胡火珍
- 作品数：79 被引量：197H指数：9
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 人胚神经干细胞的体外培养被引量：2
- 2002年
- 目的 探讨人胚神经干细胞体外培养的条件和分化情况 ,以摸索出一种切实可行的能获得较纯且多潜能人胚神经干细胞的方法 .方法 采用取 3月龄人胎脑 ,用胰蛋白酶消化法分离单个细胞 ,部分冻存 ,另一部分进行细胞培养 ,加EGF ,bFGF刺激生长 ,有限稀释法获得单细胞克隆 ,血清诱导分化 ,并用免疫组化方法进行鉴定 .结果 EGF和bFGF同时存在于无血清培养基中 ,有大量神经干细胞团生成 ,含血清培养基则诱导神经干细胞分化成为神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞 .结论 神经干细胞的存活和分裂有赖于EGF和bFGF的共同作用 .经冻存后的胎脑细胞同样能分离培养出有活性的神经干细胞 .
- 王兰胡火珍李小玉陶大昌陈芬
- 关键词：人胚神经干细胞细胞冻存EGFBFGF
- 大鼠胚胎神经干细胞的培养和鉴定
- 2002年
- 目的 体外培养和鉴定神经干细胞 .方法 从胎鼠前脑取出脑组织 ,采用酶消化、机械吹打、对倍稀释成单个细胞 ,经无血清培养获得单细胞克隆 ,由免疫细胞化学方法鉴定分离的神经干细胞 .结果 从胎鼠脑中分离的细胞具有连续传代形成克隆的能力 ,表达神经干细胞蛋白 (nestin) ,并能诱导分化成神经元和神经胶质细胞 .结论 分离的细胞是神经干细胞 .
- 庞栋胡火珍羊惠君潘克俭郑雪莲陶大昌李小玉陈芬
- 关键词：神经干细胞克隆细胞培养
- 神经营养素-3的克隆与真核表达被引量：1
- 2002年
- 目的 构建人神经营养素 - 3(NT 3)的真核表达质粒 .方法 由于NT 3基因中无内含子 ,因此直接运用PCR技术从人基因组DNA中分离出人NT 3完整基因 ,与 pcDNA3.1(- )载体重组并测序 ,获得pcDNA NT3.用脂质体介导法将重组质粒转染人胚肾 2 93A细胞株 ,经G4 18筛选后 ,用RT PCR和免疫荧光法在转录和翻译两个水平上检测表达产物 .结果 测序证实所获得的是正确的重组质粒 .它的转录和翻译产物均可在细胞中检测到 .结论 成功地进行了NT 3的克隆与真核表达 ,NT 3基因修饰后的胚胎细胞有可能对神经轴突的生长起指导作用 .该实验结果为深入研究NT 3的生物学作用创造了条件 ,为基因修饰细胞移植治疗神经疾病的实验研究奠定了基础 .
- 张伶俐胡火珍李小玉郑雪莲
- 关键词：神经营养素-3真核表达克隆
- 小鼠颌下腺合成造血相关细胞因子的研究
- 2002年
- 作者对小鼠颌下腺合成的与造血相关的细胞因子进行了研究 ,免疫组化研究结果显示 ,正常雄性和雌性小鼠颌下腺部分分泌导管的上皮细胞有bFGF ,IGF Ⅱ免疫活性 ,说明小鼠颌下腺导管的上皮细胞能生成上述细胞因子 ;小鼠颌下腺未能显示EPO ,GM CSF ,IL 6免疫活性 ,提示小鼠颌下腺没有生成上述因子或生成量达不到可检出水平 .RT PCR检测结果显示 ,所有小鼠颌下腺样本均有bFGF ,IGF ⅡmRNA的表达 ;10例样本有 3例有IL 6mRNA的表达 .所有样本均未检测到EPO ,GM CSF ,TPOmRNA的表达 .上述结果提示 ,小鼠颌下腺似乎可能不是通过分泌EPO ,GM CSF ,TPO来促进造血 ,而可能通过分泌其它已知 (bFGF ,IGF Ⅱ及IL 6 )或未知的细胞因子促进造血 .
