_0463、CPSIT_0490、CPSIT_0594、CPSIT_0785、CPSIT_0019、CPSIT_0020、CPSIT_0942位于包涵体内。本研究鉴定了2种定位于衣原体包涵体膜的效应蛋白和8种定位于衣原体包涵体中的效应蛋白。 伍海英 唐婷 张旭 潘奕良 郭壮 全淑芬 陈丽丽关键词:鹦鹉热衣原体 MyD88、LIGHT和IL-12在鼠衣原体生殖道感染与免疫中的作用研究 沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)是性病病原体之一,主要引起男性非淋球菌性尿道炎、附睾炎、前列腺炎;女性宫颈炎、子宫内膜炎、输卵管炎及盆腔炎,并可导致异位妊娠、不孕、不育等严重并发症,还可促进... 陈丽丽关键词:MYD88 LIGHT IL-12P40 病理损伤 文献传递 JAK/STAT3信号通路在鹦鹉热衣原体抑制细胞凋亡中的作用 孙源彬 符玺宗 周鹏 柏琴琴 陈丽丽AIDS患者血液与脑脊液中真菌检测及药敏分析 被引量:5 2016年 目的分析艾滋病(AIDS)患者血液及脑脊液中真菌种类及其耐药性,为临床诊疗AIDS患者机会性感染提供参考。方法收集2011~2014年某传染病医院接诊AIDS患者的血液和脑脊液标本,对其中病原性真菌进行分离、鉴定,并对新生隐球菌进行药敏分析。结果共分析AIDS患者血液培养阳性标本477份、脑脊液培养阳性标本109份,真菌检出率分别为66.88%(319/477)和66.97%(73/109),其中血液中以马内菲青霉菌检出率最高,为53.04%(253/477),脑脊液中以新生隐球菌检出率最高,占66.06%(72/109)。新生隐球菌对两性霉素B、氟康唑、5-氟胞嘧啶均高度敏感。结论 AIDS患者合并真菌感染率较高,其中常见的是马内菲青霉菌和新生隐球菌。 欧紫娟 陈胜华 蔡恒玲 杨赟 柏琴琴 陈丽丽关键词:新生隐球菌 药物敏感性 LIGHT信号通路在鼠衣原体生殖道感染中的作用 被引量:3 2015年 【目的】初步探讨与单纯疱疹病毒糖蛋白D竞争结合疱疹病毒侵入介体的淋巴毒素类似物(lymphotoxin-like inducible protein that competes with glycoprotein D for herpesvirus entry on T cells,LIGHT)在抗衣原体感染免疫及介导衣原体生殖道病理损伤过程的作用。【方法】用1×104IFUs的Mo Pn经生殖道感染野生型(wild type,wt)、LIGHT KO小鼠,每组一半小鼠于感染后49d,再次感染相同剂量的Mo Pn。每隔3-4 d取生殖道分泌物,测定其中衣原体包涵体的数量。初次感染后80d,处死小鼠,眼眶取血,分离血清,用间接免疫荧光法测定其中抗体类型及效价;同时分离生殖道,肉眼观察其输卵管、子宫角水肿程度,然后甲醛固定、切片,H&E染色后,显微镜下观察各组织炎性浸润程度和管腔水肿程度。分离小鼠脾细胞,体外用衣原体EB刺激,测定上清中IL-4、IL-5、IL-17和IFN-γ等细胞因子水平。【结果】LIGHT KO小鼠阴道带菌时间与wt组相当,大部分小鼠均在原发感染后28d左右完全清除感染,且均产生对再次感染的免疫力。LIGHT KO和wt小鼠子宫角和输卵管均出现一定程度的病变,但差异无统计学意义。两组小鼠在原发和继发感染Mo Pn后,均产生高效价的特异性抗Mo Pn Ig G抗体,总抗体及各Ig G抗体亚类效价差异均无统计学意义(P>0.05),且Ig G2a/Ig G1比值均大于1。和wt小鼠一样,LIGHT KO小鼠脾淋巴细胞经衣原体再次刺激后均可产生较高水平的IFN-γ和IL-17,且未能检测到IL-4和IL-5。【结论】小鼠抗Mo Pn生殖道感染及Mo Pn引起的生殖道病理损伤不依赖于LIGHT信号通路。 