罗茂凰 作品数:17 被引量:69 H指数:5 供职机构: 天津出入境检验检疫局 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 农业科学 更多>>
奶粉中阪崎肠杆菌PCR检测方法研究 被引量:19 2005年 〔目的〕建立和提出奶粉中阪崎肠杆菌PCR检测方法。〔方法〕利用细菌16S和23SrDNA的保守区作为通用引物,对6株阪崎肠杆菌16S^23SrDNA间区序列(ISR)进行了扩增和测序,在比较阪崎肠杆菌与其近源株16S1~23SrDNA间区序列的基础上,设计了11条阪崎肠杆菌PCR检测引物,组合成30对PCR引物并筛选出一对阪崎肠杆菌PCR检测的特异性引物,建立了奶粉中阪崎肠杆菌PCR检测方法。〔结果〕用10株阪崎肠杆菌,18株近源菌验证试验表明,本文所建立的PCR方法特异性强;加菌试验表明,奶粉样品中阪崎肠杆菌检测低限为2.2~5.4cfu/100g,灵敏度高;新建的PCR方法与FDABAM方法比较试验表明,两种方法的检测结果完全符合。〔结论〕本文提出的奶粉中阪崎肠杆菌PCR检测方法填补了国内空白,达到了国际先进水平,可在实际工作中推广。 高旗利 张霞 罗茂凰 张海滨 张海英 姚霞 张宏伟 刘寅 黄熙泰关键词:奶粉 阪崎肠杆菌 肠杆菌 RDNA间区 PCR方法 通用引物 奶粉中坂崎肠杆菌检测方法研究 被引量:3 2005年 目的:寻找一种快速简便的奶粉中坂崎肠杆菌的检测方法。方法:通过对不同增菌液及分离平板的试验比较,选择对坂崎肠杆菌的检测适宜的预增菌液及分离平板。结果:通过参考菌株的添加试验,灭菌蒸馏水和缓冲蛋白胨水作为检测的预增菌液,增菌效果差异没有显著性,将34株肠杆菌科细菌的参考菌株分别划线接种于显色培养基琼脂(Xα-G lcA)、山梨醇麦康凯琼脂(SMAC)、四甲基伞形酮培养基(NA+α-MUG)和结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRB-GA),选择性分离效果最好的是Xα-G lcA。结论:推荐使用无菌蒸馏水作为检测的预增菌液,Xα-G lcA或VRBGA为分离平板,API 20E生化试剂盒或VITEK进行生化鉴定。 罗茂凰 张海英 张海滨 高旗利 张霞 姚霞 赵贵明关键词:奶粉 口岸地区非典型肺炎的防治 2003年 刘云凯 章秀玲 罗茂凰 吕智军关键词:非典型肺炎 冠状病毒 流行病学特征 疫情管理 预防措施 食品安全和食源性疾病 被引量:1 2003年 罗茂凰 张海滨关键词:食品安全 沙门氏菌病 弯曲杆菌病 霍乱 乳粉中克雷伯菌检测方法的研究 被引量:2 2006年 目的:建立一种快速、简便的乳粉中克雷伯菌检测方法。方法:通过对不同增菌液及分离培养基的试验比较,确定乳粉中克雷伯菌检测的增菌液及分离培养基。结果:添菌试验表明,灭菌蒸馏水和缓冲蛋白胨水作为检测的预增菌液,增菌效果没有显著性差异;33株参考菌株菌落形态观察、灵敏性及特异性试验表明分离效果最好的是麦康凯肌醇阿东醇羧苄青霉素培养基(M IAC)。结论:推荐采用灭菌蒸馏水作为检测的预增菌液,M IAC为分离培养基,API 20E生化鉴定卡或V1TEK进行生化鉴定。 