- 潘克俭祝彼得胡火珍刘小菁王西岩冯敏
- 关键词：小鼠颌下腺EPOGM-CSFTPO
- 用精原细胞介导法制备乙肝病毒X基因转基因小鼠的实验研究被引量：5
- 2003年
- 目的 探讨精原细胞介导法制备乙肝病毒 X基因转基因小鼠的可行性。方法 构建乙肝病毒 X基因表达载体 pc DNA3- X;应用微量注射针将脂质体包裹的 pc DNA3- X表达载体直接注入 C57BL/ 6 N雄性小鼠睾丸的曲细精管内 ,于第一次注射后 6周 ,与雌鼠交配 ,用 PCR法和免疫组化法检测仔鼠基因组中的外源 DNA和肝组织中表达的 p X蛋白。结果 测序结果与文献报道一致 ,并且 X基因在 Hela细胞中表达 ;共产仔鼠 16只 ,其中 1只为阳性仔鼠 ,阳性率为 6 .2 5 %。结论 初步证明用精原干细胞介导法制备
- 胡火珍李丹李小玉姚玉成胡以平
- 关键词：乙肝病毒X基因转基因小鼠精原细胞
- SD大鼠间充质干细胞的分离培养及生物学特性初探被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨体外分离培养、纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)的方法,明确增殖及生长特征。方法:从骨髓中提取间充质干细胞,加入淋巴分离液后用密度梯度离心培养法和静止贴壁培养法,分离纯化大鼠骨髓MSCs,对其进行传代扩增和形态学观察,细胞计数,绘制生长曲线。结果:(1)通过离体培养,可使体内环境下低丰度的骨髓间充质干细胞实现数目扩增;(2)体外单层培养条件下贴壁生长的骨髓间充质干细胞大多数具有成纤维细胞生长特性。结论:对比两种分离方法可知淋巴分离法更有利于骨髓间充质干细胞的纯化,体外培养成功为今后进一步利用体内间充质干细胞研究细胞衰老,并建立衰老模型奠定了基础。
- 吴敏亢军琪林洪韩善华胡火珍
- 关键词：SD大鼠生物学特性体外分离培养密度梯度离心干细胞研究衰老模型
- 可溶性人干细胞因子的原核表达和纯化
- 2005年
- 用Trizol提取人骨髓总RNA,通过RT PCR扩增人干细胞因子DNA,克隆到pMD18 T载体中并测序将其定向连入原核表达载体pET32a(+),获得了重组表达载体pET32a(+)/hSCF,其cDNA长度为504bp,测序结果与已知序列吻合然后在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达,获得37kD的融合蛋白,约占菌体总蛋白量的30% 经Ni2+
- 肖冰孙元田徐洁杰潘克俭胡火珍
- 关键词：人干细胞因子原核表达纯化
- 人神经营养素-4基因的原核表达与纯化
- 2005年
- 以人外周血淋巴细胞基因组DNA为模板,用PCR方法扩增出神经营养素4基因(NT 4)成熟蛋白的DNA序列,并将其克隆到表达载体pET32a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经异丙基βD 半乳糖苷(Isopropyl beta D thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后高效特异表达了分子量约为35kD的蛋白,诱导表达的蛋白主要存在于包涵体中,经Ni2+ NTA树脂亲和层析纯化,得到了纯度达94%的NT 4成熟蛋白的融合蛋白为进一步研究NT
- 孙元田肖冰徐洁杰潘克俭陈平胡火珍
- 关键词：原核表达融合蛋白分离纯化
- AK078438基因的克隆、蛋白质纯化及其在小鼠中表达和功能的初步研究
- AK078438基因是一个功能未知的新基因。通过 RT-PCR 方法扩增出 AK078438基因的全长开放阅读框, 构建了 AK078438基因的原核克隆表达载体。经诱导表达,亲和层析纯化该基因的融合蛋白并制备多克隆抗
- 李正黄林杨寒朔胡火珍
- 关键词：多克隆抗体表达谱细胞凋亡
- 文献传递
- 拮抗丸诱发果蝇隐性伴性致死研究
- 1989年
- 采用十八反中甘遂、芫花、大戟、甘草等药物配制成的拮抗丸,经临床观察,对多种肿瘤有一定的疗效,为了评价该丸药的安全性,探讨其有无诱变作用,对生殖细胞中的遗传物质是否有损伤,本文对拮抗丸进行了果蝇隐性伴性致死研究。现介绍如下。
- 胡火珍邢一玲赵呈裕梁金新杨绍华林通国赵呈明
- 关键词：致死果蝇
