郭文武 作品数:137 被引量:962 H指数:17 供职机构: 华中农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国际科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 理学 更多>>
依据多倍体形态特征快速高效发掘柑橘四倍体 被引量:20 2020年 基于柑橘多胚性品种存在珠心细胞自然加倍的特点,建立了基于种子催芽、生长室实生播种、幼苗"观根辨叶看油胞"形态初选和流式细胞仪倍性鉴定的发掘柑橘四倍体的快速方法。采用该方法,分别从无酸甜橙、红江橙、贡柑、年橘、新会柑、滑皮金柑的432、506、1 356、1 870、2 749和685株实生苗中,发掘出疑似四倍体5、6、5、17、45、7株;通过倍性检测,从上述6个品种分别获得四倍体4、5、5、14、39、5株,形态初选准确率分别为80.0%、83.3%、100.0%、82.4%、86.7%和71.4%。与之前的四倍体发掘方法相比,本方法四倍体初选准确率高,并且从种子播种到获得四倍体植株耗时不超过40 d。SSR分子鉴定表明,所鉴定的四倍体均来自其二倍体品种珠心细胞自然加倍形成的双二倍体,为柑橘三倍体无核育种提供了珍贵的四倍体亲本资源。 周锐 解凯东 王伟 彭珺 谢善鹏 胡益波 伍小萌 郭文武关键词:柑橘 多倍体 流式细胞仪 SSR分子标记 国庆1号温州蜜柑原生质体培养再生植株 被引量:2 2004年 通过对国庆1号温州蜜柑GuoqingNo.1(Citruswnshiu)原生质体培养获得的愈伤组织,经体细胞胚发生途径再生植株的研究。结果表明,两步法建立的国庆1号胚性愈伤组织悬浮系,分离的原生质体产量高、活力强,在MA培养基上培养20d时,可获得颗粒性强,具有体细胞胚发生能力的细胞团。这些细胞团在甘油(MT+质量分数2%甘油)培养基上可以获得最好的胚状体诱导效果,但诱导出的小胚状体不能进一步发育,需及时转入液体乳糖(MT+质量分数5%乳糖)培养基上振荡培养20~30d。然后将长至1 0~2 0cm的胚状体转入固体乳糖培养基上,可促使其进一步发育成墨绿色的正常胚状体,最终在生芽培养基上诱导其再生植株。 付春华 文晓鹏 郭文武 邓秀新关键词:温州蜜柑 原生质体 再生植株 胚状体 用流式细胞仪和RAPD快速鉴定柑橘体细胞杂种 被引量:17 2005年 利用流式细胞仪和随机扩增多态DNA(RAPD)方法对获得的3例柑橘体细胞杂种进行鉴定,结果表明,两者相结合可快速有效地鉴定体细胞杂种.所检测的3个组合共9株再生植株,有8株是四倍体体细胞杂种,1株为二倍体叶肉亲本型杂种.体细胞杂种一般表现为具有双亲的特征带,且综合双亲的所有带,但在部分杂种中检测到了双亲都没有的新带,也发现有丢失亲本的特征带或共有带的现象,说明融合后染色体发生了重组和交换;有的引物只检测到叶肉亲本的特征带,根据柑橘叶肉细胞无论单独培养还是共培养均不能再生的事实,可推测其为体细胞杂种或二倍体叶肉亲本型胞质杂种.对这两种方法相结合用于体细胞杂种鉴定的可行性进行了讨论. 付春华 郭文武 邓秀新关键词:柑橘 体细胞杂种 流式细胞仪 随机扩增多态DNA Intergeneric Somatic Hybrid Plants Between Citrus and Poncirus trifoliata and Evaluation of Their Root Rot Resistance 被引量:8 2000年 Protoplasts of Page tangelo (Citrus reticulata Blanco×C. paradisi Macf.) cell suspension culture were electrically fused with mesophyll protoplasts isolated from trifoliate orange (Poncirus trifoliata (L.) Raf.). More than 150 plantlets regenerated after 4-5 months of culture. The regenerated plants were trifoliate with well developed root systems. Root_tip chromosome counting of more than 20 randomly selected plants revealed that they were all tetraploids (2n=4x=36). RAPD analysis of 7 randomly selected plants verified their hybridity. Inoculation of citrus Phytophthora parasitica Dastar toxin on leaves of somatic hybrids and both parental genotypes showed that Page tangelo was moderately susceptible, and trifoliate orange was highly resistant while the somatic hybrids were resistant. The potential of this somatic hybrid as rootstock is also discussed. 