蔡震
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 100例严重烧伤死亡病例分析
- 目的通过对两阶段烧伤死亡患者基本情况进行对比分析,探讨进一步提高烧伤救治率的有效措施。方法总结近20年死亡烧伤患者100例,按前后各10年各50例患者分组(A 和 B 两组),对其病死率,烧伤面积,烧伤深度,致伤原因,院...
- 刘旭盛颜洪杨晓琨蔡震罗奇志彭毅志黄跃生
- 关键词：严重烧伤气管切开纤支镜吸入性损伤死亡病例
- 文献传递
- 人内皮细胞高表达脂多糖相关因子1蛋白的纯化被引量：3
- 2005年
- 目的探讨通过金属螯合亲和层析的方法获得高纯度的人内皮细胞高表达脂多糖相关因子1(EOLA1)蛋白的可行性。方法采用蛋白抽提试剂破菌方法抽提包涵体蛋白,初步纯化后在变性条件下用组氨酸标签结合树脂进行亲和层析,以透析方法复性,对纯化样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹法、肽质量指纹谱鉴定。结果EOLA1蛋白在大肠杆菌中的表达主要以包涵体形式存在,初步纯化的包涵体中蛋白纯度>75%,亲和层析纯化后获得的蛋白纯度高达90%以上,肽质量指纹谱分析目的蛋白与理论蛋白肽段覆盖率较高。结论所应用的EOLA1蛋白纯化和复性方法简便有效,能够获得足量的高纯度EOLA1蛋白,有助于下一步制备EOLA1单克隆抗体及对相关基因进行功能研究。
- 蔡震梁自文罗向东杨宗城孙荣距苏踊跃
- 关键词：蛋白质复性纯化
- 构建创伤修复相关基因p21表达载体被引量：1
- 2005年
- 目的:构建创伤修复相关基因p21启动子驱动的荧光素酶报告基因表达载体,并评估其稳定性和可靠性。方法:实验于2004-06/08在第三军医大学西南医院烧伤研究所内皮细胞室完成。野生型p21基因启动子全序列经酶切亚克隆入pGL3-basic荧光素酶报告基因载体,重组载体pGL3-p21p转染ECV304细胞,并应用双荧光素酶检测系统检测荧光素酶活性,排除转染过程误差。结果:①目的片段克隆载体与p21基因启动子cDNA序列高度同源。②转染重组载体pGL3-p21p和E47+IPTG诱导细胞荧光素酶活性明显增强,而空载体pGL3-basic的荧光素酶表达处于基础水平,两者比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:构建的野生型p21基因启动子驱动的荧光素酶报告基因载体,转染ECV304细胞后能够表达荧光素酶蛋白,具有稳定和可靠性能。
- 孙荣距杨宗城苏踊跃蔡震唐红英罗向东
- 关键词：基因转染
- 100例严重烧伤死亡病例分析被引量：4
- 2003年
- 目的 通过对两阶段烧伤死亡病人基本情况进行对比分析 ,以期探讨进一步提高烧伤救治率的有效措施。方法 总结近 2 0年死亡烧伤病人 10 0例 ,按前后各 10年各 5 0例病人分组 (A和B两组 ) ,对其病死率 ,烧伤面积 ,深度 ,致伤原因 ,院前治疗情况 ,入院时间 ,存活时间 ,吸入伤 ,气管切开 ,呼吸机与纤支镜的应用 ,手术例次 ,血液透析及死亡原因等进行对比分析。结果 两组烧伤严重程度无差别 ,致伤原因 (多为火焰 ,爆炸和热液 )和死亡原因 (严重全身感染 ,多脏器衰竭和吸入性损伤 )也类似 ,而近 10年烧伤病死率明显降低 ,而入院时间明显滞后 ,但病人入院后存活时间明显延长 ,进一步分析发现近 10年气管切开和呼吸机应用更加积极和应用广泛 ,纤支镜辅助检查和治疗增多 ,手术积极并例次增多 ,血液透析病例增多。结论 近 10年积极的气管切开 。
- 刘旭盛颜洪杨晓琨蔡震罗奇志彭毅志黄跃生
- 关键词：烧伤病死率
- 人新基因EOLA1的原核表达、蛋白纯化及多克隆抗体制备
- 脓毒症(sepsis)是多器官功能障碍(MODS)的前兆，是当前危重病医学面临的难题之一，它也是导致严重烧伤、创伤患者死亡的主要原因之一;其发病机制与内毒素(LPS)激活血管内皮细胞诱发并加重全身炎症反应密切相关。脓毒症...
- 蔡震
- 关键词：原核表达多克隆抗体病理生理
- 文献传递
- 人内皮活化相关新基因eola1的原核表达及鉴定被引量：1
- 2004年
- 目的 获得内皮高表达脂多糖相关因子 1(eola1)表达蛋白并对其进行分析鉴定。方法 采用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)的方法从人ECV 3 0 4细胞中扩增出eola1基因开放阅读框 ,构建重组质粒 ,测序鉴定后转化大肠杆菌 ,IPTG诱导表达 ,裂解细菌抽提蛋白 ,目的蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)、Western免疫印迹鉴定。结果 测序鉴定eola1开放阅读框成功插入PET 46 EK LIC质粒 ;重组质粒在大肠杆菌中成功表达人eola1蛋白 ,主要以包涵体形式存在 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)测定其分子质量约 2 0× 10 3,Westernblot验证出目的蛋白特异表达。结论 应用原核表达系统能够成功获得目的蛋白 ,为下一步制备eola1单克隆抗体及基因功能研究打下基础。
- 蔡震梁自文罗向东杨宗城孙荣距
- 关键词：原核表达重组质粒包涵体
- 人内皮活化相关蛋白EOLA1的纯化
- 目的通过金属螯合亲和层析的方法获得高纯度人内皮细胞高表达脂多糖相关因子1(EOLA1)蛋白。方法采用蛋白抽提试剂破菌方法抽提包涵体蛋白,初步纯化后在变性条件下用组氨酸标签结合树脂进行亲和层析,透析方法复性,对纯化样品进行...
- 蔡震梁自文罗向东杨宗城孙荣距苏踊跃
- 文献传递
- siCASK重组载体构建及效应检测被引量：1
- 2004年
- 目的 构建针对人CASK基因的siRNA质粒 ,建立CASK下调表达的细胞模型 ,为CASK相关的细胞信号研究奠定基础。方法 选择人CASK基因不同靶点 ,体外合成DNA模板 ,经退火后插入到pSilencer3 .1hygro载体的多克隆位点。阳性重组质粒转染ECV3 0 4细胞 ,蛋白印迹。观察siCASK对目的蛋白表达的抑制效率。结果 酶切、测序表明以pSi lencer3 .1hygro为载体的重组质粒siCASK构建成功。siCASK转染细胞后 ,能够明显抑制目的蛋白的表达。结论 成功构建了siRNA重组质粒 ,为下一步CASK功能研究奠定基础。
- 孙荣距杨宗城苏踊跃蔡震唐红英罗向东
- 关键词：RNA干扰内皮细胞