高虹 张霞 罗茂凰 张海滨 张海英 黎径 高旗利关键词:克雷伯菌 乳粉 实时荧光PCR对奶粉中坂崎肠杆菌的检测 被引量:20 2006年 目的:研究奶粉中坂崎肠杆菌实时荧光PCR检验方法。方法:针对坂崎肠杆菌16 s^23 s rDNA间区序列(ITS)设计一对SYBR G reenⅠ染料法引物、一对TaqM an探针法引物及探针,建立奶粉中坂崎肠杆菌实时荧光PCR检验方法,并对实时荧光PCR法、传统方法及PCR方法进行比较。结果:用10株坂崎肠杆菌,18株近源菌验证试验表明,本文所建立的两种实时荧光PCR方法特异性强;加菌试验表明,奶粉中坂崎肠杆菌有1.1 cfu/100 g时就可检出,灵敏度高;检验时间仅需2 d。结论:本文提出的奶粉中坂崎肠杆菌实时荧光PCR检验方法可在实际工作推广。 张霞 高旗利 罗茂凰 张海滨 张海英关键词:奶粉 SYBR 质检机构(实验室)计量认证工作探讨 1997年 通过对实验室计量认证工作的探讨,提出做好计量认证工作的基本方法。 罗茂凰 左国华关键词:实验室 食品卫生 卫生监督 全文增补中 改良方法检验冷冻海产品中副溶血性弧菌 2004年 【目的】建立一种有效、可靠的方法检验冷冻海产品中副溶血性孤菌,弥补传统法的局限。【方法】用改进碱性胨水(MAPW)和盐结晶紫增菌液(SVPE)同时对5种冷冻海产品50份样进行增菌后,分别接种至科玛嘉孤菌显色培养基(CV)和硫代硫酸钠柠檬酸胆盐蔗培养基(TCBS),以评估两种增菌液和两种分离培养基的效果;随机选取改良方法检出的10个分离株,用。PGR技术扩增副溶血性弧菌特tI基因,以认证改良方法的准确性。【结果】当采用改良方法,即MAPW增菌CV分离时,检出率为100%;当采用传统法即SVPE增菌TCBS分离时,检出率为60%~80%;用PCR技术在选取的10个分离株中都扩增出了tI基因。[结论】改良方法是一种高效、准确的检验方法。 高旗利 罗茂凰 张海滨 张海英 蔡国瑞 高虹关键词:副溶血性弧菌 改良法 增菌液 “珍河”轮食品库空气、食品二甲苯污染的调查分析 1994年 远洋船舶“珍河”号首航途中食品库出现异味累及食品,经调查检验证实为内墙壁涂料中挥发出的二甲苯所致.提出处理意见,并建议加强对船舶及国境口岸卫生的监督管理. 罗茂凰 杨顺义 张保华 张志强关键词:食品库 空气污染 食品污染 卫生监督 全文增补中 改良方法检验冷冻海产品中副溶血性弧菌 被引量:6 2004年 〔目的〕 建立一种有效、可靠的方法检验冷冻海产品中副溶血性弧菌 ,弥补传统法的局限。〔方法〕 用改进碱性胨水 (MAPW)和盐结晶紫增菌液 (SVPE)同时对 5种冷冻海产品 5 0份样进行增菌后 ,分别接种至科玛嘉弧菌显色培养基 (CV)和硫代硫酸钠柠檬酸胆盐蔗糖培养基 (TCBS) ,以评估 2种增菌液和 2种分离培养基的效果 ;随机选取改良方法检出的 1 0个分离株 ,用PCR技术扩增副溶血性弧菌特有tl基因 ,以认证改良方法的准确性。〔结果〕 当采用改良方法 ,即MAPW增菌CV分离时 ,检出率为 1 0 0 % ;当采用传统法即SVPE增菌TCBS分离时 ,检出率为 6 0 % - 80 % ;用PCR技术在所选取的 1 0个分离株中都扩增出了tl基因。〔结论〕 改良方法是一种高效、准确的检验方法。 高旗利 罗茂凰 张海滨 张海英 蔡国瑞 高虹关键词:冷冻 弧菌 副溶血性 海产品