陈丽丽 孙源彬 徐莎 符玺宗 周洲 陆春雪 杨菲 许桂莲 吴移谋关键词:泌尿生殖道感染 病理损伤 鹦鹉热嗜衣原体禽鸟株的分离鉴定及小鼠呼吸道感染模型的建立 被引量:5 2010年 【目的】优化鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophila psittaci,C.psittaci,Cps)禽鸟株分离培养技术,建立Cps呼吸道感染的小鼠模型。【方法】从禽鸟肝组织中抽提总DNA,PCR法体外扩增Cps ompA基因,初步鉴定Cps阳性标本;同时将阳性标本的肝组织匀浆液接种到HeLa和Vero细胞中培养,Giemsa和免疫荧光染色法鉴定衣原体包涵体。将临床株扩大培养后,用2×104、2×105、2×106 IFU三个剂量鼻内接种小鼠,分别于感染后5 d和10 d处死小鼠,显微镜观察受染小鼠各脏器病理变化。【结果】采用PCR扩增Cps ompA基因,从100只禽鸟标本中检测到阳性Cps标本6例(6%),并成功地在HeLa及Vero细胞中培养出3例,且Vero细胞内的衣原体包涵体体积大,结构致密,对衣原体感染引起的宿主细胞溶解耐受性较HeLa细胞强,更适合用于Cps的分离培养及体外研究。成功建立Cps的鼠呼吸道感染模型,105 IFU是建立Cps呼吸道感染小鼠模型的适宜菌量。【结论】优化了Cps禽鸟株的分离培养技术,成功建立了Cps呼吸道感染小鼠模型,为Cps流行病学调查及研究衣原体的致病性和致病机制奠定基础。 唐国芳 陈丽丽 刘良专 李忠玉 王绍胜 徐磊 吴移谋关键词:动物模型 LIGHT与疾病的关系研究现状 被引量:1 2013年 LIGHT/TNFSF14是肿瘤坏死因子超家族第14个成员,能够与HVEM和LTβR结合,调节免疫系统功能,并参与多种生理病理过程。近年来大量研究表明,LIGHT及其信号通路与多种自身免疫病、移植物抗宿主病、病原体感染以及肿瘤的发生发展有密切关系。就目前知道的LIGHT在各种疾病中的作用综述。 徐莎 陈丽丽关键词:LIGHT 自身免疫性疾病 移植物抗宿主病 肿瘤 研究生卫生检验检疫实验技术课程教学改革 卫生检验检疫实验技术是卫生检验学专业研究生重要的专业课程.该课程主要涉及理化、微生物等检验技术,实践性特别强.熟练掌握卫生检验检疫相关实验技术,非常有利于学生从事课题研究及今后的实践工作.针对该课程教学中存在的问题,将任... 徐小娜 杨胜园 柏琴琴 陈丽丽 邓仲良关键词:研究生教育 任务驱动式教学法 社区外环境中细菌种群分布及耐药性检测 被引量:10 2007年 目的:分析与监测H市4个不同功能区外环境(食物、空气、水、土壤)中微生物分布特点及与感染性疾病相关病原菌的耐药性。方法:按《全国食品污染物监测相关实验室操作手册》(细菌学部分),《公共场所空气微生物检验方法》,《公共场所集中空调通风系统卫生规范》及其它相关国家标准分离、鉴定各类标本的有关细菌。用纸片琼脂扩散(K-B)法测定有关细菌耐药性。结果:H市主要食品均不同程度遭食源性致病菌污染,其中以猪肉、鸡肉污染最严重。沙门菌在7类食品中检出率最高(13.72%,63/459);A区超市集中空调冷却塔水军团菌检出率最高(20%,14/70);社区室外空气细菌浓度以A区交通枢纽最高(6449 cfu/m3),室内空气以A区超市购物厅、医院门诊大厅细菌污染严重(相应是9154,5049 cfu/m3),B区污水沟边土壤、D区莱地土壤污染严重,并检出肠道致病性细菌;检自食物、空气、土壤的金黄色葡萄球菌及革兰阴性菌对常用抗生素亦显示了相应耐药率。结论:以上结果可作为H市在制订公共卫生及感染性疾病的预防、控制等策略时的参考依据。 高仕瑛 杨赟 邓仲良 陈丽丽关键词:耐药性 预防医学实验方法与实践技能课程教学探讨 被引量:5 2010年 为培养更多合格的预防医学人才,南华大学公共卫生学院整合教学资源开设预防医学实验方法与实践技能课程,积极探索多种教学方法和手段,提出预防医学"三三"教学模式,提高了学生自主学习、自主创新和社区实践的能力。 邓仲良 让蔚清 龙鼎新 赵英 张朝晖 王婧 李程 陈丽丽 王穆关键词:启发式教学 问题式教学 社区教育