郭文武 周长河 伊华林 邓秀新关键词:ELECTROFUSION CITRUS 农杆菌介导法将LFY基因导入苹果的研究 被引量:11 2006年 以M26苹果叶片为外植体,利用GUS瞬时表达率,对农杆菌介导法转化苹果的因素进行优化,通过含LFY基因的根癌农杆菌EHA105转化苹果叶片,获得了提早开花的转基因植株.结果表明:以OD600=0.3~0.5农杆菌菌液侵染叶片,25℃条件下共培养,共培养后的叶片延迟筛选3 d,在附加卡那霉素30 mg/L的再生培养基中选择培养,转化芽再生率可达6.97%.PCR检测初步证明目的LFY基因已整合到苹果基因组中. 刘静 邵建柱 徐继忠 李湘利 郭文武关键词:苹果 农杆菌 LFY GUS 大果少核椪柑新品种华柑3号 2024年 华柑3号是从鄂柑1号的实生苗变异中选育的四倍体大果少核椪柑新品种,2021年获得了农业农村部植物新品种权证书。该品种树势中等偏强,树冠椭圆形,树形较直立,枝细而密。叶片阔披针形,颜色浓绿,全缘,叶尖渐尖,叶基楔形,翼叶不明显。花白色,完全花,多为单花。花瓣较长,多为5瓣花,船形,花丝呈分离状态,花药黄色,花柱直立,柱头球形。 解凯东 陈昊 郭文武关键词:植物新品种权 椪柑 大果 三倍体柑桔幼胚离体培养研究 被引量:24 1997年 三倍体柑桔幼胚离体培养研究伊华林1邓秀新2史永忠2郭文武2(1华中农业大学园艺系;2华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室,武汉430070)关键词柑桔;三倍体;体细胞杂种;胚抢救;有性杂交StudiesonCultureofImmatureTri... 伊华林 邓秀新 史永忠 郭文武关键词:柑桔 三倍体 体细胞杂种 胚抢救 有性杂交 离体培养与柑桔三倍体育种 被引量:11 1997年 离体培养与柑桔三倍体育种郭文武伊华林邓秀新(华中农业大学武汉430070)柑桔是世界上重要水果之一,在我国农业生产中亦占有重要地位。无核或少核是柑桔优质的标志之一,产生无核或少核的原因主要是生殖器官不育或自交不亲和等造成的,通过芽变选种、实生选种、辐... 郭文武 伊华林 邓秀新关键词:柑桔类果树 三倍体育种 柑橘CitSERK基因正义与反义表达载体的构建及其体系优化 被引量:1 2008年 以Kpn I和XhoI双酶切带有CitSERK基因cDNA全序列的T/A克隆载体,同时以Kpn I和XhoI双酶切PMV载体,凝胶回收目的基因片段及PMV载体骨架片段,成功构建了CitSERK基因正义与反义表达载体,并对遗传转化载体构建体系进行了优化。结果表明:以Kpn I和XhoI双酶切带有CitSERK基因的T/A克隆载体和PMV载体,成功得到带有Kpn I和XhoI双酶切位点的目的基因片段和PMV载体骨架片段;酶切检测结果显示,阳性克隆成功酶切出预期大小的CitSERK基因片段和PMV载体骨架片段;2对特异引物PCR检测结果显示,阳性克隆同时扩增出预期大小的CitSERK基因片段。 凡改恩 刘永忠 郭文武关键词:柑橘 柑橘不同倍性种质胚性愈伤组织诱导及无病毒植株再生 被引量:1 2024年 【目的】通过离体培养败育胚珠诱导柑橘二倍体和四倍体种质的胚性愈伤组织,为柑橘多倍体研究提供成对离体材料;继续诱导胚性愈伤组织再生无毒种苗实现柑橘无核品种提纯复壮。【方法】从柑橘成熟果实中挑取败育胚珠,接种于3种愈伤诱导培养基中,在离体培养过程中诱导并驯化胚性愈伤组织;再诱导愈伤组织分化为胚状体和不定芽,将不定芽嫁接到枳橙砧木形成完整植株;通过InDel标记和病毒检测鉴定再生植株的遗传来源和脱毒效果。【结果】离体培养诱导出13个柑橘种质的胚性愈伤组织,其中8个愈伤组织完成驯化,分别为红橘二倍体/四倍体(2x/4x)、W.默科特橘橙2x/4x、鄂柑1号椪柑2x/4x、日辉橘2x和早红脐橙。基因型影响柑橘胚性愈伤组织诱导效率,早红脐橙诱导率高达74.73%,而红橘诱导率仅6.85%;柑橘四倍体愈伤组织诱导率(0.56%~22.61%)低于对应二倍体(6.85%~37.75%)。3种不同培养基的胚性愈伤组织诱导效率不同,其中MGS培养基对温州蜜柑在内的5个品种的诱导率较高(14.13%~63.01%),MK培养基对温州蜜柑在内的4个品种的诱导率较低(21.62%~69.51%),但MK培养基对椪柑2x和红橘2x的诱导率分别为70.21%和17.31%。分别获得早红脐橙、伦晚脐橙、国庆1号温州蜜柑、大分4号温州蜜柑和兴津温州蜜柑5个无核品种的愈伤组织再生苗23、22、20、10和15株;嫁接嵌合体早红脐橙的愈伤组织再生苗经InDel标记鉴定实为罗伯逊脐橙;国庆1号温州蜜柑、伦晚脐橙和早红脐橙再生苗经PCR检测证明未感染黄脉病和衰退病病毒。【结论】柑橘胚性愈伤组织诱导率受品种基因型和培养基影响;同一品种的不同倍性种质,二倍体愈伤组织诱导率和胚状体发生率均较高;胚性愈伤组织再生植株实现了病毒完全脱除,是柑橘无核品种提纯复壮的有效手段。 任家勤 黄雪冰 杨雯惠 陈昊 邓家锐 敖义俊 解凯东 郭文武 伍小萌关键词:柑橘 胚性愈伤组织 无核品种